课件第五章 消毒与灭菌

第五章

消毒、灭菌和生物安全1/35

生长繁殖微生物

变异

死亡

环境变化环境合适

环境剧变概述2/35

基本概念

消毒(disinfection)：杀死物体上或环境中病原微生物、并不一定杀死细菌芽胞或非病原微生物办法。

灭菌(sterilization)：杀死物体上所有微生物方法，包括芽孢。

抑菌(bacteriostasis)：抑制体内或体外细菌生长

繁殖办法。。3/35

基本概念防腐(antisepsis)：避免或抑制体外细菌生长繁殖办法。无菌(asepsis)：不存在活菌意思。

无菌操作：避免微生物进入人体或其他物品操作技术。

4/35例：外科手术无菌操作内服抗生素抑菌接种环火焰烧灼无菌火化灭菌局部皮肤75%酒精擦拭消毒

5/35一、消毒灭菌办法常用消毒和灭菌办法物理消毒灭菌法化学消毒灭菌法6/35

（一）物理消毒灭菌法

1、热力灭菌法

原理：破坏菌体蛋白质与核酸，蛋白质变性

凝固，核酸解链崩解，造成细菌死亡。7/35

常用热力灭菌法种类办法效果用途干热焚烧点燃或焚烧炉

灭菌废弃污物、尸体烧灼火焰烧灼

灭菌接种环，试管口干烤红外线

干烤箱，热空气

160-170ºC2h

电磁波热效应

灭菌

灭菌玻璃器皿等耐高温物品医疗器械湿热煮沸法100ºC，5-10min，沸水

消毒饮水.食具.注射器高压蒸气灭菌法

高压蒸气灭菌器1.05kg/cm2、

121.3ºC×15-20min

灭菌耐高温、耐湿物品如：NS.培养基.

手术衣8/35

常用热力灭菌法种类办法

效果

用途湿热巴氏消毒法61.1-62.8℃×30min，72℃×15sec（常用）

消毒（杀死病原菌，不破坏营养成份）流通蒸气灭菌法80-100℃蒸气

×15~30min牛奶，酒类消毒（杀死繁殖体，不杀死芽胞）不耐高温、高压物品间歇灭菌法反复数次流动蒸气灭菌不耐高温含糖、牛奶培养基9/35湿热效力大于干热原因（1）湿热中细菌菌体蛋白较易凝固变性 （2）湿热穿透力比干热大 （3）湿热蒸汽有潜热效应10/35高压蒸汽灭菌器11/352、辐射及声波杀菌法

（1）紫外线（ultravioletray,UV)

:265nm-266nm（最佳杀菌波长）

杀菌原理：使DNA上相邻T碱基通过共价键结合成二聚体，干扰DNA复制与转录，造成细菌死亡

特点：穿透力弱

适用范围：适于空气和物体表面消毒。12/35

（2）电离辐射如：高速电子，X-ray，

-ray

机理：自由基及自由基离子破坏微生物蛋白质、核酸、酶死亡适用物品：不耐热物品（药品及医疗用具）

（3）微波（microwave)

机理：热效应

适用物品：非金属物品、食品13/353、其他除菌或抑菌法(1)滤过除菌法(filtration)

机理：用物理阻留办法将液体或空气中细菌除去,以达成无菌目标

器具：滤菌器（filter）

适用物品：不耐高温物品（血清、

毒素、抗生素）以及空气

等除菌。14/35(2)干燥与低温抑菌法在低温状态下真空抽去水分冷冻真空干燥法：用途：保存菌种干燥法：抑菌，用于：保存食物15/35

（二）化学消毒灭菌法消毒剂杀菌机理：

1.使菌体蛋白变性和凝固酚、醇、酸硷、醛类重金属盐类(高浓度)2.干扰细菌酶系统及代谢(破坏-SH，酶失活)

氧化剂、重金属盐类(低浓度)3.损伤菌细胞膜酚类(低浓度)、表面活性剂4.损伤核酸烷化剂、染料等16/35按杀菌能力可将消毒剂可分消毒剂类型种类杀菌机理范围高效消毒剂含氯消毒剂次氯酸钠等酶失活和氧化饮用水、地面等过氧化物类过氧化氢等酶活性丧失物品表面和皮肤醛类甲醛、戊二醛蛋白、核酸变性器械环氧乙烷环氧乙烷蛋白、核酸变性医疗器械中效消毒剂含碘消毒剂碘酊、碘伏氧化、沉淀蛋白皮肤、体温计等醇类乙醇或异丙醇蛋白变性皮肤、体温计等低效消毒剂季铵盐类新洁尔灭表面活性剂地面、皮肤等氯己定氯己定表面活性剂皮肤黏膜等高锰酸钾高锰酸钾氧化餐具、水果等17/35类别 作用机制 常用种类酚类 蛋白变性，细胞膜损伤 石炭酸醇类 蛋白变性 乙醇（70%-75%）氧化剂氧化、蛋白沉淀 高锰酸钾、过氧乙酸碘酒重金属盐氧化、蛋白酶变性 红汞、硫柳汞表面活性剂 变化细胞壁、膜通透性 新洁尔灭染料 干扰氧化、抑制繁殖 龙胆紫烷化剂菌体蛋白质及核酸烷基化甲醛、环氧乙烷常用消毒剂种类（按化学成份）18/35常用消毒剂应用种类使用浓度用途石炭酸3%~5%地面、器具表面、皮肤消毒乙醇70%~75%皮肤、体温计消毒高锰酸钾0.1%皮肤、尿道、蔬菜、水果消毒红汞2%皮肤、粘膜、小创伤消毒硫柳汞0.1%皮肤消毒、手术部位消毒过氧乙酸0.2%~0.3%塑料、玻璃器材消毒碘酒2.0%~2.5%皮肤消毒新洁尔灭0.4~1.6%手术洗手、浸泡手术器械龙胆紫2%~4%浅表创伤消毒19/35消毒剂微生物

