化学药物结构确证的技术要求与案例王玉成

化学药物结构确证研究的技术要求与案例分析

王玉成

中国医学科学院

医药生物技术研究所目录(一)结构确证研究的一般原则和要求(二)对不同类别药品结构确证的要求(三)对特殊化学结构药品结构确证的要求(四)各项波谱和测试的技术要求(案例)

1.结构确证研究的主要对象

2.结构确证研究的基本方法

3.结构确证研究的主要内容

4.结构确证研究的一般要求(一)结构确证研究的一般原则

和要求1.结构确证研究的主要对象

经化学全合成或半合成、微生物发酵以及从动、植物中提取的原料药,包括新药、进口药和已有国家标准的药品.按来源：

化学合成、半合成、天然产物中提取、发酵等;按组分：

单一组分、多组分混合物;按分子量：

小分子化合物、大分子化合物;按结构特点：

成盐化合物和非成盐化合物、手性化合物和非手性化合物、含结晶水/溶剂和不含结晶水/溶剂等;2.结构确证研究的基本方法

①化学方法：理化分析、元素分析、化学关联等②物理方法：波谱方法、衍射技术

a.射频波、微波与物质的相互作用：核磁共振、电子顺磁共振等(ESP根据谱图中吸收峰的位置、谱线的积分强度、谱线的宽度及超精细结构等信息可以鉴定自由基和过滤金属离子等顺磁粒子的结构状态，检测它们的浓度（可检测到10-14摩/升）。)b.红外、可见、紫外光与物质的相互作用：红外光谱、紫外光谱、拉曼光谱等

c.X－射线与物质的相互作用：X－射线衍射等

d.电子与物质的相互作用：质谱、电镜等

e.其他：热分析、原子吸收、原子发射等3.结构确证研究的主要内容

①骨架（平面）结构：

分子中各原子之间的连接顺序和方式;②构型：

分子中各原子之间的空间相对位置;③结晶水/结晶溶剂：

与水、有机溶剂通过氢键等结合;④晶型：

分子（或原子）在晶体中的排列方式;

骨架（平面）结构

例：氟吗西尼骨架（平面）结构的研究方法:a.单晶X－射线衍射;b.常规方法，如元素分析（或高分辨质谱）、UV、IR、NMR（包括二维谱）、MS等组合;

应根据化合物骨架结构的特点及其复杂程度、有无对照品及参考文献，合理选用测试项目。

构型：

几何构型:双键、环状化合物，常用顺－反（cis－trans）或Z－E表示

例：西尼地平（±）-3-（2-甲氧基乙基）-5-[3-苯基-2（E）-丙烯基]-2,6-二甲基-4-（3-硝基苯基）-1,4-二氢-3,5-吡啶二甲酸酯

例：拉米夫定

(2R-顺式)-4-氨基-1-(2-羟甲基-1，3-氧硫杂环戊-5-基)-1H-嘧啶-2-酮

几何构型的研究：

理化性质差别明显

a.

理化常数，例如熔点等;

b.氢谱、碳谱;

c.

红外光谱、紫外光谱等;

光学异构：由于分子的不对称性引起，常用D-L或R-S表示。

例：那格列奈（－）－N-（反-4-异丙基环基甲酰基）-D-苯丙氨酸

例：前列腺素E1（1R，2R，3R）-3-羟基-2-[（E）-（3S）-3-羟基-1-辛烯基]-5-氧代环戊烷庚酸

光学异构的研究：a.

比旋度测定

b.手性柱色谱（HPLC、GC）

c.

核磁共振（NMR）

d.

单晶X—射线衍射（SXRD）

e.

旋光光谱（ORD）(1.决定化合物之绝对立体构造。2.决定蛋白质2级与3级构造。

)f.

圆二色谱（CD）g.

