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生物安全培训

郭洁职业暴露与感染实验室工作可能发生职业暴露职业暴露可能发生感染实验室职业暴露感染的途径实验室职业暴露可发生在实验室工作或逗留的任何时间呼吸道吸入经口摄入针刺或锐器刺伤皮肤、粘膜污染叮咬呼吸道传播呼吸道传播的微生物主要存在于气溶胶中并可引起人类感染举例：结核分枝杆菌炭疽杆菌SARS冠状病毒

……呼吸道传播气溶胶（aerosol)是指固体或液体微粒稳定地悬浮于气体介质中形成的胶溶状态分散体系其中的气体介质为连续相，通常为空气其中的微粒为分散相，成份复杂，大小不一呼吸道传播按微粒的大小粒径＜10μm的称为可吸入颗粒，又因其重量轻，在空气中漂浮的时间长而称为飘尘粒径＞10μm的因重力作用而迅速下沉而成为降尘呼吸道传播微生物气溶胶粒子直径＞10μm，一般被阻留在鼻腔内粒子直径5-10μm，可到达支气管粒子直径＜5μm，可进入细支气管和肺泡粒子直径越小，其到达的部位越深，小于1μm的粒子在肺泡内沉积率最高粒子直径＜0.4μm可自由进出肺泡呼吸道传播气溶胶可在实验室内长时间漂浮并随气流在室内流动工作人员在实验室内工作，甚或逗留期间通过吸入含有致病微生物的气溶胶颗粒发生暴露并可致感染消化道摄入传播经消化道摄入传播的微生物主要存在于粪便、食物等中，可引起人类消化道感染举例：志贺菌属细菌沙门菌属细菌葡萄球菌属细菌消化道摄入传播经消化道摄入传播的胃肠道感染可发生在无意识的手-口途径污染时传染性液体喷溅入口时在实验室进食、饮水时

……经血传播经血传播的微生物是存在于血液中并可引起人类疾病的生物病原体举例：HBVHCVHIV疟原虫梅毒螺旋体

……经血传播被经血传播的病原体感染的患者血液、或有可见的血污染的体液；以及精液、阴道分泌物、关节液、内脏器官周围液体等可传播血传病原体经血传播而致的感染主要发生在针刺意外时锐器刺伤时蚊虫、动物叮咬时破损的皮肤或粘膜污染时……临床实验室内小气候临床实验室由于其规模、建筑布局、周围环境、内部分隔、设备、人员拥挤程度及通风条件等的不同而有不同的室内小气候，并可能导致实验室内病原体的浓度增加,使实验室内感染机会明显大于室外临床实验室内小气候临床实验室在工作过程中可能造成实验室环境的污染，如离心、混匀、接种、制片、移液、加样等均可产生气溶胶污染，标本喷溅等可直接污染皮肤粘膜及实验台面和地面等另外，啮齿动物、昆虫等也都可携带并传播微生物病原体，给实验室工作人员健康带来威胁临床实验室内小气候临床实验室的标本或生物材料中可能携带的潜在病原微生物往往是未知而多样的根据处理和检测的标本不同、检测目的和方法不同，临床实验室藏匿的具有潜在感染能力的微生物的种类、数量和存在形式亦不同微生物危害评估当建设使用传染性或有潜在传染性材料的实验室前，必须进行微生物危害评估。确定对象微生物应在那一级的生物安全防护实验室中进行操作。制定相应的操作规程，实验室管理制度和紧急事故处理方法，必须形成书面文件并严格遵守执行。实验室生物安全防护水平一级防护屏障是指生物安全柜和个人防护装备等构成的防护屏障二级防护屏障是指实验室的设施结构和通风系统等构成的防护屏障实验室生物安全防护水平根据使用的一级和二级防护屏障的不同，实验室生物安全防护水平（biosafetylevel,BSL）分为四级。按防护水平由低到高排列即：一级生物安全水平（BSL-1）二级生物安全水平（BSL-2）三级生物安全水平（BSL-3）四级生物安全水平（BSL-4）实验室生物安全防护水平不同级别的生物安全防护实验室都是基于确保处理特定传染性病原体时的工作人员和环境的安全而进行设计的实验室生物安全防护水平BSL-1是围护屏障水平和生物安全级别最低的生物实验室，在该级别实验室中进行的操作都是在室内开放空间进行的在其中活动所涉及的生物因子应是已知不引起健康成人感染的微生物但是应注意这些微生物也许有可能引起幼儿、老人或免疫抑制患者的机会感染