环境性质浓度作用时间种类数量有机物温度酸碱度二、影响消毒灭菌效果原因20/35

（三）生物安全

生物安全（biosafety）是生物技术安全（safetyofbiotechnology）简称。

狭义地指当代生物技术研究、开发、应用及转基因生物也许对生物多样性、生态环境和人类健康产生潜在危害。

广义地指与生物有关多种原因对社会、经济、人类健康及生态环境所产生危害或潜在风险。21/35

病原微生物所致安全问题，如病原微生物试验室安全隐患、生物武器、生物恐怖、重大传染病爆发流行等，也是人类社会所面临最现实生物安全问题。

病原微生物试验室生物安全关键是防扩散和防感染。

有关病原微生物试验室生物安全，我国法令包括对病原微生物分类管理，对试验室分级管理，试验室感染控制以及监督和法律责任等。

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一、病原微生物分类

根据传染性、感染后对个体或者群体危害程度，病原微生物分为四类：

第一类：能够引发人类或者动物非常严重疾病微生物，以及我国尚未发觉或者已经宣布消灭微生物。如天花、埃博拉病毒等。

第二类：能够引发人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传输微生物。如乙脑、狂犬病病毒、HIV、脊灰、结核、霍乱等。

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一、病原微生物分类

第三类：能够引发人或动物疾病，但一般情况下对人、动物或环境不组成严重危害，传输风险有限，试验室感染后很少引发严重疾病，并且具有有效治疗和预防措施微生物。如肝炎、风疹、疱疹、流感、破伤风病毒等。

第四类：在一般情况下不会引发人或动物疾病微生物。如小鼠白血病病毒等。

第一类、第二类统称为高致病性病原微生物。24/35二、病原微生物试验室分级级别处理对象一级对人体、动植物或环境危害较低，不具有对健康成人、动植物致病致病因子。二级对人体、动植物或环境具有中等危害或具有潜在危险致病因子，对健康成人、动植物和环境不会造成严重危害，具有有效预防和治疗措施。三级对人体、动植物或环境具有高度危险性，主要通过气溶胶使人类传染上严重甚至是致命疾病，或对动植物和环境具有高度危害致病因子。一般有预防治疗措施。四级对人体、动植物或环境具有高度危险性，通过气溶胶途径传输或传输途径不明或未知危险致病因子。没有预防治疗措施。25/35

一、二级试验室不得从事高致病性病原微生物试验活动。三级、四级试验室从事高致病性病原微生物试验活动。

从事高致病性病原微生物有关试验活动应当有２名以上工作人员共同进行。在同一种试验室同一种独立安全区域内，只能同步从事一种高致病性病原微生物有关试验活动。应有健全安全保卫制度。

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试验室工作人员应掌握试验室技术规范、操作规程、生物安全防护知识和实际操作技能。应有符合要求防护用具，应建立健康档案；进行预防接种。试验室应有科学、严格管理制度，定期对试验室设施设备、材料等进行检查、维护和更新，应对废水、废气以及其他废物进行合理处置，避免环境污染。

27/35生物安全28/3529/3530/35三、试验室感染控制以及监督和法律责任

试验室感染控制工作包括定期检查试验室生物安全防护、病原微生物菌（毒）种和样本保存与使用、安全操作、试验室排放废水和废气以及其他废物处置等实行情况。

试验室发生高致病性病原微生物泄漏时，预防、控制措施包括：①封闭被病原微生物污染试验室或也许造成病原微生物扩散场所；②开展流行病学调查；③对病人进行隔离治疗，对有关人员进行医学检查；④对密切接触者进行医学观测；⑤进行现场消毒；⑥对染疫或者疑似染疫动物采取隔离、扑杀等措施。31/35

监督主要内容是监督病原微生物试验室执行国家有关法律、行政法规、国标和要求统计、档案及报告情况。

法律责任关键是承当造成传染病传输、流行或者其他严重后果法律责任。32/35思考题

消毒、灭菌、防腐、无菌（操作）概念湿热灭菌有哪些办法?各有何用途?（温度、时间、物品）筒述紫外线杀菌作用机制和注意事项33/351.杀灭芽胞最常用和最有效办法是：____________。a.紫外线照射b.煮沸5minc.巴氏消毒法d.流通蒸气灭菌法e.高压蒸气灭菌法2.灭菌办法错误是____________。a.