第七章需氧和兼性厌氧球菌的鉴定

第七章需氧和兼性厌氧球菌的鉴定第1页，课件共89页，创作于2023年2月第2页，课件共89页，创作于2023年2月第七章

需氧和兼性厌氧球菌鉴定返回总目录第3页，课件共89页，创作于2023年2月本章内容第一节葡萄球菌属2第二节链球菌属3第三节肠球菌属4第四节奈瑟菌属5概述1第4页，课件共89页，创作于2023年2月学习目标及重点学习目标：1.掌握：葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属和奈瑟菌属的主要生物学特性和微生物学检验，尤其是它们的鉴定依据和鉴别要点2.熟悉葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属和奈瑟菌属的临床意义本章重点：1.葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属和奈瑟菌属的主要生物学特性和微生物学检验2.葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属和奈瑟菌属的临床意义

第5页，课件共89页，创作于2023年2月概述球菌的种类很多，根据革兰染色性不同分为革兰阳性和革兰阴性球菌。致病性球菌称病原性球菌主要引起化脓性炎症又可称为化脓性球菌第6页，课件共89页，创作于2023年2月第一节葡萄球菌属葡萄球菌属细菌为一类触酶阳性的革兰染色阳性球菌，因常堆聚成葡萄串状而得名。广泛分布于自然界并构成人体的正常菌群。大多非致病，有少部分引起化脓性感染。主要包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、溶血性葡萄球菌等35个种，17个亚种第7页，课件共89页，创作于2023年2月一、生物学特性

1.形态与染色本属菌多为球形，直径0．5～1．5um。葡萄球菌无鞭毛，无芽胞、无荚膜

（1）在液体培养基上：呈单个、成双或短链状排列（2）在固体培养基上：呈葡萄串状排列（3）脓汁标本中：呈单个散在或少数呈葡萄串状排列

第一节葡萄球菌属金黄色葡萄球菌（脓汁）镜下形态金黄色葡萄球菌纯培养镜下形态第8页，课件共89页，创作于2023年2月第一节葡萄球菌属

2.培养特性营养要求不高，在普通营养琼脂（普皿）上生长良好。在20%CO2中有利于毒素形成

（1）在液体培养基：呈均匀混浊生长（2）在普皿上：形成1～2mm、圆形、光滑、边缘整齐、不透明、有色菌落。不同菌株产生不同的脂溶性色素，如：金黄色、白色、柠檬色金黄色葡萄球菌金黄色脂溶性色素第9页，课件共89页，创作于2023年2月第一节葡萄球菌属表皮葡萄球菌在普通琼脂平皿上的白色色素表皮葡萄球菌在血平板上的白色色素2.培养特性第10页，课件共89页，创作于2023年2月第一节葡萄球菌属（3）在血皿上金黄色葡萄球菌和溶血性葡萄球菌，能产生溶血毒素，在血平板上产生β-溶血。其他葡萄球菌无此现象金黄色葡萄球菌在血平板上24h菌落

2.培养特性第11页，课件共89页，创作于2023年2月

（4）在高盐甘露醇平板上：大多数葡萄球菌耐盐性强（10%～15%g/LNaCl培养基中生长）。此平板常作为选择性培养基，菌可分解甘露醇使指示剂呈淡黄色。G-菌在此平板上不生长

金黄色葡萄球菌在高盐甘露醇平板上的淡黄色菌落

2.培养特性第一节葡萄球菌属第12页，课件共89页，创作于2023年2月第一节葡萄球菌属（5）卵黄高盐琼脂平板：金黄色葡萄球菌产生卵磷脂酶，在此培养基上，菌落周围可形成白色沉淀环。表皮葡萄球菌亦可生长，但无白色沉淀环。

2.培养特性金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌在卵黄平板上生长现象第13页，课件共89页，创作于2023年2月第一节葡萄球菌属3.生化反应：葡萄球菌的生化活性强，能分解多种糖类，蛋白质和氨基酸，触酶阳性。触酶阳性阴性对照发酵葡萄糖第14页，课件共89页，创作于2023年2月第一节葡萄球菌属4.细胞壁抗原主要类型有下列两种蛋白抗原*又称为葡萄球菌A蛋白（SPA），具有种、属特异性的完全抗原。

