全血中稀土元素前处理方法的比较研究

全血中稀土元素前处理方法的比较研究

稀土元素是元素周期表中的一组元素、和的总称。在测定血液中稀土元素之前，要对血样进行消解，使稀土元素转化成离子状态而便于后续测定。目前常用的处理血样的方法是利用强酸高温消解，但是此方法处理时间长，消耗强酸数量大1材料和方法1.1实验仪器和仪器硝酸(优级纯),蛋白酶K(Promega),曲拉通(索莱宝),15种稀土混合持证标准物质(北京世纪奥科生物，稀土硝酸盐溶液，溶剂为3%硝酸溶液，稀土元素包含La、Ce、Pr、Nd、Sm、Eu、Gd、Tb、Dy、Ho、Er、Tm、Yb、Lu、Y,各元素浓度均为1000μg/mL),超纯水，iCAPQc电感耦合等离子体质谱联用仪(美国ThermoFisher),SQP分析天平(德国，赛多利斯)等。1.2蛋白质k的制备0.02%蛋白酶K配制：准确称取0.020g蛋白酶K,加超纯水至100.0g充分混匀备用。2%HNO1.31.3.1%羧酸溶液准确量取0.5mL全血样品于具塞比色管中，加浓硝酸2mL放置12h预消解。后于沸水浴中消解至颜色透明，赶酸后，用3%硝酸溶液定容至10mL后，摇匀后上机测试。同时按照上述方法制作空白样品，平行样品及加标样品。1.3.2蛋白酶k取0.5mL全血样本，加入1mL0.02%蛋白酶K剧烈震荡20s。47℃恒温3h,冷却至室温。加入3.5mL12%HNO1.4标准曲线的绘制吸取稀土元素混合标准液，逐级稀释成5ng/L、20ng/L、50ng/L、80ng/L、100ng/L、500ng/L的标准系列进行测定，绘制标准曲线。1.5仪器性能测试仪器点火待稳定后，对仪器的各项指标进行调整，使仪器灵敏度、氧化物、双电荷、分辨率等各项指标可以达到测定技术要求后，具体参数见表1,以In做内标，分别测定标准系列溶液、试剂空白、样品等。1.6方法的相对标准偏差分别测定两种前处理方法的空白样品各20次，得出两种方法的相对标准偏差，计算方法精密度。计算公式为：RSD=(SD/X)×100%(1)式中：RSD为相对标准偏差；SD为标准偏差；X为计算结果的算术平均值。1.7最低检出浓度（sd)方法的检出限是根据IUPAC定义计算：CL=3SD/S(2)式中：CL为最低检出浓度；SD为空白值标准偏差；S为标准工作曲线在低浓度范围内的斜率。1.8)评价方法准确度测定加标样品，计算加标回收率，评价方法准确度。计算公式为：加标回收率=(加标样品测定值-样品测定值)/加标量(3)2结果与讨论2.1稀土元素标准曲线各稀土元素标准曲线回归方程公式见表2,结果表明15种稀土元素标准曲线线性范围R值均大于0.999,本方法各元素在浓度0～500ng/L具有良好线性。2.2消化而使消化酸消化法是利用浓硝酸的强氧化性，将样品中的有机物分解，而达到消化的目的。酸消化法是经典样品前处理的方法，文献报道用硝酸消解生物样品，如血样、发样等样品，均具有精密度高，检出限低，准确度高的特点2.3人体个体差异导致的检测表3为两种方法处理血样得到的测定结果，其中由于样品量限制，两种方法所用血样非同一个样品，所以两种方法样品测定值不同，这是由于人体个体差异导致的，而非方法原因。由表3可知，人血中稀土元素含量均较低，所测定的15种稀土元素含量在1ng/L～100ng/L范围内，与文献报道结果相符2.4测定酶消化法相对标准偏差与精密度的测定用相对标准偏差衡量方法的精密度，如表3所示，对于酶消化法而言，轻稀土的相对标准偏差范围在2.7%～7.1%之间，重稀土的相对标准偏差在3.1%～45.8%之间，说明对于轻稀土的测定酶消化法相对标准偏差较低，精密度较好；酸消化法的相对标准偏差范围在3.6%～9.0%之间，说明该方法对于测定15种稀土元素来说相对标准偏差都比较低，适用于15种稀土元素的测定。水浴加热法样品空白值在0.77ng～9.90ng,而酶消化法样品空白值在0.19ng～3.26ng之间，表明酶消化法样品空白值更低，更适用于测定人血中含量相对更低的稀土元素，如Eu、Tb、Dy、Ho、Er等。2.5加标回收率利用加标回收率来评价方法的准确性，从表3中水浴加热酸消化法的加标回收率范围在80.05%～120.40%,酶消化法的加标回收率范围在93.34%～112.84%。从表中数据可以得出两种方法处理后的样品稀土元素均具有较高的加标回收率，符合准确性要求。3酶消化法与酸消化法的比较本研究通过比较两种不同前处理方法检测血液中稀土元素的特点，确定其适用范围。酸消化法及酶消化法均适用于血中痕量稀土元素的检测，酸消化法样