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文档简介
肌酐实验室检测讲座石家庄肾病医院检验辑课件肌酐的测定血清非蛋白含氮化合物的一种,肌肉组织中肌酸或磷酸肌酸代谢的最终产物。肌酐的排出量相当恒定,不受食物蛋白质含量及尿量的影响而与肌肉发达程度、性别及年龄有关。肌酐的测定是临床诊断的重要指标。编辑课件
肌酐检测分类:(一)化学法:碱性苦味酸法1.漂白土碱性苦味酸法2.阳离子交换树脂法3.速率法4.双PH法(二次读数法)(二)酶法:1.肌酐酰胺水解酶法2.肌酐亚氨水解酶法(三)高效液相色谱法编辑课件
碱性苦味酸法:碱性溶液肌酐+苦味酸肌酐-苦味酸加成物(红色)510nm比色pH4:肌酐-苦味酸加成物肌酐-苦味酸加成物(红色)(黄色)编辑课件
碱性苦味酸法测定肌酐存在非特异的色素原干扰:干扰物质:抗坏血酸、a-酮酸、丙酮、乙酰乙酸、葡萄糖、蛋白质、胍以及其它化合物。这些不是肌酐而能与碱性苦味酸反应生成红色的物质称为假肌酐。*相当大量的假肌酐存在与红细胞中,测定时不宜采用全血。编辑课件
排除干扰方法:1.漂白土吸附法:一种硅酸铝土,酸性条件下吸附无蛋白血滤液中的肌酐,然后加入碱性苦味酸试剂洗脱肌酐并显色。2.阳离子交换树脂法:阳离子交换树脂(Ag50WX2,100~200目)吸附血清或尿中肌酐,肌酐洗脱后与碱性苦味酸反应。编辑课件
3.速率法(动力学法):根据肌酐和碱性苦味酸形成复合物的速度与非肌酐干扰物的不同,且肌酐的反应速度与浓度成正比的原理。干扰物质:a.快反应物质最初30s内反应
b.慢反应物质120s以后反应肌酐反应:31~60s
该法有助于解决反应的特异性,可消除某些非化学反应的干扰且简单、快速编辑课件
4.双pH法(二次读数法):利用肌酐苦味酸复合物和假肌酐质与苦味酸复合物的色泽稳定性差别原理。肌酐假肌酐+碱性苦味酸红色复合物红色复合物酸化至pH4酸化至pH4
褪色不褪色编辑课件
(二)酶法:1.肌酐酰胺水解酶法:肌酐水合酶肌酐+H2O肌酸肌酸激酶肌酸+ATP磷酸肌酸+ADP丙酮酸激酶ADP+磷酸烯醇式丙酮酸丙酮酸+ATP乳酸脱氢酶丙酮酸+NADH+H+
乳酸+NAD+340nm比色编辑课件
2.肌酐亚氨水解酶法:肌酐酶水解肌酐N-甲基内酰+NH3
溴酚蓝电极或离子电极测NH3酶法优点:特异性高、准确性好缺点:酶试剂昂贵、来源困难、不易保存(三)高效液相色谱法:准确性、特异性好,一般作为参考方法编辑课件实验82去蛋白碱性苦味酸法测定血清肌酐[原理]血清经除蛋白处理后,肌酐与碱性苦味酸反应,生成红橙色的苦味酸肌酐复合物,在510nm测定吸光度,与肌酐含量成正比。[试剂]1.35mmol/L钨酸溶液沉淀蛋白质,去除蛋白质对反应的干扰。编辑课件2.0.04mol/L苦味酸溶液与肌酐反应,生成肌酐-苦味酸复合物3.0.75mol/L氢氧化钠溶液提供碱性环境编辑课件[肌酐检测注意事项]1.制备去蛋白血滤液时,钨酸溶液
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