SPA可与人类的IgG的Fc段非特异性结合，而不影响Fab段与特异性抗原结合的功能，它作为检测多种微生物抗原的实验室技术的重要试剂，可进行简单、快速的协同凝集试验多糖抗原具有型特异性的半抗原。金黄色葡萄球菌-核糖醇磷壁酸；表皮葡萄球菌等凝固酶阴性葡萄球菌-甘油磷壁酸。检测磷壁酸抗体有助于金黄色葡萄球菌感染的诊断和预后判断第15页，课件共89页，创作于2023年2月第一节葡萄球菌属5.分类葡萄球菌属可根据DNA的同源性、色素、生化反应及是否产生凝固酶等不同方法进行分类。6.抵抗力葡萄球菌是抵抗力最强的无芽胞细菌。*根据是否产生凝固酶分凝固酶阳性凝固酶阴性

葡萄球菌第16页，课件共89页，创作于2023年2月二、临床意义第一节葡萄球菌属第17页，课件共89页，创作于2023年2月第一节葡萄球菌属第18页，课件共89页，创作于2023年2月微生物检验程序标本脓汁，血液，剩余食物，呕吐物等直接涂片镜检革兰阳性球菌分离培养生长现象色素、溶血鉴定毒素测定药物敏感试验生化反应：血浆凝固酶、甘露醇、耐热核酸酶幼猫试验报告形态染色：革兰阳性球菌第一节葡萄球菌属第19页，课件共89页，创作于2023年2月1.标本：主要有血液、尿液、痰液、脑脊液、穿刺液和浓液等。三、微生物学检验

2.直接涂片：标本或增菌液直接涂片，革兰染色镜检见革兰阳性呈葡萄串状排列球菌，即可做出“查见革兰阳性球菌，葡萄串状排列，疑为葡萄球菌”的初步报告。

第一节葡萄球菌属第20页，课件共89页，创作于2023年2月

3.增菌培养血液标本增菌培养，24h培养后每日观察增菌液变化。如无变化，需培养7d，其中盲目传代2次，如无细菌培养可报“血液标本经7d培养无菌生长”。如发生混浊、内有胶胨样凝块等现象可进行进一步分离培养和革兰染色专家提示☞正常情况下无菌状态的体液标本如脑脊液，浆膜腔积液和关节腔抽出液等，直接涂片检查具有重要价值，其他体液标本伴有炎症细胞也有参考价值4.分离培养（1）血平板：35℃18～24h

（2）高盐甘露醇平板或高盐卵黄平板

(*进行葡萄球菌菌落特征复习)第一节葡萄球菌属第21页，课件共89页，创作于2023年2月5.生化反应：

（1）触酶试验：阳性。

（2）凝固酶试验：玻片法和试管法。第一节葡萄球菌属第22页，课件共89页，创作于2023年2月

5.生化反应

（3）耐热DNA试验

表皮葡萄球菌耐热DNA试验(-)性金黄色葡萄球菌耐热DNA试验(+)性第一节葡萄球菌属第23页，课件共89页，创作于2023年2月5.生化反应阳性反应阴性反应SlidexStaphPlus可快速鉴定金黄色葡萄球菌（4）乳胶凝集试验此试验不仅可检测金黄色葡萄球菌凝固酶，还可检测葡萄球菌A蛋白（SPA）第一节葡萄球菌属第24页，课件共89页，创作于2023年2月乳胶凝集试验原理在纸板或玻片上滴加包被有人类纤维蛋白原和抗金黄色葡萄球菌单克隆IgG抗体的蓝色胶乳颗粒，然后用接种环挑取待鉴定葡萄球菌的新鲜培养物与之混匀，待检葡萄球菌如能产生结合的凝固酶，可作用于包被在蓝色胶乳颗粒上的纤维蛋白原成为纤维蛋白，沉积在葡萄球菌上使它们发生凝集；或待检菌菌体（A蛋白）与吸附在蓝色胶乳颗粒IgG的Fab结合，引起蓝色胶乳颗粒被动凝集，出现肉眼可见凝集团块为乳胶凝集试验阳性

