黄芩提取物、黄芩苷抗氧化和抗小鼠肝损伤作用研究

黄芩提取物、黄芩苷抗氧化和抗小鼠肝损伤作用研究

黄鼠尾是嘴唇科的科(。11.1动物合格scxkKM小鼠120只,雄性,体质量18～22g,由河南省医学实验动物中心提供,动物合格证号:SCXK(豫)200420007。1.2试剂与研究方法黄芩,购买于郑州市区内张仲景大药房;当飞利肝宁胶囊,四川美大康药业股份有限公司产品,批号080421;二苯代苦味酰基自由基[1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazylradical2,2-Diphenyl-1-(2,4,6-trinitrophenyl)hydrazyl,DPPH],日本东京化成工业株式会社产品,批号08110127;没食子酸丙酯(Propylgallate,PG),日本东京化成工业株式会社产品,批号08271928;丁基羟基茴香醚(Butylatedhydroxyanisole,BHA),日本东京化成工业株式会社产品,批号07171839;二丁基羟基甲苯(Butylatedhydroxytoluene,BHT),Acrosorganics公司产品,批号08172839;四氯化碳分析纯,开封化学试剂总厂产品,批号030221;精制纯大豆油,金龙鱼公司产品,生产日期200852912718;谷草转氨酶(GOP)测定试剂盒(批号090608)、谷丙转氨酶(GPT)测定试剂盒(批号080908)、丙二醛(MDA)测定试剂盒(批号080706)及超氧化物歧化酶(SOD)测定试剂盒(批号0800804),均为南京建成生物工程研究所产品;其他试剂均为分析纯。1.3磁力加热除尘器UV-2000型紫外可见分光光度计,尤尼可上海仪器有限公司产品;AE24型电子天平,梅特勒-托利多仪器有限公司产品;磁力(加热)搅拌器,金坛市友联仪器厂产品;985370-395型组织匀浆机,墨西哥BIOSREC公司产品;TGL-16高速离心机,江苏金坛市中大仪器厂产品;H-12型超声波清洗器,昆山市超声仪器有限公司产品;CS-11型混合器,北京博励阳科技公司产品。1.4进行浓缩和浓缩取干燥的黄芩根3.25kg,粉碎;用丙酮∶水为7∶3的溶液浸泡两次,第1次7d,第2次3d;均回收丙酮进行浓缩,合并两次浓缩液;分别用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取得到黄芩的3个药用部位,分别为黄芩石油醚部位(HQPE)、黄芩乙酸乙酯部位(HQEA)和黄芩正丁醇部位(HQBU);干燥称重,得黄芩石油醚部位55.2g,黄芩乙酸乙酯部位为81.5g,黄芩正丁醇为175g,换算成原药材得率依次为1.69%、2.51%、5.38%。1.5稀盐酸溶液沉淀法取干燥的黄芩根2.27kg,加入10倍量水煎煮两次,每次1h;过滤,合并两次滤液;用稀盐酸调节溶液pH到1～2,放置过夜;过滤;用蒸馏水洗沉淀物至pH5.0;再用醇洗至pH7.0,得到黄芩苷。干燥称量,得到黄芩苷219.25g。1.6分析方法及原理DPPH方法测定体外抗氧化原理:DPPH(二苯代苦味酰基自由基)是一种很稳定的以氮为中心的自由基,其孤对电子在515nm处有强吸收,当有供氢能力的抗氧化剂存在时,孤对电子和氢结合配对,使DPPH在515nm处的吸收消失或减弱,而吸光度变小的程度和自由基被消除的程度呈定量关系,因而可以用分光光度法进行定量分析ABTS方法测定体外抗氧化原理:ABTS是一种水溶性的自由基引发剂,该方法就是以此为显色剂,ABTS和KFRAP方法测定体外抗氧化原理:在低pH值的溶液中,Fe1.7ccl的给药、注射综合文献每天上午按照0.2mL/10g给相应的药物7d,第7天给药2h后,按照0.1mL/10g进行腹腔注射0.6%的CCl1.8统计方法采用SPSS10.0统计分析软件进行one-wayANOVA分析,数据以均数22.1抗氧化活性测定飞利肝宁胶囊内容物为提取物粉末,不含辅料,可直接用于抗氧化实验。PG、BHA和BHT为抗氧化活性测定阳性对照物。用DPPH、ABTA和FRAP同时评价HQEA、HQBU和黄芩苷的抗氧化活性,结果优于当飞利肝宁胶囊和HQPE。见表1。2.2黄鼠血清中的pgt和got影响模型对照组的GPT和GOT与空白对照组对比均有升高,差别有统计学意义(2.3提取的黄鼠肝组织中的mda和sod药物模型对照组与空白对照组对比,MD