抗体工程研究进展-课件

抗体工程研究进展本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!相关仪器和试剂需要相关抗体试剂的可以访问Fantibody全球抗体搜索引擎fantibody全球抗体搜索引擎是一个供公共检索的抗体数据库，其抗体信息数据来源于全球范围的研究机构与商业公司。该引擎由商品化抗体数据库与抗体应用评价数据库两部分组成，以帮助研究者更高效的寻找并评估该抗体的性能。全球抗体搜索引擎是继基因与蛋白数据库之后更为复杂的应用型检索平台需要相关的实验室仪器设备、生物试剂、医疗器械、制药设备、医药原料、体外诊断试剂及耗材与技术服务信息的，可以访问探生网biomean进行咨询，期待您的加入13%21.7%52.3%13%

治疗性抗体的研发阶段靶标发现抗体制备抗体筛选、确认和优化中试工艺研究临床前研究临床研究主要研究进展靶抗原的发现抗体人源化改造及人源抗体制备提高抗体效应功能提高抗体表达量其他靶抗原的发现TRAIL:TNF-relatedapoptosis-inducedligandTRAILR:DR4、DR5、DcR1、DcR2、OPGProteinextractionanddigestionTreated/SickControl/HealthyMassSpectrometerProteinpeptidesidentificationMSspectraquantificationcharacterizationKKYAAELHLVPOPhosphorylationKAVQQPDGLAOxidation…posttranslationalmodifications(PTM)QFHFHWGSLDQPDGLAPeptidesandMS/MSspectraHPLCProteomics20a5-6HeavyChainC5a新功能表位的确定20a5-6LightChain20a5-6Fab20a5-6Fab/C5a功能单抗识别表位可能是一个新的药靶？主要研究进展靶抗原的发现抗体人源化改造及人源抗体制备提高抗体效应功能提高抗体表达量其他治疗性抗体产生抗－抗体的比例抗体人源化的主要技术嵌合抗体CDR移植,FR移植,SDR移植表面氨基酸残基人源化抗原表位定向选择嵌合抗体、CDR移植抗体SDR人源化方法鼠抗体（红）和人源化抗体（绿）Fv结构的叠合图表面氨基酸残基人源化鼠源抗体/抗原作用的复合物模型人源化抗体/抗原作用的复合物模型人源化抗体识别的抗原表位与親本抗体相同抗原表位定向选择HL人抗体重链文库LHLLLLHLHLHHHH高亲和力人抗体抗原亲和筛选抗原亲和筛选+人抗体轻链文库人-鼠抗体库+鼠抗体人源抗体制备技术人х人杂交瘤技术EB病毒转化技术人源抗体库噬菌体抗体库合成抗体库核糖体展示抗体库转基因动物大容量抗体库107~8108~9抗体亲和力10-6~10-710-7~10-8109抗体库容>10910-8~10-9合成抗体库核糖体展示scFv文库各种抗体库筛选方法感染性筛选抗原库对抗体库筛选方法提高抗体特异性和亲和力Chainshuffling计算机模建技术定点突变技术chainshuffling原理示意图LHLLLLHLHLHHHHHL更高亲和力抗体亲和筛选建抗体库亲和筛选+重链文库建抗体库轻链文库高亲和力抗体+亲本抗体计算机模建预测抗体亲和力和识别表位HA2HA4HC4H22结合自由能分子间氢键识别区域表位是否漂移Z12-378.2-402.5-435.6-434.2-431.6182128383420-3223-30,70-8976-92136-147140-146是是是否抗体分子间氢键相互作用能（KJ）主要识别区域mCH2238-427.44136-149CH2236-425.37136-149抗体H22计算机分子设计与直接进化[S]-[B](10-11M)Ka~6x1010L/molB/F抗体CH22m亲和常数测定ItemsZ12Ka=8×107M-11/750CH22Ka=9×109M-11/6.5mCH22Ka=6×1010M-11Remicade®Ka=1×1010M-11/6Antibodyaffinity移植人免疫球蛋白的小鼠抗体结构信息具有重要的研究价值PDBView抗体结构分析抗体序列分析抗体表达分析抗体分类管理BLAST系统日志管理用户权限管理Kabat本地数据库抗体分类系统参数设置系统字典设置外部数据接口PDBGENEBANKSwiss-ProtTRRDKABAT本实验室抗体数据库抗体分析系统主界面抗体专家分析系统Her2靶点人源抗体（HF)的设计与验证Her2晶体结构D4SDS非还原电泳155KDaHF人源表达抗体的纯化和功能鉴定HF人源抗体基因合成、构建、表达人源化抗体设计、虚拟筛选抗体专家分析系统抗原抗体复合物结构信息分析HF人源抗体对Her2+