其他方法对照品法——根据对照品的构型推定化学关联法——利用合成工艺分析

例如，左旋西替利嗪的构型确证：手性柱色谱定位（与对照品对比)、比旋度数据、光学纯度分析晶型的研究:

晶型

是化合物一个重要特性;对于多晶型药物,因晶格结构不同,某些理化性质(如熔点、溶解度、稳定性)可能不同;而且在不同条件下,同一化合物的各晶型之间可能会发生相互转化。对于难溶性固体口服制剂,其原料药晶型可能影响药物的溶解度、稳定性、药代动力学性质进而可能影响药效。所以对于已有文献报道的多晶型化合物应明确其晶型,晶型的一致性;对于创新药也应注意积累相关研究资料观察有无多晶型现象。晶型的研究:

a.粉末X-射线衍射法

b.红外光谱法、拉曼光谱法

c.熔点法

d.热分析

e.光学显微镜法

无对照品和文献报道：考察不同结晶条件下（溶剂、温度、结晶速率等）制备样品的熔点、红外光谱、粉末X－射线衍射等;

有对照品:

对比自制药物与已上市药物的熔点、红外光谱图、粉末X－射线衍射图谱等;

有文献报道:

对文献资料进行分析，选取能够准确反映产品晶型的测试项目;结晶水/结晶溶剂的研究:

药物分子通过氢键等和水、有机溶剂结合形成水合物/溶剂化物,含有不同数量结晶水/结晶溶剂的化合物可能具有不同的物理性质,进而可能影响药物的生物利用度,因此对于原料药应明确其所含的结晶水/溶剂的情况。结晶水/结晶溶剂促的研究:a.元素分析b.热分析c.干燥失重养、水分检沙查d.单晶X-射线衍吊射创新药案：在干燥失绞重、水分忆测定研究情的基础上套，通过热怕分析、元扒素分析等抚确证样品锤分子中结动晶水/结晶溶剂病的数量;已上市上的药品依：采取合雀适的分封析方法对对样品钩进行分便析，以俱确证其骂结晶水/结晶溶搁剂的情传况与已曾上市产狡品一致;小结：在审评过接程中专家径评价的关欧注点一般让包括:结构确伍证方案牙设计的偶合理性,是否对化巡寿合物所有绢要素进行林了考虑;研究内挥容设置家的全面浮性,所有的结伯构特征是刊否已被确练证;分析方法珍选择的正息确性,所用方法评能否针对亭性地解决完结构问题婶。研发者拣在进行汁结构确册证研究押时,测试项目痕的选择要碌依据化合单物结构特域点、需要晴解决的结程构问题、导各种方法珍所能解决线的结构问键题等综合专考虑。①对测试样初品和对照叼样品的要控求：测试样品:a.精制方帖法测试样捷品要采鬼用和原伴料药制荡备工艺处中相同环的精制步方法、或工艺条峰件进行云精制；攻对于进喉行晶型毒分析、摧结晶水/结晶溶斗剂分析般时尤其很需要注乔意，因熊为不同伤的精制述方法和跑工艺条佛件可能倚产生不努同的晶捏型、结帖晶水/溶剂。b.纯度要牢求大于99.蒙0%，杂质含紧量应小于0.5符%；对栗于手性胀药物，筒应增加躬对对映螺体、非候对映体惜纯度要军求，一冠般不篇低于99.5祥%。注意点腊：仿制药追物：相楚关物质臂大于或服等于0.1%，要进膀行结构糊确证（晌注意响弦应因子缎）创新药物荷：除了与领仿制药物耗一样之外另，尽可能睬多的罗列绍所有可能晒杂质，要债与中间体同关联，特温别注意手翅性问题！对照品:a.合法来源她证明购得的室标准品(已有国爆家标准载的药品)市售原料猜药市售制剂念中提取得圾到的原料佣药从正规试镇剂公司购咬得的试剂泡等（有的申报买资料中，座未选择上吊市原料药肉或其他合叙法对照品晌，而是采浊用自己单循位精制的敲产品，这办种“自身瞒”对照的贫数据和图低谱对于结凡构确证没叶有任何帮柔助。）b.精制方法袜：对于用于乏晶型、结蝴晶水等信爪息确证的科对照品，币不应采用疮处理后原写料药或制善剂中提取需物作为对疗照品，因亲为原料药祥和制剂在纪不同溶媒林处理后，处会对样品疮真实的晶番型和结晶倘水产生影身响，造成分误判。c.纯度检查勉：对照品蒜的纯度速检查：话申报资合料中应泳提供对业照品的耻纯度检以查结果捡。一般奸来说，梨对照品辉纯度应回不低于本精制品匆纯度，识以保证靠对照品岩对药物册结构确淹证的支帖持力度篮。4.结构确烈证研究俩的一般乘要求②对图谱、访数据的要节求附图应为驳原图的复纺印件或照馆片;图谱及线图谱上评的标记测、数据勾应清晰血，并有液完整的萝检测日瘦期、各勺项参数坟、测试特条件、切仪器型园号及样茄品编号猫等记录枣。各项检它测数据床应按规团定列表珠说明，仆注明其展顺序。肝有对照极品的应森将测试添品和对脉照品同惠一波谱闪的数据程在一个袋表中对似比列出从。如有斑可作参旧照的文秃献数据趣，也可你列在同造一表中敞。质谱泰应附离亚子裂解炸图。(二)对不同类估别药品结切构确证的粘要求未知结娇构的化料合物：址推论结邪构已知结构炒的化合物侧：验证结让构①未在国证内外上第市销售谨的原料吨药按全新化靠学单体要湿求：推论壳结构a.完成必歇要的各坛项测试;b.应提供充躁分的试验垫图谱和数赖据;c.按新化隐合物要政求进行钓图谱解肉析和综伴合解析;如有参考词文献资料斑，可提供施作参考。②已在国武外上市思销售但辰尚未在吧国内销辣售的原元料药或沾已有国研家标准绵的原料昌药按已知缝化学结渠构的药酿物：验阿证结构可以使叙用对照途品可以参塘考文献a.有合格梨对照品赏的化合团物：提供测试攀样品和对糕照品在完韵全相同条压件和同一粪仪器上测债得的各项蕉图谱和数恼据，完成前所需的各烧项目测试诸，若二者曲完全相同激，并对重乎要的波谱期讯号和测叔试数据进网行了正确撇解析，即乎可得出二荒者化学结光构一致的握结论。b.有详细卡文献数铅据的化筑合物：可对结吸构确证继研究的父内容、疑方法提距供线索塘，并为统解析提吓供参考溉，但是格不能作柱为结构绵确证研醉究的充票分证据峰，仍需典要进行毕较为详数尽的图娱谱解析演和综合雾解析。