第一节葡萄球菌属第25页，课件共89页，创作于2023年2月5.生化反应

（6）肠毒素试验：现多采用免疫学方法快速检测肠毒素，主要以ELISA为主。（7）其他鉴定试验：临床上常用商品化鉴定系统如API葡萄球菌鉴定试剂盒。

APISTAPH可鉴定试剂盒（5）甘露醇发酵试验：金黄色葡萄球菌阳性。第一节葡萄球菌属第26页，课件共89页，创作于2023年2月5.生化反应（8）其它非培养鉴定或检查方法：

1）免疫学方法：用ELISA或对流免疫电泳方法检测金黄色葡萄球菌磷壁酸抗体

2）分子生物学方法：用商品化Accu探针对培养物进行鉴定，用脉冲场凝胶电泳法（PFGE）对葡萄球菌的质粒和染色体进行限制性核酸内切酶分析等第一节葡萄球菌属第27页，课件共89页，创作于2023年2月6.药敏试验（1）药敏鉴别试验-新生霉素敏感试验金黄色葡萄球菌S表皮葡萄球菌S腐生葡萄球菌R第一节葡萄球菌属第28页，课件共89页，创作于2023年2月6.药敏试验（2）药敏试验（临床上按CLSI选择抗菌药物进行试验）第一节葡萄球菌属第29页，课件共89页，创作于2023年2月

（3）耐甲氧西林的葡萄球菌药敏试验MRSA和非MRSA专家提示☞当临床上检测出MRSA，即使对头孢菌素类的体外药敏试验表现为“敏感”时，也不宜将这种假象向临床报告，以免造成错误导向。第一节葡萄球菌属第30页，课件共89页，创作于2023年2月

7.鉴定按科→属→种的顺序（1）科间鉴别

微球菌科、链球菌科和奈瑟菌科鉴别要点第一节葡萄球菌属第31页，课件共89页，创作于2023年2月

7.鉴定按科→属→种的顺序

（2）属间鉴别

葡萄球菌属与微球菌属鉴别要点第一节葡萄球菌属第32页，课件共89页，创作于2023年2月菌名血浆凝固酶耐热DNA酶脲酶甘露糖氧化新生霉素耐药多粘菌素B耐药金黄色葡萄球菌＋＋D＋－＋表皮葡萄球菌－－＋＋－＋溶血葡萄球菌－－－－－－腐生葡萄球菌－－＋－＋－人葡萄球菌－－＋－－－d:不定

（3）种间鉴别

引起临床感染的最常见的5种葡萄球菌鉴别要点第一节葡萄球菌属第33页，课件共89页，创作于2023年2月☞金黄色葡萄球菌系毒力很强的致病菌，无论从任何标本中分离出均应及时鉴定，进行药敏试验和尽快报告临床。

☞从输液导管、人工植入组织中分离出表皮葡萄球菌和从尿液标本中分离出腐生葡萄球菌应视为病原菌（葡萄球菌的尿液培养菌落计数应考虑>103～104为阳性菌尿标准）。

☞其它凝固酶阴性葡萄球菌引起感染流行或临床治疗失败时，应考虑将其鉴定到种。当MRSA对头孢菌素类的体外药敏试验表现为“敏感”时，不能将这种假象向临床报告，以免造成错误导向。因为体内活性试验已证实头孢菌素类对MRSA无效。

专家提示返回章内容第一节葡萄球菌属第34页，课件共89页，创作于2023年2月

第二节链球菌属

链球菌属细菌为一类触酶阴性的革兰染色阳性球菌，广泛分布于自然界、人及动物肠道和健康人鼻咽部链球菌在光镜下形态（革兰染色）链球菌在电镜下形态第35页，课件共89页，创作于2023年2月

