血涂片的制备

血涂片的制备和细胞大小的测量2021/10/101目的要求1.掌握血涂片的制备方法；2.认识红细胞及各种白细胞的典型形态；3.掌握显微测微尺的使用方法。2021/10/102实验原理涂片技术是制备血液样品最常用的技术。将血液样品制成单层细胞的涂片标本，染色后可对血液中各种细胞形态进行形态观察、细胞计数、细胞大小测量等工作。2021/10/103实验用品1.器材:医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、经脱脂洗净的载玻片、双凹片（推片）。2.试剂:Wright’s染液：Wright’s色素粉末0.1g，溶于60ml甲醇。2021/10/104方法与步骤一.血涂片的制备与血细胞的观察二.显微测微尺的使用2021/10/105采血前用70％酒精棉球消毒人的指腹2021/10/106采血2021/10/107由于第一滴血中含单核白细胞较多，因此弃去第一滴血。2021/10/108推片：挤出第二滴血置于载玻片的右侧2021/10/109再取另一张边缘光滑的双凹片，斜置于血滴的前缘，先向后稍移动轻轻触及血滴，使血液沿玻片端展开成线状。2021/10/101030~45°两玻片的角度以30~45°为宜，轻轻将双凹片向前匀速推进，即涂成血液薄膜。2021/10/1011染色待涂片在空气中完全干燥后，滴加数滴Wright’s染液盖满血膜为止，染色1～3min。然后滴加等量蒸馏水，使其与染液均匀混合，静置10～15min。用蒸馏水冲去染液，吸水纸吸干，镜检。2021/10/1012结果显示2021/10/1013淋巴细胞2021/10/1014单核细胞2021/10/1015嗜中性粒细胞2021/10/1016嗜酸性粒细胞2021/10/1017嗜碱性粒细胞2021/10/1018显微测微尺的使用显微测微尺是用来测量在显微镜下所观察到的物体的长度、面积的工具，包括镜台测微尺、目镜测微尺两部分。在使用的过程中，镜台测微尺起标定作用，利用它可以确定目镜测微尺旋钮上每小格代表的实际长度。目镜测微尺标定完成后，即可用于细胞样品的测量。2021/10/1019每个大格又可分为10个小格，每小格的实际长度为0.01mm总长0.1mm镜台测微尺总长1mm共分为10格2021/10/1020目镜测微尺可以通过旋转旋钮移动目镜测微尺中交叉线的位置2021/10/1021使用方法1.取下目镜,将目镜测微尺的刻度面向下放入目镜中,旋上透镜；2.将镜台测微尺盖片面朝上放在载物台上,用低倍镜观察,调节焦距看清镜台测微尺的刻度；3.移动镜台测微尺,同时转动目镜,使目镜测微尺与镜台测微尺平行靠近,并将两尺的“0”点刻度线或某刻度线对齐.然后从左向右查看两尺刻度线另一重合处,记录重合线间目镜测微尺与镜台测微尺的格数.按下式计算目镜测微尺每格等于多少微米。2021/10/1022目镜测微尺的标定n×aX=MX:目镜测微尺每格的实际长度a:镜台测微尺每格的实际长度n:镜台测微尺的刻度数。M:目镜测微尺的刻度数。2021/10/10234.移去镜台测微尺，换血涂片，目镜测微尺测量细胞所占小格数X目镜测微尺每小格代表的实际长度=被测细胞的实际长度。2021/1