c.无对照将品和文绪献数据特的化合启物：除了目郑标化合功物的结涝构外，丝式缺乏其称他支持座性资料锄，因此污原则上怠应按全最新化学塞单体要盖求进行暑全面的逢研究，耀提供充毁分的试志验图谱帖和数据歪，可结反合其它请研究工恭作（例释如合成略工艺路搅线的确渐定）以览进一步红推论化往合物的羽结构。(三)对特殊化崖学结构药右品结构确赚证的要求1.立体异构殿体药物立体异庙构体：①光柱学异构兼体a.对映异效构体b.非对映勉异构体②几克何异构派体（顺撑、反异衔构体）手性药钞物----绝对构挥型和相患对构型a.单一对映婶体----绝对构宽型比旋度测蛛定手性柱识色谱(手性HPL国C和GC)核磁共盗振单晶X-衍射圆二色谱旋光光偿谱b.消旋体---息-有多个早手性中轰心时要灵求确定糕相对构戴型;c.立体异构杯混合物---规-确定异构增体的组成唐和比例;“手性药物瓜申报资料镜及审评要商点”(药审中秩心)①应注意哪确证产问品的立困体构型功。可根模据手性班中心的五多少、莫文献数妻据是否荷充足、挪对照品否的有无科来选择虚合适的徒确证的坦方法，月必要时嘱可采用尝单晶X－射线衍龟射进行确饶证。②比旋斩度是必须耕的检测项猎目之一，胶已知的起基始原料的丘构型和化犁学合成方驰法的立体谦选择性也辛可作为依嘉据之一。2.具有多晶狭型的药物晶型:是指结晶跳物质晶格壳内分子的飞排列形式移。多晶型身物质晶量格内部让分子间彩力的差象异可能泛引起药行物各种弊理化性士质的变震化，瞒主要对陵熔点、皮溶解度沙及溶出慨速率、袋稳定性乔、有效柴性的影事响。重点：以适宜候的方法嫩获得药漠物晶型偏的数据奸。常用方法生：粉末X-衍射法红外吸忆收光谱拦法熔点热分析光学显攀微镜①创新药肢物a.不同结途晶条件繁下（溶孩剂、温谷度、结健晶速率拔等）晶苹型的一疤致性；b.不同晶制型是否户影响药掩物活性歇和毒性亩等;②结构已知坐的仿制药战品a.力求与被呜仿制品保尚持一致；特别是被宣仿制药为起晶型选择拨性药物，基且各晶型匹的理化性谜质及生物钓药剂学性只质有明显保差异的仿榴制药品，咳要重点确绩定与被仿激制品种晶划型的完全令一致性（毛熔点、红逼外吸收光觉谱、粉末X—射线衍射雪图等)。b.重点关注压难溶性固彼体口服制凶剂晶型的帐研究；3.合成多体肽类药庙物氨基酸磁分析（证明肤多肽的快组成是首否正确轰）；质谱测位定（提供相流对分子闪质量及覆序列的共信息）粒；序列分析渴以及肽图渐测绘等；紫外：对具有生灵色团结构宴的小肽有台一定的测密试意义；红外：适用于始小肽（伸含三个窗氨基酸霉的肽）林、拟肽皂等；核磁共振嫁：可对小挽肽的结仿构提供疲部分信供息；其他方养法：HPL齿C、比旋度肥测定等。药物结构令中有半胱白氨酸，应壁明确其状爆态（氧化零态或还原炊态）；药物结构吐中存在二莫硫键，应江明确二硫仰键的正确过连接点；结合合聋成工艺裤对中间埋体的研耀究，对匀终产品物的结构香进行确口证。4.多糖类药旗物多糖结构肯的描述包白括:①多糖的分吵子量范围织；②多糖贺的单糖踪蝶组分；③单糖傻的连接叔点类型旅；④单糖予和糖苷贫键的构之型；⑤重复围单位;确证方透法：单糖的分狱离、鉴定铅：纸色谱华法、TLC、HPL判C、气-质联用技诱术等；多糖的誉相对分纪子量及暮分子量宿分布测腿定：凝胶色谱挡法；糖苷键壁的连接纸方式及蜘糖苷键盈的位置天：红外、疲核磁共献振、化弦学反应联后产物桶的分析事等；5.多组分药系物明确各组能分的组成色比例，对请影响药效绘和毒性的主要成分进行结独构确证专。可使用殃经典的芝提取方和法或其惹它分离裂技术，欣如制备宋色谱（TLC，HPL即C），分离并得到主要缎药效成分舌单体，按貌单体项目笛要求进行宗化学结构明确证。在组分多洲，含量少乎，难于得伐到单体时眼，可使用速联机分析傻技术，如引气一质联疏用（GC—MS），液—质联用扯（LC—MS），气—付利叶纳红外联雕用（GC—FTI奴R），质—质联用（MS—MS），辅扩助组分协结构的粉验证及羡定量分鞭析。6.不含金属理元素的有停机盐类或停复合物应同时嗓提供成盐前含后的两套剪波谱和斥试验数拴据。对于某些赴波谱测定铲有困难或柱不易说明细其结构的腊盐或复合甘物，可测率定药物酸傲根或碱基铁的波谱，露并结合其悲他试验项毯目进行确扬证。7.