1.形态与染色G+球菌，直径0.5～1um

（1）液体培养基中链状排列，长短不一。短由4～8个菌组成，长者可达20～30个细菌组成（2）在固体培养基或脓汁标本中，呈短链、成双或单个散在排列一、生物学特性A群链球菌肺炎链球菌B群链球菌

第二节链球菌属第36页，课件共89页，创作于2023年2月链球菌幼龄时可见荚膜，继续培养荚膜消失肺炎链球菌常常呈双排列，故又称为肺炎双球菌。在动物体内它可形成较厚的荚膜链球菌属无鞭毛、无芽胞肺炎链球菌荚膜

第二节链球菌属第37页，课件共89页，创作于2023年2月

2.培养特性营养要求高，在5%～10%CO2环境下生长更好

（1）液体培养基（血清肉汤）：沉淀生长（上清液澄清/微混）（2）血平板：菌落小，灰白色，半透明，不同菌种的溶血现象不同，有α-溶血、β-溶血和γ-溶血（不溶血）α-溶血β-溶血γ-溶血

第二节链球菌属第38页，课件共89页，创作于2023年2月

3.生化反应生化活性较活跃：触酶阴性，葡萄糖+，菊糖－

（1）A群链球菌：杆菌肽S

A、B和D群链球菌杆菌肽试验

A群杆菌肽S

第二节链球菌属第39页，课件共89页，创作于2023年2月

3.生化反应

（2）B群链球菌：CAMP+，马尿酸钠+

（3）D群链球菌：PYR+，七叶苷+B群CAMP+D群链球菌七叶苷+（上）A群链球菌七叶苷-（下）思考：CAMP原理？

第二节链球菌属第40页，课件共89页，创作于2023年2月

3.生化反应（4）肺炎链球菌：OptochinS，胆汁溶菌+，菊糖+肺炎链球菌OptochinS胆汁溶菌（平板法）胆汁溶菌（试管法）

第二节链球菌属第41页，课件共89页，创作于2023年2月

4.分类根据下述链球菌的溶血特征和Lancefield血清学等传统的分类法，目前仍然是临床实验室鉴定链球菌的常规使用方法。

（1）根据培养基上溶血特性分类：分类菌落特征甲型（α）溶血性链球菌灰色、针尖状菌落、周围有草绿色溶血环（α溶血）乙型（β）溶血性链球菌灰白色细小菌落、周围有宽大透明溶血环（β溶血）丙型（γ）链球菌灰白色小菌落、无溶血环

第二节链球菌属第42页，课件共89页，创作于2023年2月（2）根据抗原结构分类：链球菌Ag结构较复杂，含多种抗原，主要有：多糖抗原

*为群特异性抗原：位于细胞壁上，Lancefield将乙链（溶血性）分成A、B、C、D等20个群。蛋白抗原

*型特异性抗原：位于菌体表面，有M、T、R和S蛋白。链球菌Ag群中，对人类致病者90%属A群，B、C、D、F、G群也常感染致化脓性疾患。

第二节链球菌属第43页，课件共89页，创作于2023年2月（4）综合溶血性、抵抗力、生化反应性状分类（3）根据链球菌对氧的需求

分为三类：需氧、厌氧、微需氧链球菌

第二节链球菌属第44页，课件共89页，创作于2023年2月二、临床意义

第二节链球菌属第45页，课件共89页，创作于2023年2月溶血毒素O：耐热，含-SH基的蛋白质，对氧敏感，易被氧化成-S-S，失去溶血能力

溶血毒素S：多肽，分子量少，对氧稳定，血平板上的溶血现象由它引起

检测抗“O”抗体，可辅助诊断链球菌性疾病如风湿热及链球菌感染后的肾小球肾炎友情提示

第二节链球菌属第46页，课件共89页，创作于2023年2月

第二节链球菌属第47页，课件共89页，创作于2023年2月微生物检验程序标本血液、尿液、创伤标本、脓性分泌物等直接涂片镜检分离培养*注意与葡萄球菌属、肠球菌属鉴别，链球菌分群鉴定生长现象溶血类型生化反应：触酶、PYR、七叶苷、菊糖、胆汁溶菌等形态染色：革兰阳性球菌药敏试验报告血清学试验抗“O”试验Lancefield分群