实验室生物安全防护水平BSL-2主要用于处理中度危险的病原体，如沙门菌属和乙型肝炎病毒等这些病原体可能通过意外的经口摄入或经皮肤、粘膜暴露而感染在遵守标准操作程序的情况下，这些病原体的处理可在开放实验台进行但是，如预期有发生喷溅或可产生气溶胶时应使用生物安全柜等

实验室生物安全防护水平BSL-3是为应对主要通过气溶胶传播的病原微生物如结核分枝杆菌等的实验室操作而设计的BSL-3有严格的操作规程和程序，使用一级和二级防护屏障，同时对于诸如通风系统都有特殊的要求实验室生物安全防护水平BSL-4用于可引起致命疾病的病原体的处理和实验操作这些病原体（如出血热病毒）可能通过气溶胶传播的或者没有有效的疫苗预防或没有有效的治疗方法BSL-4实验室的实验操作一般地应在Ⅲ级生物安全柜内进行，或由身着正压防护服的工作人员进行操作处理BSL-4实验室应是完全独立的实验室，其通风系统和废弃物处理亦应完全独立实验室生物安全防护水平实验室生物安全防护可粗略的分为呼吸道传播微生物的防护（主要指对气溶胶的防护）其他途径传播微生物的防护（主要指经血液、经消化道或经啮齿动物等途径传播的微生物的防护）个体防护装备鞋套、帽子、合适的口罩、手套、护目镜、常规实验服、背开式隔离衣、连体防护服等穿戴防护用品流程穿工作服（衣、裤）穿工作鞋戴（防护）口罩穿隔离衣戴第一层手套戴第二层手套戴帽子必要时洗手必要时戴防护眼镜、面罩BSL-2实验室个体防护摘脱防护用品流程摘外层手套脱隔离衣摘帽子摘里层手套脱工作服、鞋摘（防护）口罩必要时消毒手套若有摘防护眼镜、面罩规范洗手临床实验室岗位安全风险采血岗位:针刺、喷溅、气溶胶污染污染呼吸道标本采集岗位：飞沫和气溶胶污染标本运送、接收岗位：容器表面污染、标本泄露和泼洒污染标本离心岗位：离心管破碎或盛装过满造成标本泄漏、、离心结束前的制动过程中、可产生大量具有潜在感染性的气溶胶颗粒其他岗位：标本污染、泄露、气溶胶污染临床实验室岗位安全风险酶联免疫吸附试验、胶体金免疫试验、免疫凝集试验检测岗位气溶胶污染使用加样枪或滴管加样时可产生气溶胶粒子，特别在吹出最后一滴液体时；手工洗涤时可产生气溶胶粒子泄露和泼洒污染手工加样可发生样本滴落污染台面等；加样时可发生反应板表面污染；洗板时可发生洗液污染反应板表面；标本管破裂、倾倒可产生血液外泄临床实验室岗位安全风险细菌学标本接种、鉴定岗位泄露和泼洒污染容器破裂可造成标本泄露；容器倾倒可造成标本泼洒；临床采集标本时可发生容器外表面污染；接种时可造成标本滴落污染台面等；在手工开盖时可发生标本污染手指或环境；制备涂片时可污染手指或环境气溶胶污染取菌环接种可产生气溶胶粒子污染；制备涂片和悬液可产生气溶胶粒子污染；标本处理过程中的离心、重悬浮等可产生气溶胶粒子污染各类紧急情况处理手部清洗消毒推荐使用肘动式或者自动式洗手开关流动水冲洗手部多次，然后用液体皂滴在手上，反复撮手，在用水彻底冲洗清洗完毕再用干净的纸巾或手巾擦干可用75%的酒精擦手来清除双手的轻度污染在没有洗手池的地方，可以使用含酒精的“免洗”手部清洁产品代替刺伤、切割伤或擦伤应急处理

保持镇静，立即停止实验，脱掉手套。用清水或肥皂水清洗伤口。尽量挤出伤口处的血液，取出急救箱，用碘酒或75%的酒精擦洗伤口适当的包扎。及时就医，告知医生受伤原因及可能的微生物污染，必要时要进行医学处理。向实验室安全员报告，进行事故记录。生物安全柜内溢出处理

处理溢洒物时不要将头伸入安全柜内，也不要将脸直接面对前操作口，而应处于前视面板的后方。选择消毒剂时需要考虑消毒剂对生物安全柜的腐蚀性。如果溢洒的量不足1ml时