金属盐挎类和络短合物除通常丧要求的役各项测扛试外，悠还应提微供确证检分子中厚金属元解素的种邀类、存简在形式冰和含量截的有关磨图谱和墨分析数虫据。不适于或镰不能测试烦金属盐本边身的项目同，可以用仓成盐前的惜酸分子或隶配位体的神相应测试曾结果进行谊佐证。8.半合成化免合物分子母享核的结洪构为已委知并可退以确证挤其原分医子母核订结构在储合成过饲程中未普发生改奏变的，左可适当退简化对艺母核部刘分结构如的确证厉工作。胸重点对新引入遥基团进行结构牵确证，可贷以结合原巨料结构和忽合成路线咳进行论证寇和说明。如涉及县构型确蚁证，若脊母核手姜性中心轨构型没吐有改变绘时，重炭点在于秃侧链和咽取代基中中新引累入手性气中心的号构型确捷定。综合解径析举例FABM蠢S22资muM+HM+Na1236457891011121314151236457891011121314CHCH2OCH3123645789101112131412a2b34591011131478612a2b34591011131478612a386452b971110141312364578910111213141512a2b345910111314786申报资党料的格昨式和内鉴容一.新药的者化学结眯构式、复分子式受及分子兵量二.供确认化绿学结构用伯供试品的肯纯度及检摩查纯度的扣方法三.确证化学敞结构的方贿法理化常数元素分析四.各项波辅谱和测朝试的技绵术要求紫外吸收咽光谱红外吸收晒光谱核磁共拴振氢谱核磁共驳振碳谱质谱差热分析X-射线衍坡射谱综合解袄析五.参考文遥献一.新药的筝化学结侵构式、围分子式研及分子烦量二.供确认释化学结谣构用供竿试品的膛纯度及杠检查纯宝度的方农法三.确证化拖学结构尾的方法2元素分勾析①主要应用敌：确定元鞠素组成鸭、分子债式;除氧元骑素外，妹其余各逢种元素造一般均指能准确犁测定其孕含量。可以反映秆结晶水/结晶溶事剂、成赔盐化合杂物的酸吉根和碱扭基等。C、H、N元素可烘采用自唯动元素落分析仪材测定，村其他元舌素可采猜用适宜鸟的物理赠或化学捉方法测木定。②技术要求凑：a.应详细说戒明使用仪稼器、测定少方法及条饺件。特别用是对测试泄样品的预蔽处理方法砍、条件。b.同一样品范测定两次瓣，两次实述验数据同粮时列出，拴不取平均扩值。c.应给出藏计算理比论值所棋依据的备分子式距，包括伞结晶水摇（或结矿晶溶剂)。列表比较实测次值与理论吗值（一般钉要求误差逮不超过0.3％），竹初步判盒定供试轿品与目巴标化合旨物的分报子组成稠是否一脂致。d.附测试锻报告单翁的复印孔件。仪器型鹿号与测延定条件仪器：Car峰lo-凳Erb傍a1台106元素分休析仪(意大利)测定条加件：105字0℃催化燃烧拘载气遍：N2氧瓶法密测定测定结果他与解析测定结笋果：样刺品测定浩结果与幻玉对照品区测定结殊果见附黑表1。结果解析车：样品与汁对照品的欺实测值同疗理论计算株值基本相蚁符，C、H、N、的误差哲均在千分献之五以内路，同含5个结晶水锈的盐酸大云观霉素分伪子式C14传H24甲ClN皇2O7•2HCl•5H2O符合。表1样品（0207捐08）与对万照品（DJS）的元素咽分析数据CHN样品（020708）(%)33.667.285.6433.767.375.67对照品（DJS）(%)33.657.305.6733.627.295.68理论计算值(%)33.957.335.66(四)各项波牌谱和测漠试的技窄术要求1.红外吸收葱光谱(IR)①基本原效理：分子中化浇学键振动恨能级的跃泊迁。②主要娘应用：a.鉴定化拐合物的示结构——有对照品湖、标准图您谱b.推测化合感物的结构——确定特挖征官能关团、区古分晶型励等③技术要求羡：a.按药典规粘定方法校扭正和检定季仪器；b.正确选摔择测试山方法和岔条件固体样禽品首选呆溴化钾哪压片法骂；离子交诉换----猴-氯化钾喷压片；晶型变化----通-糊法；c.准确、拍合理、凝充分的嗓图谱解对析;d.按要求格姥式列表和持撰写资料;仪器型号格与测试仪器：Nico流let势Impa基ct-4克00型红外分镰光光度计仪器测试抽：用聚苯每乙烯膜仪器的测侄定条件测定条克件：样谷品测定信用溴化距钾压片暑法测定图谱弓：图1、2附图3：聚苯唤乙烯膜红糠外吸收光劳谱。④资料撰写怒格式仪器测试条愉件仪器校正拢和检定数据表解析吸收峰(cm-1)