第二节链球菌属第48页，课件共89页，创作于2023年2月

1.标本采集：标本类型有血液、尿液、创伤标本、脓性分泌物等

三、微生物学检验

2.直接涂片：标本或增菌液直接涂片，革兰染色镜检见革兰阳性呈链状排列球菌，或见革兰阳性矛头状球菌成双排列，菌体周围有透明环，即可做出“查见革兰阳性球菌，链状排列，疑为链球菌”；或“查见革兰阳性矛头状球菌，成双排列，疑为肺炎链球菌”的初步报告

第二节链球菌属第49页，课件共89页，创作于2023年2月三、微生物学检验3．增菌培养：下列生长现象有助于区别不同链球菌一般菌培养7天，无现象则要盲目传代2次亚急性细菌性心内膜炎血培养4周，每周移种平板一次。如有生长，转种血琼脂平板

第二节链球菌属第50页，课件共89页，创作于2023年2月

4.分离培养培养条件：需加血清、血液等营养物质。需氧、厌氧各一块培养经37℃培养1～2天。观察菌落特征、溶血现象。注意要点培养条件培养基溶血性检查初代分离应置5％～10％的CO2环境下，可用二氧化碳孵箱或烛缸。血平板—羊血平板：有助于其溶血特征的识别和进一步鉴定。A群链球菌大多产生溶血毒素“S”，一般链球菌只产生溶血毒素“O”。

第二节链球菌属第51页，课件共89页，创作于2023年2月

5．鉴定实验链球菌属细菌的鉴定应根据其菌体形态、菌落形态和溶血特征，结合以下鉴定试验进行。（1）与其他革兰氏阳性球菌鉴别：检查溶血毒素“O”时，要降低氧分压如①厌氧培养，②倾注倒板或③穿刺接种，这样可使只产生溶血毒素“O”的链球菌也表现出β-溶血现象

第二节链球菌属第52页，课件共89页，创作于2023年2月

5．鉴定实验（2）属内鉴定：

1）分类（复习）2）生化反应3）多糖抗原分群（群特异性抗原）

Lancefield分群试剂盒

第二节链球菌属第53页，课件共89页，创作于2023年2月Lancefield血清学凝集试验

第二节链球菌属第54页，课件共89页，创作于2023年2月

甲型溶血性链球菌和丙型链球菌鉴定到肺炎链球菌、D群链球菌，其他的统称为草绿色链球菌。乙型溶血性链球菌鉴定到抗原群（A、B、C、G）。

1类：乙型溶血性链球菌：A、B、C、D、F、G群

第二节链球菌属第55页，课件共89页，创作于2023年2月青霉素6.5%NaCL肉汤生长

D群链球菌S-肠球菌R

+3类：其它草绿色溶血性链球菌2类：胆汁七叶苷水解阳性鸟链：Q群+，其它D群+

第二节链球菌属第56页，课件共89页，创作于2023年2月（3）其他鉴定试验1）链激酶A群+2）牛乳美蓝试验粪链、乳链不被抑制3）马尿酸钠水解试验B群+4）肺炎链球菌荚膜肿胀试验+

抗“O”试验原理：中和试验方法：间接凝集结果：效价大于400单位意义：风湿热及其活动性的辅助诊断6.血清学诊断

第二节链球菌属第57页，课件共89页，创作于2023年2月链球菌侵入体内产生SLO，刺激机体产生相应抗体ASO，当两者中和后，在加入SLO乳胶试剂，因病人血清中ASO量很多，未被中和掉的抗体ASO与乳胶试剂反应，产生清晰凝集，为抗“O”试验阳性；无凝集，为阴性。7.药敏试验（1）药敏鉴别试验（2）药敏试验抗“O”试验原理返回章内容

