血清鳞状上皮细胞癌相关抗原（SCC）定量检测标准操作规程

血清鳞状上皮细胞癌相关抗原(SCC)定量检测标准操作规程××医院检验科临床免疫室作业指导书文件编号:XXX生效日期：共页第页1.目的规范操作流程，保证鳞状上皮细胞癌抗原(SCC)定量的准确性和可靠性。2.原理SCC测试通过两步检测法，对人血清中的SCC抗原进行定量检测。被的微粒子结合。冲洗后加入抗SCC抗体吖啶酯标记物结合物。添加预激发液和激发液，测量化学发光反应，以相对发光单位(RLUs)表示。样品中的SCC抗原含量与微粒子化学发光系统探测到的RLUs成正比。由此计算出样品中SCC的含量。3.标本要求3．1．2处理患者样本时必须小心，避免发生交叉感染。建议使用一次性移液针或者吸头。棉签只能用于一个样本，以免交叉感染。离心前，必须确保血清样品已经彻底凝集。部分样本，特别是从接受了抗凝血剂或溶血栓剂治疗的患者身上获得的样本，可能需要较长的凝集时间。如果样本在完全凝集前进行离心，则其中存在的纤维会导致错误的结果。3．1．6如果检测时间超过24h，则将血清从凝集物、血清分离器或红细胞中取出。检测前，样品在2~8℃最长可以储存7天。如果检测被推迟7天以后，需要把样本冷冻储存在－20℃或更低温度中。应避免反复冻融样本。样本融化后需要通过离心，充分混合。含有红细胞、颗粒物质或外观混浊、絮状的样本融化后必须进行离心处理，确保结果的一致性。运输样本时，必须按照相应临床样本与传染物质的运输规定包装并添加标签。样本必须储存于干冰中运输。心 (大约15000g，10min或2000~3500r／min，5~10min)澄清，方可进行检测。3．4·患者准备的一般要求：患者在采血前24h内应避免运动和饮酒，不宜改变饮食习惯和睡眠习惯。一般主张在禁食12h后空腹取血，门诊患者提倡静坐15min后再采血。4.试剂与仪器4．2·试剂使用：试剂盒中的试剂是一个整体，打开后可立即使用，不能被分开。需要的确切操作信息，分别通过试剂的条码读取。4．3．4多项目手工稀释液：1瓶(100ml)ARCHITECTi多项目手工稀释液，含有磷酸盐缓冲的盐溶液。防腐剂：抗菌剂。4．5．1SCC试剂盒必须储存于2~8℃，从2~8℃取出后可立即使用。试剂可以在系统上储存，也可脱离系统储存。如果从系统上取下试剂，则需将其垂直储存于2~8℃(盖有软盖和替换盖)。建议将不在系统上储存的试剂放于原始的试剂盘和试剂盒中保存，以保持试剂瓶垂直站立。如果微粒瓶在脱离系统储存时没有垂直放置(装有软盖)，则必须把该试剂盒丢弃不用。时器。4．6·需要的仪器及其他材料：ARCHITECTi系统、ARCHITECTSCC项目文件、SCC替换盖和移液管。5.操作步骤新悬浮。第一次将微粒子试剂瓶装机后，无须再对其进行混匀。翻转微粒子试剂瓶30次。观察试剂瓶，检查微粒子是否重新悬浮。如果微粒子仍附着在瓶子上，则继续翻转瓶子直到微粒子完全悬浮为止。如果微粒子没有重新悬浮，则不能使用。请与当地厂家代表处联系。微粒子重新悬浮后，给试剂瓶加盖软盖。5．2·把SCC测定试剂盒装载到ARCHITECTi系统上，确保该检测所需试剂齐全，所有试剂瓶都有软盖，必要时申请校准。统操作规程。5．4·系统会计算出样品杯的最小样本量，并打印在申请报告中。每个样品杯可重复取样的次数不得超过10次。为了最大程度降低蒸发的影响，运行检测前，要加上足够的样本量。6.校准SCC质控品所有水平的单一样本评估测试校准情况。确保检测质控值都在质控品包装说明书所规定的范围之内。校准品优先进样。批号的试剂盒或质控品数值超过范围。若质控在控，则定标曲线可延长至试剂及质控品批号改变。7.质控SCC建议质控要求为，每24h(使用中)、每一个新批号试剂盒使用时或每一次定标以后将所有水平的质控品各检测一次。SCC的质控值必须在规定的范围内。如果质控值超出了规定范围，那么相关检测结果无效，必须重新检测样本。必要时需要重新校准。8.结果判断8．1·结果计算：SCC测定是通过4参数logistic曲线拟合(4PLC，Y加权)数据约简法生成一条校准曲线来计算浓度。行手工稀释。SCC建议的稀释比例为1∶10。进行1∶10稀释时，向180μlSCC校准品A中添加20μl患者样品。为避免污染校准品A，吸液前应将数滴校准品A滴入清洁的试管中。操作人员必须在患者或质控品申请屏幕中输入稀释系数。稀释前，系统通过该稀释系数自动计算样品浓度并报告结果。结果应该大于70ng／ml。8．4·检测结果的不确定度：具体参见AFP标准操作规程的相关内容。9.生物参考区间10.性能参数三酰甘油对检验结果无显著影响。11.临床意义11．1·协助诊断鳞状上皮细胞癌的一种参考指标。不能作为癌症筛查试验使用。11．2·采自同一个体的血清和血浆样本得到的检测结果可能不同，血清样本结果可能低于血浆样本，应当在结果报告中说明样本类型。使用连续鳞状上皮细胞癌抗原样本监控治疗反应或检测疾病进展状况时，必须使用相同类型的样本。SCC的血清SCC水平与血清肌酐浓度之间存在着明显的关系。如果病例中的高水平血清SCC与患者诊断结果和临床表现不一致，那么应当考虑对血清肌酐水平进行评估。11．4·接受过小鼠单克隆抗体制剂诊断或治疗的患者，其样本中可能含有人抗小鼠抗体 (HAMA)。使用通过小鼠单克隆抗体制备的试剂盒(如ARCHITECT鳞状上皮细胞癌抗原)检测含有HAMA的样本时，可能产生异常值。11．5·人血清中的异嗜性抗体会与试剂免疫球蛋白反应，干扰体外免疫的测定。经常接触动物或动物血清制品的患者容易受到干扰，使检测结果出现异