强度振动类型基团2.紫外吸收娇光谱(UV)①基本原理签：电子跃理迁②主要恨应用：甘推测共融轭体系排的骨架及结构（艇发色团探、助色惨团）紫外光谱——定性吸收系表数——定量③技术要求a.按药典世规定方临法校正商和检定巴仪器；b.通常要衔求三种虹溶剂：饶中性、0.1N钻HCl、0.1劣NN盘aOH；c.要求定量爱，准确计夏算摩尔吸励收系数；d.归属主舅要吸收吼谱带；e.数据列均表说明胃；④资料撰屿写格式仪器测试条吓件仪器校受正和检宴定数据表解析

溶剂λmax

ε值基团和吸收带溶剂λmaxnmAbs水194.80200.00210,002.06232.28060.82090.1mol/L盐酸200.00204.00210.002.05892.26251.2121三乙胺198.00203.00210.002.00952.27111.33163.核磁共振肠氢谱(1H-N炕MR)①基本原木理：利用原历子核的组核自旋路现象，桃通过一蚁定振动彩频率的野电磁波永照射时贼，原子叠核吸收溪电磁波氏从低能眨态向高政能态跃奔迁，即蜘核磁共魂振。②主要应司用可提供态供试品拾中氢原桥子数目圣、周围前化学环境、相登互间关系健、空间排闸列等信息亦。③技术要求a.应使用200编MHz以上高分歌辨NMR仪。b.对各项水测试条峰件应有设明确、枪详尽的未说明，定如仪器旧型号、凡规格、吸溶剂、努内标。c.对分子中侦全部H原子均封要有明愤确的解沾析和归团属。d.对复杂结刚构化合物接，应考虑足采用合适榜的其它技旬术加以佐遗证。④资料撰写寄格式仪器溶剂、搬内标给出原子警编号的分乓子结构式数据表(如有对照做品或文献怪数据可以惰对比列入礼表中)解析原子序号化学位移质子数多重性J值相应质子4.核磁共振右碳谱(13C-N垫MR)①基本原卫理：利用原子坟核的核自倒旋现象，逐通过一定在振动频覆率的电磁烤波照射时膊，原子核铲吸收电磁波从低求能态向高裤能态跃迁戚，即核磁建共振。②主要应棕用:可提供陶供试品碑中碳原污子的数棍目、所边处的不同化学裤环境信息唤。③技术要锄求a.对各项测菠试条件应变有明确、齿详尽的说他明，如仪未器型号、荐规格、溶疮剂、内标帜。b.在图谱净复杂时镜，应使诵用质子肠噪声去睬偶或偏南共振去骑偶技术凑，使图摄谱简化添。c.对分子梨中全部C原子均疮要有明拦确的解危析和归少属。d.对复杂正结构化懒合物，冠可与类叙似结构吴化合物倒的化学献位移进办行计算葱比较，胖确定合桃理结构未。④资料撰跌写格式仪器溶剂给出碳原辽子编号的愧分子结构著式数据表(如有对鞠照品或拉文献数饭据可以运对比列牲入表中)解析

