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文档简介

微生物的菌种选育-酵母菌的分离筛选

酵母菌菌落特征:

大多数酵母菌的菌落特征与细菌相似,但比细菌菌落大而厚,菌落表面光滑、湿润、粘稠,容易挑起,菌落质地均匀,正反面和边缘、中央部位的颜色都很均一,菌落多为乳白色,少数为红色,个别为黑色。酵母菌的细胞形态:

酵母菌的出芽生殖模式:

酵母菌菌落形态:

分离酵母菌需要的设备高压蒸汽灭菌锅、电炉、天平、铁架台、灭菌培养皿、锥形瓶、漏斗、试管、烧杯、胶头滴管、石蕊试纸、接种环、酒精灯、量筒、玻璃棒、纱布、滤纸、试管塞、报纸、扎绳、标签、温箱、冰箱、盖玻片、载玻片、显微镜、杜氏管麦芽汁固体培养基的制备

(1)取一份麦芽粉加四份水,在65℃水浴锅中保温3-4h,使其自行糖化,直至糖化完全(检查方法是取0.5ml的糖化液,加2滴碘液,如无蓝色出现,即表示糖化完全)。(2)糖化液用4-6层纱布过滤,滤液如仍混浊,可用鸡蛋清澄清(用一个鸡蛋清,加水20m1,调匀至生泡沫,倒入糖化液中,搅拌煮沸,再过滤)。

麦芽汁固体培养基的制备

(3)用波美比重计检测糖化液中糖浓度,将滤液用水稀释到10-15波林,调pH至6.4。如当地有啤酒厂,可用未经发酵未加酒花的新鲜麦芽汁,加水稀释到10-15波林。(4)加入2%琼脂,加热融化,补充失水。(5)分装、加塞、包扎。(6)高压蒸汽灭菌0.1MPa灭菌20min。(1)取两块洁净灭菌的盖玻片,其中一块放置待分离的细胞悬液,另一块上滴加灭菌的稀琼脂培养基一滴,将两块盖片翻转,倒盖在湿室上。(2)把湿室固定在显微镜载物台上,在显微镜下观察,将连在操纵器上的微针的前端调节到视野的中央,然后将微针降下。(3)移动镜台推进器,将观察到的待分离的单细胞悬液也移至视野中央。显微操纵法分离酵母单细胞显微操纵法分离酵母单细胞(4)将微针慢慢地升起至针尖再现在视野中,并轻轻拨离细胞,当有单细胞附着在针尖后,将微针降下。(5)再移动推进器,将加有一滴稀琼脂培养基的盖片移动到针尖上方,慢慢升起微针,使针尖轻轻地接触培养基的表面,将单细胞从针尖上移接到培养基中。(6)经观察确认单细胞已接在培养基中时,将盖片取下,于合适的条件下培养,即分得单细胞培养物。1、光学显微镜下酵母菌细胞形态是什么

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