第二节链球菌属第58页，课件共89页，创作于2023年2月

第三节肠球菌属肠球菌属原属于链球菌D群（血清学分类），1984年从链球菌属分离出，成为独立的菌属，广泛分布在自然界，是人类、动物肠道和女性生殖道的正常菌群，既往认为肠球菌对人类无致病作用，但近年研究已证实了肠球菌是需氧和兼性厌氧球菌中仅次于葡萄球菌的重要医院内感染致病菌，多见于尿路感染、腹腔感染和菌血症第59页，课件共89页，创作于2023年2月

一、生物学特性

1.形态与染色G+球菌，呈单、成双或短链状排列。无芽胞，无荚膜，无鞭毛2.培养特性营养要求高，某些菌株在选择性培养基如麦康凯平板上可生长。在高盐（6.5%NaCl）、碱性（pH9.6）、高胆汁（40%）培养基上能生长。在10℃和45℃均能生长肠球菌血平板24小时培养物镜下染色

第三节肠球菌属第60页，课件共89页，创作于2023年2月

一、生物学特性在血琼脂平板上经35℃培养18～24h后，可形成灰白色、直径0.5～1.0mm大小的圆形、不透明、表面光滑的菌落，不溶血或α-溶血，少数出现β-溶血不同菌株的肠球菌在血平板上生长现象不溶血α-溶血

第三节肠球菌属第61页，课件共89页，创作于2023年2月

3.生化反应触酶-、多种糖+，胆汁七叶苷试验+、PYR试验+4.抵抗力弱，是天然耐药菌株，对氨基糖苷类、万古霉素、替考拉宁耐药呈获得性耐药

5.分类肠球菌属归类链球菌科，在Lancefield血清分类上属于D群。临床标本分离的多属于肠球菌属Ⅱ群，分离率最高的是粪肠球菌，其次是屎肠球菌胆汁七叶苷试验肠球菌阳性，阴性对照

第三节肠球菌属第62页，课件共89页，创作于2023年2月

二、临床意义。

第三节肠球菌属第63页，课件共89页，创作于2023年2月微生物检验程序标本血液、尿液、创伤标本、脓性分泌物等直接涂片镜检分离培养鉴定生长现象溶血类型、温度生长试验生化反应：触酶、PYR、胆汁七叶苷、6.5%NaCl形态染色：革兰阳性球菌，短链状排列药敏试验报告Lancefield分群

第三节肠球菌属第64页，课件共89页，创作于2023年2月

1.标本采集：根据临床症状及体征采集标本，标本类型有血液、尿液、创伤标本、脓性分泌物等

三、微生物学检验2.直接涂片：形态与染色

脓性标本、创伤标本或增菌液直接涂片，革兰染色镜检见革兰阳性呈单、成双或短链状排列球菌，做出“查见革兰阳性球菌”的初步报告

第三节肠球菌属第65页，课件共89页，创作于2023年2月三、微生物学检验

3.增菌培养：24h培养后，每日观察增菌液变化。如无变化，培养至7d。如发生混浊生长现象可进一步转种，进行分离培养4.分离培养（1）血平板：35℃18-24h

（2）选择性培养基

①叠氮钠胆汁七叶苷平板

②麦康凯（MAC）平板肠球菌在MAC上生长现象

第三节肠球菌属第66页，课件共89页，创作于2023年2月6.血清学试验Lancefield分群属D群触酶PYR胆汁七叶苷6.5%NaCl10℃生长45℃生长++++++5.生化反应7.药敏试验根据CLSI选择抗菌药物专家提示☞头孢菌素类、氨基糖苷类（除高水平筛选耐药外），克林霉素、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑（TMP/SMZ）在体外显示活性，但临床上无效，注意报告！返回章内容

第三节肠球菌属第67页，课件共89页，创作于2023年2月奈瑟菌属是一群专性需氧革兰阴性球菌，奈瑟菌属中对人致病的只有脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌，引起流行性脑脊髓膜炎和性病淋病。

第四节奈瑟菌属奈瑟菌电镜下形态第68页，课件共89页，创作于2023年2月一、生物学特性脑膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌1.形态与染色G－双球菌G－双球菌革兰染色美兰染色

第四节奈瑟菌属第69页，课件共89页，创作于2023年2月脑膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌2.培养特性营养要求高营养要求高，初次培养需供给5～10%CO2及湿润的环境才能生长。最适生长温度35～

