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酶联免疫吸附实验CONTENTS01原理02操作方法原理Part-1原理一酶联免疫吸附实验（ELISA）概述

酶联免疫吸附试验，简称ELISA，是实验室最常用的检测方法。酶是能够催化化学反应的特殊蛋白质，其催化效力超过目前所有人造催化剂。酶标记抗原或抗体以后，既不影响抗原抗体反应的特异性，也不改变酶本身的活性。因此ELISA具有准确性高、检测时间短、价格低廉、判断结果有客观标准、结果便于记录和保存等优点，适合于大批标本的检测，广泛应用于食品安全检测、医疗检测以及免疫实验分析等领域。原理一间接ELISA的基本原理其原理是将抗原连接到固相载体上，样品中待测抗体与之结合成固相抗原受检抗体复合物，再用酶标二抗（针对受检抗体的抗体）与固相免疫复合物中的抗体结合，形成固相抗原-受检抗体-酶标二抗复合物，可用目测或用分光光度计定量测定加底物后的显色程度，确定待测抗体含量。操作方法Part-2操作方法二(一)实验准备：操作方法二（二）：基本实验步骤操作方法二（三）、基本操作方法操作方法二四：结果判定操作方法二（五）、注意事项ELISA的比色测定主要由酶标仪进行。此处强调以下几点：（1）试剂盒从冷藏环境中取出时，必须平衡至室温后，方可开封启用。（2）酶标仪不应安置在阳光或强光照射下，室温宜在15－30℃，使用前先预热仪器15－30分钟，测读结果更稳定。各种酶标仪性能不同，使用前应详细阅读说明书。（3）比色前应先用洁净的吸水纸拭干板底附着的液体，然后将板正确放入比色架中，以免锈蚀酶标仪比色架。（4）比色测定时，一定要注意酶标仪的波长是否已调至合适或所用滤光片是否正确。（5）加样时注意事项：加样不可太快，要避免加在孔壁上部，不可溅出和产生气泡。加样太快，无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上

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