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文档简介

细胞生物学实验心得一、关于动植物细胞染色体标本的制备（一）取材有丝分裂：植物根尖、茎尖；动物骨髓细胞、羽髓细胞、培养的血细胞等减数分裂：植物花粉、动物精巢等（二）材料固定目的：（1）迅速杀死细胞，防治细胞自溶、腐败；（2）使细胞中的蛋白质、脂肪、糖、酶等成分转变为不溶性物质，以保持生前的形态。（3）利于染色。常用固定液：卡诺氏固定液，用于固定染色体标本的配方为CarnoyⅠ（甲醇：冰醋酸＝1：1）使用方法：15－20倍于固定材料的固定液固定数小时至过夜（三）材料保存固定好的组织可长期保存于70％酒精中（四）染色组织压片染色体制备常用染液：醋酸洋红染液、改良苯酚（石碳酸）品红染液、龙胆紫染液细胞悬液滴片常用染液：吉姆萨（Giemsa）染液组织整染技巧：切碎染染液使用注意龙胆紫染染色体时染色时间要短（不超过1分钟），并且最好加水分色吉姆萨染液只能用于干燥的滴片标本，染色时加液要多或扣染，染色结束冲洗时要带染液一起冲洗（五）压片技巧三步曲：切、敲、压水绵（一种藻类）涉及问题

1、选择性透性是活细胞的特性2、造成质壁分离的机制？3、质壁分离实验可用葡萄糖或氯化钠做吗？4、与质壁分离程度有关的主要因素？不透膜的溶质分子数（二）计数板上标识数目含义1/400mm2：中间大方格共有400个小方格，每小格面积为1/400mm20.1mm：计数板底部到盖玻片的高度（四）细胞悬液密度计算计两大格的计算方式：细胞密度（个/ml）＝（2大格细胞总数/2）×104×稀释倍数16格×25格的血球计数板计算公式：细胞数／ml=4中格内细胞个数和/4×16×104×稀释倍数25格x16格的血球计数板计算公式：细胞数／ml=5中格内细胞个数和/5×25×104×稀释倍数四、关于细胞涂片制备材料：单细胞悬液涂片易出现问题：太厚或太薄不便观察；动物细胞带水太多缓慢干燥引起失水解决方法：用样减少；用固定液；用抗凝剂后离心五、关于淀粉染色染液：碘-碘化钾染液。配法：取碘化钾3克，溶于100毫升蒸馏水，加热使之溶解,然后加入1克结晶碘溶解后，放于棕色瓶中保存。使

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