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文档简介
包涵体包涵体(Inclusionbody):病毒感染细胞后在胞浆内形成的一种光学显微镜下可见的特殊结构,富含病毒的区域。大多数包涵体由病毒子组成,少数包涵体是细胞对病毒反应的产物。如狂犬病的Negri氏体。病毒包涵体染色法病毒染色法Mann亚甲蓝伊红染色法
Stovall-Black包涵体染色法
Lendrum包涵体染色法
Giemsa包涵体染色法
病毒包涵体染色法Mann亚甲蓝伊红染色法亚甲篮伊红染液:1%亚甲蓝水溶液6ml,1%伊红Y水溶液6ml,蒸馏水28ml。分化液:无水酒精100ml,40%氢氧化钠3滴。操作方法切片脱蜡至水;亚甲蓝伊红染液8-24h;蒸馏水10-20sec;分化液20-30sec;丙酮脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。结果:包涵体、尼氏体呈红色,细胞核呈蓝色。Giemsa法显示多种病毒包涵体。
1.切片脱蜡至水,蒸馏水洗。
2.浸入0.01M磷酸盐溶液(PBS)PH7.6中,换洗3次,3分钟/次。
3.
浸染于PH7.6的Giemsa染液中过夜。
4.PBS冲洗15分钟。
5.0.01%柠檬酸水溶液分化,于镜下控制。
6.
蒸馏水洗。
7.吸水纸吸干或风干切片。
8.丙酮脱水,1-2分钟。
9.入1:1丙酮和二甲苯1-2分钟。
10.二甲苯透明,中性树胶封固。Giemsa法显示多种病毒包涵体
结果:SARS病毒包涵体于肺细胞胞浆中呈现鲜红色;合胞病毒,巨细胞病毒包涵体于肺组织的细胞核内,在没有形成包涵体前呈鲜红色,形成包涵体后呈深紫色至蓝色。红血细胞显示绿色。病毒包涵体染色方法(苏木素-伊红)(1)二甲苯(Ⅰ)20min;(2)二甲苯(Ⅱ)20min;(3)100%无水乙醇2min;;(4)95%乙醇2min;(5)80%乙醇2min;(6)70%乙醇2min;(7)流水冲洗5min(8)苏木素染色5min(9)流水洗5min(10)盐酸分化20s (11)流水冲洗返蓝5min(12)伊红液染色30s(13)95%乙醇20s;(14)100%乙醇5min;(15)100%乙醇5min(16)二甲苯(Ⅰ)5min(17)二甲苯(Ⅱ)5min
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