+细胞的ADCC杀伤效应分析HFSKVO3–Her2+++MCF7-Her2+HerceptinSKVO3–Her2+++MCF7-Her2+HF人源抗体对Her2靶点的特异性识别新抗体或抗体类似物的设计以抗原－抗体复合物的晶体结构设计新抗体以人抗体Fc为支架设计类抗体以全人抗体为支架设计小抗体以非Ig的人蛋白为支架设计功能分子PT4－Linker－FC融合蛋白的构象

PT4-Linker-FC与TNF-α相互作用复合物的构象

拮抗肽－linker－Fc融合蛋白设计抗体可变区框架作为支架VH结构域能够保持一定的刚性；

VH在空间上能够将几个短肽展示在一定的区域内；

抗体可变区骨架展示的外源肽段长度可以改变。

CDR3CDR1CDR2FR1FR2FR3FR4单域抗体（PTVH5）设计PTVH5与TNF形成的复合物模型单域抗体单链抗体(scFv)单链抗体（TSA1、TSA2）设计主要研究进展靶抗原的发现抗体人源化改造及人源抗体制备提高抗体效应功能提高抗体表达量其他提高抗体效应功能偶联细胞毒物质双特异性抗体抗体Fc突变改变抗体糖基化细胞内抗体抗体融合蛋白抗体药物的作用机理直接效应诱导凋亡抑制增殖阻断生长因子或生长因子受体干扰血管生成间接效应依赖补体的细胞毒（CDC）依赖抗体的细胞毒（ADCC)

作为毒素、放射性同位素和细胞毒药物的载体形成抗独特型抗体通过双特异性抗体靶向效应细胞抗体偶联细胞毒物质抗体融合蛋白双功能抗体作用原理BsAbBsAb效应细胞靶细胞触发受体膜表面分子NK细胞

CD16肿瘤细胞HER2/neu抗HER2/neu×抗CD16BsAbBsAb双特异性抗体介导的杀伤作用机制（a),BsAb桥连效应细胞和靶细胞；(b),连接的触发分子启动细胞毒反应；(c),效应细胞对靶细胞产生致死性杀伤反应。

细胞毒反应细胞内抗体：在细胞内合成并作用于细胞内组分的抗体细胞核EGFREGFREGFR抗体的ADCC和CDC效应提高ADCC和CDC的策略抗体Fc突变改变抗体糖基化RituximabFc的三维结构Rituximab突变体与C1q的结合主要研究进展靶抗原的发现抗体人源化改造及人源抗体制备提高抗体效应功能提高抗体表达量其他提高表达量的方法应用扩增系统GS/DHFR弱化选择标记基因应用有利于基因表达的元件

强启动子强增强子反式作用元件位置效应（positioneffects)Cre-LoxP定点整合系统工程细胞株lacZ-Zeocin可扩增转录活性位点blapSV40△FRTdhfrGenomicDNAGenomicDNAOri‘Hotspot’-tagedFRT抗体的糖基化主要研究进展靶抗原的发现抗体人源化改造及人源抗体制