碳原子序号

化学位移

碳原子类型5.其他核磁温共振谱DEPT谱:可区分岁碳原子撕的类型;1H－1Hco添sy:可以显示舟相隔2～3键相互之付间存在偶遥合的质子宽对信息;C-铁Hco役sy类(HM车QC膝,异核多畅量子相腿关谱):可以了解预分子中C-H联结情况;HSQ话C(异核单量产子相关谱):用于测定1H-13C相关信岩息，可柳以直接挠明确C、H之间的连等接关系;HMB驻C(异核多重贿键相关谱):可以显艳示1H、13C之间远去程偶合誓的信息战，即相宝隔二键淹和三键差的1H、13C之间相源关信号;解析化程合物中景存在的姥结构单机元，推车测化合扫物中各扩官能团馅、结构调单元之态间的连针接关系;19F、31P等:可提供芹相应元饭素的种民类及数刘目、在施分子中什所处的曲化学环远境等信诸息;常用的傻二维核酸磁共振蠢测试包蛇括H-H川cos档y（H-H差Corr投elat殖eds姜pect稀rosc壤opy）、HMB扒C（1H-土det辫ect展ed斩mul钢tip吵le-朴bon撑dh粱ete撕ron童ucl括ear屈mu脚lti泻ple芬-qu路ant胃um严coh研ere链nce）、HMQC（1H-d理etec条ted扛hete虫ronu袍clea及rmu沸ltip稿le-q逆uant醒umc捎oher来ence）等，屈对于结激构复杂贩或用一尼般NMR方法难以烦进行结构稀确证的化楚合物，进桶行二维谱未测试可更集有效地确自证药物的夸结构。碳谱注意疯点：1.碳信号数般目比实际剩的少，原洲因可能为萌信号重叠绕，或有些弟季碳信号尾弱，或隐究藏在溶剂盛信号内；2.碳信号榴数目比区实际的围多，原蚕因可能奸是某些宣化合物安存在构年象异构迁。分子式：C44六H69鱼NO1郊2.H升2O结构式慢为C44H关69NO瘦12，在其13C全去偶谱林中应显示44个峰，但撇实际显示轿多达83个峰，足这是因震为在溶责剂中有器两种构键像,一种为巷优势一标种为劣哑势，（耻文献报浩道在氯李仿中比夜例为3:1）6.质谱(MS)①基本原影理：将气体嗓分子经轰电子流洞轰击,使分子会中的电领子成为缎带正电骨荷的分吹子离子,而后裂抬解成一享系列的滨碎片离华子,再通过润磁场使胸不同质歉荷比的旁正离子映分离并暗记录其费相对强缸度,画出质叹谱图。②主要应原用：提供分鞋子离子欣峰、碎口片峰、钱丰度等婚信息，应可以确范定分子打量、分缺子式以互及推测参部分结产构单元面。对含有懂同位素拉元素(如Cl、Br等)的药物,利用同位厘素簇的丰槐度比，可扯推断药物仁中部分元司素的种类吐、数量，兄乃至分子昂式、裂解娱方式等。③技术要求:a.应尽量设叮法获得化陶合物分子往离子峰。穗当用EI法不能夜出现分冒子离子米峰时，通可试用毯其它电挣离源，例如CI，FAB，FI，FD，ESI等。b.所获数据哄按规定列辜表，并对湿重要的碎子片离子峰盲的产生进甜行解释，贡提供离子锅裂解图。c.高分辨钩质谱不窄能反映洋药品的镇纯度和宽结晶水摔，结晶木溶剂，泛残留溶圈剂的情齐况。④资料撰写冻格式仪器测试条犹件数据表裂解图解析M/Z

相对丰度

碎片离子7.热分析①基本原袄理：采用程斯序控温筒下，精状确记录悟待测物待质理化眼性质与允温度的剥关系，改研究其字受热过歪程中晶搜型转变冻、熔融孙、升华绑等物理衡变化和伞脱水、挣热分解窝、氧化述、还原京等化学启变化。②主要应拆用：差示扫描学量热法（DSC)讯:测定熔点这、结晶水/结晶溶剂值、考察晶暖型等。热重法撤（TGA吨):测定结晶袖水、吸附替水和结晶识溶剂、分波解温度等途。③技术要求慎：a.应说明使畅用仪器型摘号、参数闯设定值，伐包括升温锐度速度、晋样品重量侍、温度范误围。b.供试品良与对照丑品应在捞同一仪落器、相啦同条件跑下测定肌。c.差热分猜析曲线政表达：均纵坐标热为热流刑率（dp/d餐t），横坐匹标为温度吃（℃）。饲气体一般烈为氮气，灰流速为40ml硬/min。热重分反析曲线卡表达：夜纵坐标小为重量如（mg