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文档简介
常固液配福马-酸-酒精固定液50%70%酒精90ml冰醋酸5ml福尔马(甲醛5ml可用作固定植物的一般组,不适用于单细胞及丝状藻也不适宜作细胞学研究。幼嫩材料用50%精代替70%酒精,可防止材料收缩。若材料坚硬,可略减冰醋酸,增福尔马林。若材料易收缩,可稍增加冰醋酸。久置时另加入5ml甘以防蒸发和材料变硬。此液又可作保存液。固定时间最多10h如果用在植物胚胎的材料上,改用下面的配方,效果较好:50%精89ml+冰酸6ml+福马林福马-酸-酒精固定液(FPA)福尔马林5ml+丙5ml+酒精固定一般的植物组织,通常固定,长久保存。酒-醋酸氯仿固液(卡诺固定液)配方Ⅰ:纯酒精3份+乙1份配方Ⅱ:纯酒精6份乙酸+氯仿份配方Ⅲ:甲醇份+酸+氯仿3份适用于植物组织和细胞学材料细胞分裂和染色体的优良固定液时间不宜过久。酒-福尔马林固定液福尔马林2~6)ml+70%酒精固定植物一般组织,尤其适用于萌发的花粉管的固定。通常固定24h亦可长久保存。酒-福尔马林甘固定液95%精150ml+福尔马林+甘50ml此液也可长期储存材料。铬-醋酸固定液根据固定对象的不同,可分为强、中、弱3种方:(1弱液配方:铬酸2.5ml+10%酸5ml+蒸水92.5ml(2中液配方:铬酸7ml醋酸10ml+蒸水(3强液配方:铬酸+10%酸30ml+蒸水60ml弱液配方用在固定较柔软的材料,如藻类、苔藓和蕨类的原叶体等。固定时间较短,一般为数小时,最长可固定12~24h但藻类和蕨类的原叶体可缩短到几分钟至1h
中液配方用于固定根尖、茎尖、未成熟子房和胚珠等。为了易于渗透,可在此液中加入的麦芽糖或尿素。固定时间。强液配方用于固定木质根、茎、成熟子房等。为了易于渗透,可在此液中加入%麦芽糖或尿素。固定时间12~24h更长。铬-醋酸福尔马混合液这3种药品混合在一起所配成的各种固液,通常称纳瓦申固定液称。方见下表:纳瓦申
纳瓦申固定液ml)
桑弗利斯液常备液原液(ml)
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
ⅣⅤ
(ml)1%酸
铬酸
甲
铬酸
冰醋酸
液乙液
蒸馏水福尔马林蒸馏水
甲、乙两液均为贮备液用之前才将二者混合适于组织学和细胞学的研究材料柔嫩而含水多的材料,可选用Ⅰ或Ⅱ固定,坚韧而成熟的材料,可用高浓度的Ⅳ或Ⅴ料多用Ⅲ。制作染色体和有丝分裂的纺锤体标本时,常用桑弗利斯固定液。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ固定液的固定时间为,桑弗利斯液固定时间为4~6h。铬-锇酸醋酸固液(fixative强液铬酸水溶液3.1ml+锇酸的铬液醋酸水溶液30ml+蒸馏水11.9ml中液10%铬酸水溶液+锇的2%水溶液0.62ml+10%醋酸水溶液3ml蒸馏水弱液10%酸水溶液1.5ml+2%酸的铬(水液5ml+醋酸水溶液1ml+蒸馏水96.5ml此定液需现用现配。固定23~48h可用于各种植物组织的固定。9.Lichent1%酸水溶液15ml+冰酸5ml+福尔马林此固定液适用于固定丝状藻类和真
