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文档简介
影响分离的因素与操作条件的选择第1页,课件共11页,创作于2023年2月2023/7/23一、影响分离的因素
factorsinfluencedseparation1.影响分离的因素与提高柱效的途径
在高效液相色谱中,液体的扩散系数仅为气体的万分之一,则速率方程中的分子扩散项B/U较小,可以忽略不计,即:H=A+Cu故液相色谱H-u曲线与气相色谱的形状不同,如图所示。第2页,课件共11页,创作于2023年2月2023/7/23液体的黏度比气体大一百倍,密度为气体的一千倍,故降低传质阻力是提高柱效主要途径。由速率方程,降低固定相粒度可提高柱效。液相色谱中,不可能通过增加柱温来改善传质。恒温改变淋洗液组成、极性是改善分离的最直接的因素。第3页,课件共11页,创作于2023年2月2023/7/23
2.流速流速大于0.5cm/s时,H~u曲线是一段斜率不大的直线。降低流速,柱效提高不是很大。但在实际操作中,流量仍是一个调整分离度和出峰时间的重要可选择参数。
3.固定相及分离柱
气相色谱中的固定液原则上都可以用于液相色谱,其选用原则与气相色谱一样。但在高效液相色谱中,分离柱的制备是一项技术要求非常高的工作,一般很少自行制备。第4页,课件共11页,创作于2023年2月2023/7/23二、分离类型选择
choiceofseparationtypes第5页,课件共11页,创作于2023年2月2023/7/23三、HPLC的应用
applicationofHPLC
1.环境中有机氯农药残留量分析
固定相:薄壳型硅胶(37~50m)流动相:正己烷流速:1.5mL/min色谱柱:50cm2.5mm(内径)检测器:差示折光检测器
可对水果、蔬菜中的农药残留量进行分析。第6页,课件共11页,创作于2023年2月2023/7/232.稠环芳烃的分析
稠环芳烃多为致癌物质。
固定相:十八烷基硅烷化键合相流动相:20%甲醇-水~100%甲醇线性梯度淋洗,2%/min流速:1mL/min柱温:50ºC柱压:70104Pa
检测器:紫外检测器第7页,课件共11页,创作于2023年2月2023/7/23四、制备型液相色谱
preparativeliquidchromatography
获得高纯物质(色谱纯)的有效方法。半制备柱(内径8mm,长度15~30cm),一次制备量0.1~1mg;1.色谱柱的柱容量(柱负荷)对分析柱:不影响柱效时的最大进样量;
对制备柱:不影响收集物纯度时的最大进样量;
超载:进样量超过柱容量。柱效迅速下降,峰变宽。
超载可提高制备效率,以柱效下降一半或容量因子k降低10%为宜。第8页,课件共11页,创作于2023年2月2023/7/232.液相制备色谱的方法收集组分时,通常有以下情况:
(1)可获得良好分离,主峰使用制备柱,超载提高效率;(2)两主成分之间的小组分;超载,分离切分使待分离组分成为主成分(富集)后,再次分离制备。
第9页,课件共11页,创作于2023年2月2023/7/233.制备型液相色谱
制备型液相色谱:结构与分析型一样,但泵流量大、进样量大、采用制备柱;柱后馏分收集器。
制备柱:内径20~50mm,柱长50cm。第10页,课件共11页,创作于2023年2月2023/7/23请选择内容第一节高效液相色谱的特点与仪器featureandinstrumentofHPLC第二节基本原理与主要分离类型basicprincipleandmainseparatingtypes第三节固定相与流动相stationaryphaseandmobilephase第四节影响分离的因素与操作条件选择factorsinfluencedseparationandchoiceofoperationcondition第五节离
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