ABI7500荧光定量PCR仪标准操作规程

ABI7500PCR仪标准操作规程目的为标准使用人正确和正常的使用ABI7500析的标准化、标准化，特制定本规程。适用范围适用于本公司ABI7500荧光定量PCR仪的操作。职责使用人员负责本规程的实施。设备使用人负责设备维护保养工作；设备责任人负责设备的定期维护保养工作。质量监视员负责监视本规程的实施。内容程序设置翻开电脑及仪器电源，待仪器电源项显示power绿色状态。USB线接口DesignWizard选项，红色箭头指示位置有个下拉菜单，如以以下图所示。AdvancedSetup〔高级设置〕选项，如箭头所示：第110页ABI7500PCR仪标准操作规程点击这个选项，可以进入下面这个界面，①②③①②仪器型号和③反响程序类型。〔带*〕210页ABI7500PCR仪标准操作规程①②③此图是上面图的连续〔自己电脑显示不完全，红色箭头从上到下指示的分别是①Plate选项、②探针类型和③TaqMan探针，速度类的话则有快速模式可以选择。下一步我们可以看到左PlateSetup选项，点击这个选项，就可以进入下一个设置界面。① ②③④ ⑤ ⑥ ⑦ ⑧ ⑨ ⑩红色箭头①和②指的是设定反响探针和反响样品名称，箭头③处可以填写反响探针名称〔P1,HB,HC⑤FA⑥TAMRABHQ，在这个仪器中无此选择none。箭头⑧处可以填写样品名称。点击箭头④和箭头⑨处可以添加反响探⑦和箭头⑩〔另：探针跟样品设定后可保存，便利以后试验调用，具体是点击箭头①②下面第310页ABI7500PCR仪标准操作规程1DAAN1HBV1，如上图所示。设定完成之后，我们点击红色箭头所指的选项，进入下个界面。①指示的有玫瑰红色下划线那一②可以看出①和②分别是放大这个孔板界面的按钮，蓝色箭头③是显示大小复原默认设置按钮。①A1②指示的是反响探针名称，红色箭头③⑤④指示的框里第410页ABI7500PCR仪标准操作规程⑥⑧是个⑦名称。红色箭头⑨指示的参比荧光，仪器默认是ROX，但是产品一般没有添加ROX荧光，所None⑩4567升序或7654降序的排列，单击可弹出以下界面，具体如下。①②③④⑤①表示起始的浓度，10×4567的浓度；1:107654的浓度。41个〔即没有做复孔10000，选择Apply104567次方的挨次排列。此外也可以选择鼠标双击类似反响孔板的那个界面，会消灭下面这个界面：第510页ABI7500PCR仪标准操作规程⑤② ①③④如上图所示，选定反响孔双击后会消灭这样一个界面，红色箭头①Task—样品反响Sample—样品名称。④是个文本框，⑤指示的RunMethod选项进入下个界面。①⑦② ③ ④⑤ ⑥上图的箭头①②③是添加反响⑤和⑥⑥所示高亮显示时表示在此步12个收集荧光信号的，则软件上第610页ABI7500PCR仪标准操作规程会有消灭蓝色的错误提示〕设定好循环条件就可以进展模板保存以便下次试验时调用程序点击位于软件中间右方的 宽屏〔14寸acer。假设是AB配的E6500电脑则可以在软件上全部显示，不会消灭 键或是那些滑动条，但是。字体会小点，选择保存运行的模板，命名。下次试验使用的时候就不用再在设条件，直接点击 openrunmethod，调出你所需要做的试验的扩增条件。setup〔反响体系设置〕materialslist〔耗材清单〕不需要我们去设置。点击箭头⑦所指的run进入运行界面。①②③④⑤START按钮右方可消灭试验的估量剩余时间。②件。试验完毕后按箭头⑤所指的分析，消灭以下界面。第710页ABI7500PCR仪标准操作规程⑧①②③④⑤⑥⑦做完试验后，曲线会消灭在上图，以对数图谱的形式消灭，假设想换为线性图谱，可点击箭头①loglinear，其次，再点击箭头⑧的分析按钮〔有试验数据的话会消灭analysiCT96孔面板中消灭，上面的显示不完全，曲线的baselinethreshold设置是在上图数字⑦〔不是箭头⑦所指的地方进展设置。箭头③表示的是试验标准曲线的参数。⑦4中图谱的集合，可自己选择组合查看。试验完毕后填写《设备使用记录》结果分析analysissetupbaselinethreshold数值，点击绿色analyze图标，软件及完成自动分析。amplificationplot界面查看全部样品的扩增曲线。,将全部曲线选中进展整体观看。观看是否存在污染状况〔包括标本污染和试剂污染，特别应留意大量曲线在同一Ct值消灭上涨的状况。观看是否有光路传导阻滞或电压波动等机器缘由形成的特别曲线。比照、质控品、标准品的分析阴性比照：试剂中参与与待检标本进展同样处理的阴性标本。第810页ABI7500ABI7500PCR仪标准操作规程作用：用以监测试验室和前处理过程中是否存在污染。作用：用以监测试验能否正常检出阳性标本，避开假阴性的消灭。或未知浓度的阳性室内质控血清。作用：用以监控日常试验的周密度。性标准品稀释可能存在问题，提示试验中存在较大人为误差。Ct值是否在平日的正常位置：Ct〔如试剂过期或保存条件不合格。Ct品的降解状况。假设高拷贝标准品消灭Ct仪器维护留意开机关机挨次，机器开机后即可使用，无需预热。电脑上使用专用U盘等移动存储设备，建议使用光盘刻录来转移数据。〔比方光盘〕〔无需用水，禁用有机溶剂，会溶解机器外表的漆层。灯泡更换：在灯泡使用到达寿命后〔2023小时，或者意外损坏后需要更换。机器关闭灯泡高温。然后将灯泡，用气吹吹掉外表的灰尘，安装灯泡。样品孔清洁：样品孔污染后会影响PCR扩增的信号，是的该孔信号高于其他孔，造成假阳性的结果，需要每月执行background校正，针对信号值超过72023的孔，使用棉签与去离〔黑色面板〕background72023。依据仪器出厂说明书每6个月对仪器进展纯荧光校正和ROI校正。仪器在搬运后需要进展背景校正、纯荧光校正和ROI校正，全部校正通过后才能进展试验。第910页ABI7500