番水溶液番红溶蒸馏,溶至。用前过滤。番乙醇溶液番红溶入(或95%)酒精,溶至100ml。用前过滤固染液固绿溶95%酒精,定溶至。碘碘钾染液碘化钾溶入100ml蒸水,再加入碘,溶解后即可使用。苏Ⅲ(或Ⅳ)染液将苏丹Ⅲ或Ⅳ溶解50ml丙中,再加入酒精50ml改良苯品红染液原液A:将3g碱品红溶入100ml酒精,此液可长期保存。原液将加入到90ml5%苯酚水溶液中。原液:55mlB液入到的醋酸和6ml的的甲醛。染色液:取C液20ml加冰醋酸80ml充分混匀,再加入1g梨醇,放置14天后使用,可保存。间三酚染液将间苯三酚溶入酒精(若溶液呈黄色,即为失效中红染液将中性红溶入馏水,用时稀释倍钌染液将5~10mg钌溶入蒸水,现用现配。龙胆紫染液将龙胆紫溶入馏水。现常用结晶紫代替。必要时可将医用紫药水稀释后代用。铁酸洋红染液先将45%醋酸水溶液置入的形中沸移去火苗后慢慢地分多次加入洋红粉末(切记不可一次入全倒入后,再煮沸,并悬入一生锈的小铁钉于染液中,过后出,使染色剂略含铁质,以增加染色性能。静置12h后滤于棕色瓶中备用(置于避光处
苏木精染液苏木精的配方很多,常用的有如下种配方Ⅰ:苏木精水溶液苏木溶入煮的蒸馏水中,静置后使用。配方Ⅱ:代氏苏木精Delarfield’shaematoxylin)甲液:苏木精1g+无酒精6ml乙液:硫酸铝铵(铵矾)10g+蒸馏水丙液:甘油25ml+甲分别配制甲、乙两液,将甲液一滴滴地加入乙液中,充分搅拌后广口瓶中用纱布蒙住瓶口,置于温暖和光线充足处7~10天,再加入丙液,混匀后静置月,至颜色变为深紫色后,过滤备用,可长期保存。配方Ⅲ:爱氏苏木精Ehrlich’s)苏木精无或酒精50ml+蒸馏水50ml甘50ml+冰醋酸+硫铝矾3~5g。配制时,先将苏木精溶于酒精中,然后依次加入蒸馏水、甘油和醋酸,最后加入研细的钾矾边边搅拌,直瓶底出现钾矾结晶为止。混合后溶液颜色呈淡红色广口瓶中纱布封口然氧化1~2月颜色变深红色时即可过滤备用长期保存。席夫试剂(’sregent)将碱性品红溶入煮的蒸馏水,搅拌使其充分溶解。冷却至50℃时,过滤于棕色细口瓶中,加入盐。冷却至25℃左右,加入偏亚硫酸钾或钠Na2S2O5或K2S2O5荡使其解,密封瓶口,置于黑暗低温处过夜。次日检查,若染色液透明色或呈淡茶色,即可使用。若染色较深,可加入少量优质活性炭0.5~2g荡1min,置于℃冰箱中过夜,过滤使用。此液配好后,应塞紧瓶塞,外包黑纸,贮藏于冰箱中。硫堇染液将硫粉末,溶于100ml馏水中,即可使用。使用此液时。需用微碱性自来水封片或用水液封片,能产生多色反应。亚甲基蓝染液亚甲蓝溶入蒸馏水可。詹纳斯绿B(JanusgreenB)染液詹纳斯绿溶入蒸馏水配饱和水溶液时需稀释稀释倍数应视材料而异。苏木精-曙红(HE)染液
曙红(性染料,为最优良的动物细胞染料,与苏精配合使用(复染)对动物组织进行对比染色。苏木精的染液的配方同上。曙红有以下配制方法:配方Ⅰ:曙红+酒精配方Ⅱ:曙红+蒸水100ml配方Ⅲ:曙红+酒精蒸馏水75ml18蛋白胶亦称梅氏蛋白的制作将鸡蛋一个打破让蛋清流入烧杯内筷子充分条大雪花状泡沫后它用双层纱布过滤到量筒中经小时或一夜,过出透明的蛋白液,此时再加入等量的甘油,稍稍振摇使两者混合,最后加入麝香草酚(1:100做防腐作用,可保存几个月到一年(4℃冰箱中载玻片和盖玻片的清洗方法新载玻片的洗涤可分别将载玻片逐片投入到洗液中浸泡
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