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检验仪器分析技术职业教育医学检验技术专业教学资源库沧州医学高等专科学校代荣琴时间分辨荧光免疫分析仪的分类与工作原理时间分辨荧光免疫分析仪的分类与工作原理时间分辨荧光免疫分析仪的分类与工作原理一、时间分辨荧光免疫分析仪的分类非均相时间分辨荧光免疫分析技术均相时间分辨荧光免疫分析技术分类时间分辨荧光免疫分析仪的分类与工作原理优点:省去了洗涤、分离和加增强液等烦琐的步骤,具有快速、方便等。缺点:需要特殊螯合剂。在测量前不必将结合标记物与游离标记物分离,可直接测量液相中的荧光强度。1.均相时间分辨荧光免疫分析仪:时间分辨荧光免疫分析仪的分类与工作原理非均相时间分辨荧光免疫分析技术在测量前需要将结合标记物与游离标记物进行分离,再进行液相荧光强度的测量。优点:灵敏度高、特异性强。目前广泛应用于临床是非均相免疫分析技术。2.非均相时间分辨荧光免疫分析仪用镧系三价稀土离子及其螯合物作为示踪物标记抗原、抗体、核酸探针等物质,反应后,将结合部分与游离部分分开。时间分辨荧光免疫分析仪的分类与工作原理二、时间分辨荧光免疫分析仪工作原理时间分辨荧光免疫分析仪的分类与工作原理二、时间分辨荧光免疫分析仪工作原理时间分辨荧光免疫分析仪的分类与工作原理不同时段荧光强度时间分辨荧光原理二、时间分辨荧光免疫分析仪工作原理正常情况下,免疫复合物中的稀土离子自身荧光信号很微弱,若加入一种酸性增强液,可使原来微弱的荧光信号增强将近100万倍。时间分辨荧光免疫分析仪的分类与工作原理二、时间分辨荧光免疫分析仪工作原理时间分辨荧光免疫分析仪的分类与工作原理镧系元素最大的荧光谱特征是激发光与发射光之间的Stokes位移较大。1.镧系元素荧光的光谱特征三、时间分辨荧光免疫分析仪技术特点时间分辨荧光免疫分析仪的分类与工作原理
2.解离-增强技术镧系元素离子螯合物本身荧光极弱,但在荧光增强液的作用下,Eu3+从免疫复合物上完全解离(3-10min),游离的Eu3+同增强液中的另一种螯合物形成一种胶态分子团,这种分子团在激发光的激发下能够发出强烈荧光,使得Eu3+荧光得以成千上万倍地放大。三、时间分辨荧光免疫分析仪技术特点镧系元素不能直接与蛋白质连接,需要双功能基团螯合剂,其一端与镧系元素离子连接,另一端与蛋白质连接,形成镧系元素离子-螯合剂-蛋白质(抗原或抗体)复合物;时间分辨荧光免疫分析仪的分类与工作原理
3.标记方法三、时间分辨荧光免疫分析仪技术特点此种螯合物体积很小,为原子标记,标记后不会影响被标记物空间立体结构,对蛋白质活性影响小。保证了被检测物质的稳定性,又实现多点标
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