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12023名词解释〔10个〕生物技术药物〔biotechnologydurg,biotechdurg〕:指承受DNA重组技术或类药物。Monoclnalantibody:单克隆抗体,是体内或培育的一个识别单一抗原表位的Bengineer:发酵工程,将微生物、生物化学和化学工程学的根本工业原料与工业产品并供给效劳的一种技术体系,又称微生物工程。感受态细胞〔competentcell〕:理化方法诱导细胞,使其处于最适摄取和容DNA抗体全人源化的目的。模拟酶:依据酶的作用原理,用各种方法人为制造的具有酶性质的催化剂。抗体酶,又称催化抗体,是一类免疫系统产生的、具有催化活性的抗体,具有抗体的高度选择性和酶的高度催化力量。Affinitychromatography:亲和层析,利用固定化配基与目的的蛋白之间特异的生物亲和作用进展吸附分别的技术。性的免疫应答,到达治疗或防止疾病恶化的疫苗。Adjuvant:佐剂,又称非特异性免疫增生剂。本身不具抗原性,但同抗原一起或预先注射到机体内能增加免疫原性〔见抗原〕或转变免疫反响类型。11.Geneticallyengineeredantibodies:gAb,基因工程抗体,又称重组抗体、工工改造和重装配,经转染适当的受体细胞所表达的抗体分子。12.DNADNA3’-OHDNA5’-PDNA13.动物细胞工程制药:SubunitVaccine:亚单位疫苗,利用微生物的某种外表构造〔抗原〕制成能诱发机体产生抗体的疫苗。喷射式反响器〔Projectionalreactor,PR〕:利用高压蒸汽的喷射作用,实现酶与底物的混合,进展高温短时催化反响的一种反响器。共价键偶联到蛋白质的技术。贴壁细胞〔adherentcells〕;这类细胞的生长必需有可以贴附的支持物外表,细胞依靠自身分泌的或培育基中供给的贴附因子才能在该外表上生长,生殖。18.Genetherapy:基因治疗,将外源正常的或者有治疗有治疗作用的基因导入靶19.表达载体(Expressionvectors):表达载体含强启动子,外源基因在启动子掌握下转录,并表达外源蛋白。20.酶的固定化〔enzymeimmobilization〕:承受各种方法将酶与水不溶性的载体结合,制备固定化酶的过程。问答题〔7个〕基因工程制药过程中,猎取目的基因常用的方法有哪些?需要知道目的基因的核苷酸序列或其编码产物的氨基酸残基序列②PCR法:可在体外特异性的扩增目的基因的片段,引入适宜的酶切位点和标签③cDNA文库法:包含着特定组织和细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集,便于克隆和大量扩增的构造。④基因组DNA某一特定生物体全部基因组DNA序列的随机克隆群体的集DNA片段的形式贮存了全部基因组DNA争论基因组构造功能。动物细胞生物反响器的主要操作模式有哪些?①分批式操作;②补料-分批操作;③半连续式操作;④灌流式操作;⑤连续式操作干扰素在使用过程中消灭的问题提及选择PEG修饰剂要考虑的因素。存在问题:①半衰期较短,需要隔日注射的问题,给患者用药带来了不便;②副反响:发热、流感样病症、骨髓抑制、精神神经系统;③长期使用易产生耐药性。选择PEG修饰剂要考虑的因素②与干扰素发生偶合反响的活性和选择性,以及修饰后形成的化学键的稳定性。③修饰位点的选择和工艺优化物理吸附法和共价结合的概念,试比较两种酶固定方法的优缺点。①物理吸附法包括范德华力、氢键、疏水作用、静电作用等。优点:条件温顺,工艺简便、载体选择性范围大,对酶催化活性影响小缺点:PH、温度、离子强度等条件都易使酶从载体脱弱并污染催化反响物。②共价结合法定义:酶以共价结合于载体外表的固定方法,马上酶分子上非活性局部功能团与载体外表反响基团进展共价结合的方法。结合比较结实,有良好的稳定性及重复使用性。缺点:反响猛烈,固化酶活性损失较严峻。微生物发酵生产药物种类有哪些?①抗生素类:青霉素②氨基酸类:单个氨基酸制剂、复方氨基酸制剂③核苷酸类:AMP、ATPA④维生素:Vc、V和V、VB2⑤甾体类激素:

B12 D2⑥多糖类:透亮质酸、右旋糖酐⑦治疗酶及酶抑制剂:蛋白酶、脂肪酶简述减、灭活疫苗和基因工程亚单位疫苗的异同点。有毒力返祖现象,污染环境,免疫缺陷者不适用,的免疫原性和安全性,稳定性好。将外源性病原体特异抗原编码基因转入非致病性微生物内力返祖现象,污染环境,免疫缺陷者不适用ChimericAntigenReceptorT〔CAR-T〕细胞免疫疗法的根本原理。CAR-T:嵌合抗原受体T细胞免疫疗法,利用病人自身的免疫细胞来去除癌细胞T瘤抗原特异性CARTCAR-TTT患者的体内,让其发挥特异的抗癌治癌功能。简述基因工程制药的根本流程①目的基因的获得;②表达载体的选择;③目的基因与载体的连接;④重组DNA蛋白产品的纯化;⑧重组蛋白制剂的生产。简述原核细胞表达体系的特点优点:①宿主菌遗传背景清楚,商品化菌种齐全,便利购置;②原核细胞操作简便、生殖快和周期短;③大规模生产本钱低,产量较高;缺点:不能糖基化,无修饰。培育动物细胞时需要关注哪些培育条件?①培育温度:37℃±0.5,过高细胞退变甚至死亡,过低降低代谢和生产力量。②PH:7.2-7.4,过高或过低对细胞生长不利,甚至会引起细胞死亡。③通氧量:不同的细胞对氧和CO的比例要求不完全一样。2④防止污染:防止化学物质、微生物、生物活性物质污染,对细胞产生损伤。清。⑥渗透压:小鼠细胞:320mOsm/L,大多数细胞:290-320mOsm/L。的缘由。概念:但凡通过基因引入或去除而使蛋白质一级构造发生转变的过程物稳定性增加。缘由:相对分子量↓,降解速度↓,半衰期↑;②修饰剂屏蔽作用,不易受各种蛋白酶攻击,降解速度↓,稳定性↑,半衰期↑;③修饰剂能掩盖蛋白质外表的抗原打算簇,使蛋白质不能与各种细胞外表受体,不被机体的免疫系统识别,避开了相应抗体的产生,降低蛋白质的免疫原性;④修饰剂与蛋白质偶联后能赐予其优良的理化性质和溶解性能。试述单克隆抗体技术的根本原理及根本过程。原理:基于动物细胞融合技术,实现骨髓瘤细胞和B细胞的融合,形成的杂交瘤B体的力量。根本过程:制备抗原、免疫动物、B细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞、筛〔阳性细胞〕28kD,pI3.9-4.550%1080℃条件下理化性质10%、PH3.5〔纯90%〕。试剂等未知信息可自行假设,要求工艺大致合理,重点说明每一步设计的原理和目的。①将鸡蛋清搅拌均匀,过滤,去除脐带和蛋壳②加10%三氯乙酸,用NaOH和HCL调整PH=3.5,离心,取上清液。〔鸡卵黏蛋要杂志鸡卵清蛋白质绝大局部被沉淀出来。〕③过滤,去除上清液中脂类物质及其他不溶物;④加3倍体积的50〔鸡卵黏蛋白在50%丙酮和10%三氯乙酸溶液中均匀不发生沉淀,在80℃条件下理化性质保持稳定,应用萃取的原理将鸡卵黏蛋白转移到丙酮中,进一步提纯〕⑤使用旋转蒸发仪,蒸干除去丙酮,收集鸡卵黏蛋白。〔丙酮沸点低,易挥发,80℃条件下理化性质保持稳定〕现代酶工程的争论内容①酶的生产:选育优良菌株、构建基因工程菌株、优化发酵条件提高酶的产量。②酶的分别纯化:是当前生物技术“后处理工艺”的核心③酶和细胞的固定化:全面提高酶的工业价值④酶的修饰及分子改造:提高酶的应用价值⑤非水相催化:提高催化活性又称酶电极,由感受器〔固定化酶〕和换能器〔离子选择性电极〕做组成的一种分析装置,可用于测定浓度。⑦酶反响器:⑧抗体酶、人工酶和模拟酶:结合抗体的高度专一性和酶的高效催化力量⑨酶技术的应用游离酶相比,固化酶有何优缺点。优点:②可以在较长时

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