重组dna技术与基因工程

重组DNA技术与基因工程5

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重组DNA技术与基因工程的基本概念重组DNA技术所需的基本条件重组DNA技术的操作过程目的基因的克隆与基因文库的构建外源基因在大肠杆菌中的表达外源基因在酵母中的表达A用于核酸操作的工具酶2

重组DNA技术所需的基本条件限制性核酸内切酶DNA连接酶DNA聚合酶核酸酶核酸修饰酶限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶的发现及其生物功能识别双链DNA分子中的特定序列，并切割DNA双链主要存在于原核细菌中，帮助细菌限制外来DNA的入侵细菌的限制与修饰作用hsdR：编码限制性核酸内切酶hsdM：编码限制性甲基化酶hsdS：编码限制性酶和甲基化酶的协同表达1968年，Smith等人首先从流感嗜血杆菌d株中分离出

HindII和HindIII

限德制笼性揭核螺酸略内悬切壤酶限线制错性厦核雁酸膨内碍切浑酶竭的索类位型主别要开特化性I型I馋I型I切I枪I型限制修饰多功能单功能双功能蛋晕白奏结领构异唯源卫三旱聚供体同狸源盒二钱聚野体异扮源机二挎聚童体辅助因子ATPMg2+SAMATPMg2+SAMMg2+识别序列TGAN8TGCT旋转对称序列GAGCCAACN6GTGCCAGCAG切垄割包位纪点距描识尤别差序赵列购1k挡b处识右别借序召列渗内或或讽附馋近距呆识圾别六序术列母下组游随骡机证性葱切找割特漫异辣性刮切钢割2偏4蚁-租2寸6b晶p处限考制鸦性哨核究酸增内嘴切皆酶限笋制彼性普核佛酸陈内说切申酶测的挖命文名属貌名效种提名象株服名H秒i院n旷d寨I违I绿IH嚷i晃nd泉I年I满IHa鲁e秃m往o横p柱h重i橡l册u亚si窝nf准l馅u朗e改n傅z邮a搁ed嗜怨血食流静感塘杆馆菌d株同查一嗽菌眼株腾中来所毒含指的系多架个勤不敌同生的值限高制乔性姿核类酸上内货切总酶限盆制亦性贤核悼酸程内乱切四酶I盯I型烘限押制兽性走核往酸雕内扎切生酶超的叨基绒本酬特党性识喂别矮双撤链D栗N广A分奋子喷中4言-统8对树碱垮基扑的匪特抬定部序鼻列大远部耻分遭酶雹的蜓切弟割伸位寄点馋在禽识桶别悼序询列健内联部竖或木两袋侧识绸别杨切液割欠序牛列窑呈藏典袖型浓的尽旋档转翁对茂称乔型回念文脑结许构5’…G贵C谱TG昆A严A盟T阻T笑CG井A默G森…汪3口’3’…C脸G慰AC恒T雄T涌A时A皆GC闹T情C树…控5我’E盏c挺o严R也I的包识安别碧序饲列E亿c坝o倒R驼I的稠切雷割郊位秘点E年c添o卵R豪I等司产简生植的欧5’粘悦性季末校端5’…G-C-T-G-A-A-T-T-C-G-A-G…3’3’…C-G-A-C-T-T-A-A-G-C-T-C…5’E咏c送o堪R蛮I白3伍7℃5’

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