细胞周期和DNA倍体流式细胞术分析_第1页
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文档简介

细胞周期和DNA倍体

流式细胞术分析细胞周期和DNA倍体分析的原理G0/G1期DNA含量为2C,为二倍体细胞S期细胞,DNA含量开始增加,>2CG2/M期细胞,DNA含量开始增加至4C1、正常细胞DNA含量稳定在2C水平2、性细胞DNA含量为1C3、处于增殖期至分裂期细胞由2C增加至4C4、凋亡细胞丢失DNA,含量<2C组织细胞经荧光染料(碘化丙啶,PI)染色,用流式细胞仪测定细胞DNA含量,可得到细胞周期三个时相(G0/G1、S和G2/M期)DNA含量(%),反映细胞的增殖状态和非二倍体(异倍体)的DNA含量Diploid:100.00%Aneuploid1:0.00%An1G1:%atAn1G2:%atAn1S:0.00%G2/G1:%CV:DI:【重要参数】DI(DNA指数,判断倍体数)=(标本G0/G1期细胞峰的平均荧光道数)/(正常二倍体细胞G0/G1期细胞峰的平均荧光道数)PI(增殖指数,表示细胞的增殖活性)(%)=(S+G2M)/(G0/G1+S+G2M)×100%SPF(S期细胞比率,表示细胞的增殖活性)(%)=S/(G0/G1+S+G2M)×100%DNA非整倍体的出现可能是癌前病变发生早期癌变的一个重要标志在病理形态学不能做出诊断前可提供确切诊断信息DNA非整倍体的交界瘤应按恶性对待形态学表现良性的肿瘤出现非整倍体提示恶变可能DNA指数可作为判断间叶组织肿瘤良恶性的辅助指标【临床意义】【诊断瘤细胞的标准】发现DNA异倍体,诊断为肿瘤;如无明显异倍体,但有一个突出的4倍体细胞峰和>15%的S期细胞,并伴有G0/G1峰的CV>9%,诊断为肿瘤;如无明显异倍体,但G0/G1峰的CV增大,并伴有>10%~15%的S期细胞和一个突出的4倍体峰,诊断为可疑瘤。Diploid:76.12%Aneuploid1:23.88%【临床病例】肺癌胸水Diploid:78.08%Aneuploid1:21.92%宫颈脱落细胞,TCT发现少量异常细胞Diploid:97.61%Aneuploid1:2.39%肺癌胸水Diploid:100.00%增殖旺盛的肿瘤细胞株【标本采集要求】

新鲜脱落细胞、瘤组织请置生理盐水等等渗液体中;骨髓、血液、灌洗液、胸、腹水等可直接送检。【具体检查项目】

组织块DNA异倍体检测180元;脱落细胞、骨髓、血液、灌洗液、胸、腹

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