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文档简介
项目一培养基制备园艺技术专业教学资源库模块三组培基本操作技术123CONTENTS母液配制培养基种类、成分培养基配制及灭菌项目一培养基制备二、培养基种类、成分(三)培养基成分水分有机物天然物质
培养基支持物质辅助物质无机盐培养基成分园艺植物组织培养要求:蒸馏水或重蒸馏水(即蒸馏水再蒸馏一次)
配制母液和研究时以保证各种成分的精确性和完全人为控制;大规模生产时可用自来水。二、培养基种类、成分培养基成分--水分园艺植物组织培养二、培养基种类、成分培养基成分--无机盐
元素名称添加形式大量
元素
(≥0.5mmol/L)微量元素(≤0.5mmol/L)NPKCaMgSFeBMnCuMoClKNO3,NH4NO3KH2PO4NaH2PO4KClKNO3CaCl2·2H2OMg2SO4·7H2OMg2SO4·
7H2OFeNa2-EDTAH3BO3MnSO4CuSO4Na2MoO4·2H2OCaCl2·2H2O园艺植物组织培养二、培养基种类、成分有机物维生素氨基酸植物激素碳水化合物培养基成分--有机物园艺植物组织培养二、培养基种类、成分培养基中有机物--碳水化合物种类:蔗糖或葡萄糖、果糖等。蔗糖浓度:2-3%,胚培养为4-15%注意:高压灭菌部分糖会分解。大生产时可用白砂糖。园艺植物组织培养二、培养基种类、成分培养基中有机物--维生素种类:VB1、VB6、Vpp、Vc及生物素、叶酸。浓度:0.1-1.0mg/L
VB1
促愈伤组织产生,提高活力
VB6
促根生长
Vpp
与代谢和胚发育有关
Vc
防组织褐变作用园艺植物组织培养二、培养基种类、成分培养基中有机物--植物激素1.生长素类(1)种类:IAANAAIBA2,4-D(2)作用:诱导愈伤组织和根分化,促进细胞分裂和伸长。(3)稳定性与溶解性:除IAA外,对热和光均稳定。多用95%酒精或稀NaOH溶液助溶。一般配成0.1-0.5mg/ml的母液。(4)浓度:0.05-5mg/L园艺植物组织培养二、培养基种类、成分培养基中有机物--植物激素
2.赤霉素(GAs)(1)种类:GA3(2)作用:促茎伸长,促胚发育成植株;打破休眠;一般在器官形成后加入。(3)稳定性和溶解性:不耐热,在低温条件下保存;溶于酒精,配制时可用少量95%酒精助溶。园艺植物组织培养二、培养基种类、成分培养基中有机物--植物激素
3.细胞分裂素(CTK)(1)种类:6-BAKTZT(2)作用:诱导不定芽分化和茎、苗增殖。(3)稳定性与溶解性:CTK对光、稀酸和热均稳定;溶解于稀酸和稀碱中,配制时常用稀HCl助溶。通常配制成1mg/ml的母液。(4)浓度:0.05-10.0mg/L园艺植物组织培养二、培养基种类、成分培养基中有机物--氨基酸培养基中最常用的氨基酸是甘氨酸,丙氨酸等。有时采用水解乳蛋白或水解酪蛋白,用量在10-1000mg/L之间。缺点:营养丰富,极易引起污染。如无特别需要,以不用为宜。园艺植物组织培养二、培养基种类、成分天然复合物香蕉泥马铃薯椰乳培养基成分--天然复合物园艺植物组织培养椰乳促愈伤组织和细胞培养,用量10~20%,使用注意茎尖大小。
香蕉泥对PH值缓冲大,用量150~200ml/L,应用在兰花组培。培养基成分--天然复合物园艺植物组织培养二、培养基种类、成分二、培养基种类、成分培养基成分--支持物质1.琼脂(1)用量:6-10g/L(2)种类:琼脂粉琼脂条(3)作用:固化作用注意:新买应试凝固力。2.其它
玻璃纤维、滤纸桥、海绵等园艺植物组织培养二、培养基种类、成分辅助性物质抗氧化物活性炭抗生素培养基成分--辅助性物质园艺植物组织培养种类
抗生素作用:防污染,减少材料损失。注意:抗生素对组织生长有抑制作用,使用要慎重用量:5-20%二、培养基种类、成分园艺植物组织培养二、培养基种类、成分抗氧化物1.常用抗氧化剂:半胱氨酸、VC、PVP2.用量:50-200mg/L,3.作用:防止氧化注意:可用抗氧化剂洗涤外植体伤口表面。园艺植物组织培养二、培养基种类、成分活性炭1.作用:具吸附作用;茎尖初代培养可防褐化;促进新梢增殖(浓度0.1—0.2%);促进生根;防止组培苗玻璃化(浓度0.3%);有利于胚胎培养。2.常用浓度:0.5-10g/L园艺植物组织培养二、培养基种类、成分组培所需药品价钱一览表药品名称规格包装价格(元)琼脂粉强度900g/cm2
1kg180琼脂条强度500g/cm21kg140MS干粉培养基(41.5克配成一升培养基)含蔗糖和琼脂粉500g90园艺植物组织培养二、培养基种类、成分组培所需药品价钱一览表药品名称包装价格(元)IBA10g100NAA50g30KT10g2502,4-D100g50TDZ塞苯隆100mg350反玉米素50mg2806-BA10g150园艺植物组织培养二、培养基种类、成分组培所需药品价钱一览表药品名称包装价格(元)烟酸100g60肌醇100g35VB1100g55甘氨酸100g10VB650g50园艺植物组织培养二、培养基种类、成分组培所需药品价钱一览表药品名称包装价格(元)硫酸亚铁500g30乙二胺四乙酸二钠盐500g50KI500g174钼酸钠500g340吐温-80500ml23园艺植物组织培养二、培养基种类、成分任务2:培养基配制1.学生分组提交培养基配制方案,并准备所需设备和物品;2.各小组分别配制MS培养基;3.母液标识与保存;4.填记录:配制完后,填写
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