液相色谱工作原理及简单操作_第1页
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文档简介

关于液相色谱工作原理及简单操作第1页,课件共14页,创作于2023年2月Agilent1260HPLC工作原理及简单操作内容:一、HPLC各模块的原理;二、开机/关机操作;

三、软件;第2页,课件共14页,创作于2023年2月一、HPLC各模块工作原理及维护HPLC:高效液相色谱仪(HighPerformancesLiquidChromatography)。

由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几个部分组成。

第3页,课件共14页,创作于2023年2月关于溶剂HPLC各模块的工作原理及维护所有溶剂应为HPLC级,水应为二次超纯水;所有溶剂应经过过滤。过滤水应使用一次性水相/有机相滤膜。所有溶剂应经过超声脱气;水易滋生藻类,避免直接照射,过滤水最好使用不要超过两天;注意溶剂的相容性,避免使用不相容的溶剂;避免使用强酸、强碱或有机氯等腐蚀性溶剂;在溶剂瓶中的溶剂过滤头可能会堵塞,必要时小心拿下用强酸(35%硝酸)浸泡时,用水冲洗,但不要使用超声处理。第4页,课件共14页,创作于2023年2月泵的注意事项1,溶剂的过滤、脱气;2,避免使用腐蚀性溶剂;3,在满足分析的前提下,尽可能使用较低的流速—较低的系统压力。四元泵:缓冲溶液要放在A、D通道,以避免盐颗粒析出。建议A通道:水;B、C通道:有机溶剂;D通道:缓冲溶液。HPLC各模块的工作原理及维护第5页,课件共14页,创作于2023年2月自动进样器样品要干净、经过过滤。洗针:把样品残留降低到最小限度HPLC各模块的工作原理及维护第6页,课件共14页,创作于2023年2月关于恒温柱箱控制范围:最高80ºC,低温低于室温10ºC。左右温度应保持一致。一定要关闭前面板。HPLC各模块的工作原理及维护第7页,课件共14页,创作于2023年2月检测器—DAD在没有样品分析任务时要关闭氘灯,以延长氘灯的使用寿命,但是也不要频繁的开关,这样也会影响寿命。同时,打开灯需要预热10min左右HPLC各模块的工作原理及维护第8页,课件共14页,创作于2023年2月检测器—FLDHPLC各模块的工作原理及维护FLD是一款具有高度灵敏度和高度选择性的检测器。其激发光源是氙灯,此灯不需要预热。第9页,课件共14页,创作于2023年2月开机操作:1,打开计算机。2,打开LC各模块的电源,等待仪器自检完毕,1-2min。3,双击桌面上“Instrument1Online”图标,进入化学工作站,在工作站打开各工作模块。4,打开SealWash清洗液开关,清洗10min。5,打开清洗阀,排除系统中的气泡,平衡差不多30min.6,拧上清洗阀,将流量设为所需流速,平衡30min即可以打样。关机操作:1,如果使用了缓冲溶液流动相应先用水冲洗系统30min。2,用纯有机相冲洗系统30min。3,在工作站上关闭各个模块。4,退出工作站,关闭计算机。5,关闭LC各个模块的电源。二、开机/关机操作第10页,课件共14页,创作于2023年2月指示灯状态每个部件接通电源后LED灯显示绿色关机poweroff准备进样poweron没准备好NotReady运行Run故障Error驻留ResidentBlink仪器LED状态显示电源开关显示黑Black黑Black黄Yellow绿Green红Red黄闪烁Yellowblinking6种LED仪器状态:开机/关机操作第11页,课件共14页,创作于2023年2月每次用过仪器后必须做!整台液相色谱仪的维护1.在使用过含盐缓冲液后必须清水冲洗泵15分钟,此时必须打开排放阀,不能使废液进入色谱柱。2.关上排放阀,用90%+10%的水、甲醇溶液冲洗整个系统,时间为15~20分钟,流量1ml/min。本步骤主要是冲洗干净系统内其他含盐的部位。3.用纯的强溶剂冲洗整个系统,时间为1小时,流量为

1ml/min。本步骤主要是保护色谱柱。4.如果未使用缓冲液,上面1、2两步骤可免去,直接用纯的强溶剂冲洗整个系统,时间为1小时,流量为1ml/min。开/关机操作第12页,课件共14页,创作于2023年2月三、实验操作及软件1、开机、开软件2、冲柱子:95%甲醇(排气泡)---5%甲醇(排气泡)---流动相(排

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