37℃，<30℃/>40℃均不能生长 培养时间过长，本菌可产生自溶酶最适生长温度35～37℃。<30℃/>37℃均不能生长巧克力平板血平板卵黄双抗平板（EPV）血清肉汤MNYC平板T-M平板（国外常用）巧克力平板血平板卵黄双抗平板（EPV）血清肉汤

第四节奈瑟菌属第70页，课件共89页，创作于2023年2月巧克力平板上的脑膜炎奈瑟菌MNYC上的淋病奈瑟菌2.培养特性奈瑟菌菌落

第四节奈瑟菌属第71页，课件共89页，创作于2023年2月脑膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌3.生化反应（1）氧化酶和触酶试验++

氧化酶试验（平板法）触酶试验（试管法）

第四节奈瑟菌属第72页，课件共89页，创作于2023年2月脑膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌3.生化反应（2）糖分解试验①葡萄糖②麦芽糖③乳糖④蔗糖指示剂：酚红①

②

③

④

①

②

③

④

脑膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌葡萄糖+、麦芽糖+、蔗糖-、乳糖-，其他糖-，蛋白质-。葡萄糖+、麦芽糖-、蔗糖-、乳糖-，其他糖-。

第四节奈瑟菌属第73页，课件共89页，创作于2023年2月脑膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌4.抗原结构与分类根据荚膜多糖抗原分为13个血清群。较重要的是A、B、C、W-135和Y群。我国流行的菌株以A群为主。抗原：菌毛、外膜蛋白、LPS、H·8蛋白分解酶、主要铁调节蛋白等。分型：表型分类法、A/S分类法（自学为主）弱。对温度极为敏感，对青霉素敏感。5.抵抗力弱。对温度极为敏感，对各种消毒剂敏感。

第四节奈瑟菌属第74页，课件共89页，创作于2023年2月二、临床意义

1.致病性脑膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌致病物质内毒素、荚膜、菌毛菌毛、外膜蛋白、内毒素、IgA1蛋白酶传染源携带者、病人携带者、病人传播途径呼吸道传播性接触传播、产道流行季节冬春季节无明显季节性2.所致疾病流行性脑脊髓膜炎（流脑）淋病新生儿急性眼结膜炎

第四节奈瑟菌属第75页，课件共89页，创作于2023年2月单纯淋病（男）单纯淋病（女）

2.所致疾病新生儿淋球菌性结膜炎淋球菌性眼结膜炎（脓漏眼）

第四节奈瑟菌属第76页，课件共89页，创作于2023年2月

三、微生物学检验

第四节奈瑟菌属第77页，课件共89页，创作于2023年2月（1）标本采集根据临床症状和体征不同采集不同标本，如血液、瘀斑渗出液、脑脊液、鼻咽分泌物。1.脑膜炎奈瑟菌微生物学检验①用药前采集②无菌生理盐水冲洗采菌部位，禁用消毒药③采集分泌物时应避免碰到粘膜，以免正常菌群污染④床边接种，立即培养，培养基应预温，送检时注意保温注意事项

第四节奈瑟菌属第78页，课件共89页，创作于2023年2月

（2）直接涂片，染色镜检：脑脊液离心沉淀涂片，或刺破瘀斑血或组织液印片，革兰染色镜检，发现中性粒细胞内、外革兰阴性双球菌，呈肾形成双排列，可做出“查见革兰阴性球菌”的初步报告

（3）增菌培养：血液或脑脊液先在葡萄肉汤增菌，24h培养后每日观察增菌液变化。如无变化，培养至第7d。如发生混浊生长现象可转种巧克力平板进行分离培养

第四节奈瑟菌属第79页，课件共89页，创作于2023年2月

（4）分离培养：其他标本直接分离于血琼脂平板、巧克力平板或EPV平板，置5%～10%CO2环境中，经35℃～37℃培养18h～24h后观察菌落特征（5）鉴定：①推测性鉴定：主要根据选择性和非选择性培养基上菌落特征、结合涂