临床生化检验基础知识培训

临床生化检验基础知识培训一、生化基础知识二、生化仪器基础知识三、部分生化项目的临床意义本文档仅供生化应用工程师参考阅览，更多专业知识请查阅后附参考文献。肖自强2014-3-19生化基础知识生化诊断试剂盒为由一定的化学品或者酶类组成的多成分混合试剂（Reagent）,最终以水溶液的方式与待测物发生一系列化学或者生化反应，通过生成物或反应物中某物质的吸光度变化,测量待检测物中某种特定物质的含量。生化诊断试剂用于检测样本,包括：人体血清（主要）、血浆及尿液中的各种酶类和代谢产物,用于预测,诊断以及治疗监测,协助临床医生诊治疾病提供数据参考。按功能分为：肝功、血脂、肾功、心肌、代谢、免疫&风湿、离子&其他。试剂性能评价指标：试剂外观2批间差3准确度4精密度5线性（灵敏度）6抗干扰能力（特异性）7稳定性试剂检测原理（朗伯比尔定律）：A=Kbc式中，A为吸光度;K为吸收系数，是与入射辐射的波长及吸收物质的性质有关的常数;b为液层厚度，单位为cm;c为吸收物质的浓度。当浓度的单位为mol/L时，K的单位为L/mokcm，称为摩尔吸收系数，通常用W表示。摩尔吸收系数W表示物质对某一波长的辐射的吸收特性。S愈大，表示物质对某波长辐射的吸收力愈强,因而分光光度法测定的灵敏度就愈高.理论值与实测值偏差的解释：实测值偏离了朗伯比尔定律。偏离Lambert-Beer定律的因素：1复合光对Beer定律的偏离：吸收定律要求入射光为单色光，而分光光度计单色光的纯度主要决定于色散元件及光路设计,即使高精度的仪器,也得不到纯单色光，而是波长宽度的复合光，其结果导致偏离LambertBeer定律。2杂散光的影响：杂散光（straylight）是进入检测器待测波长以外的光。主要来源于仪器色散元件表面的散射、单色器内壁尘埃等。3狭缝宽度的影响：单色器设有进、出口狭缝,狭缝愈窄,单色光愈纯,吸光度增加,但辐射能减小,对弱吸收带的测量有一定影响。定性分析时,为提高分辨能力常采用较小的狭缝,而定量分析时,在灵敏度允许的情况下,宜采用较大狭缝。当出、入射狭缝宽度相等时,狭缝宽度引起的误差最小。4非吸收作用引起的误差：.散射效应：光吸收定律只适用于均匀的吸收体系,如待测溶液是混浊的,当光通过时,将产生散射效应。其结果使光通过吸收物质的光程不固定,散射光的一部分和透射光一起进入检测器,导致偏离Beer定律。因此,免疫比浊法常用多点校准来做标准曲线。.荧光效应：分子吸收辐射能后产生的激发态分子以重新发射辐射的方式回到基态而发射荧光。由于多数显色体系荧光效应很小，而且荧光发射是各向同性，只有一部分沿透射光方向进入检测器，使测量吸光度偏低。一般情况下，荧光效应对分光光度法产生的影响较小。目前，多数光度计设有两个样品室，对有荧光试样可置于离检测器较远的样品室，或在光路中插入适当的滤光片以消除荧光效应。5测定过程中产生的误差：化学反应引起的误差，人为的误差等，在此不作详细解释。1.7生化测定方法：临床化学自动分析仪所涉及的测定方法包括终点测定法、连续监测法、固定时间法等。1.8.1生化分析基本术语概述：1双波长：由主波长和副波长构成的两个波长，测定样品采用双波长可以消除对实验的影响。主波长是指测定某物质时，生成的产物颜色对光吸收的特有波长。副波长是指测定某物质时，为消除其他干扰物质在主波长造成测定干扰所设定的波长。2反应杯空白：在特定波长下，光通过以蒸馏水或空气为反应体系所测得的吸光度值。3试剂空白：在各特定波长下，光通过以蒸馏水或生理盐水为样品和相应测定项目试剂构成的反应体系所测得的吸光度值。4样品空白：在各特定波长下，光通过以生物样品和相应测定项目不含有引起反应的一种或多种成分的试剂构成的反应体系所测得的吸光度值;或由生物样品和相应测定项目试剂构成的反应体系产生反应最初时间所测得的吸光度值。5终点法：这是最常用的分析法。因为该法常有标准液，因此又称比例终点法，是经过一定反应时间后，当反应达到平衡(终点)时做到的一点分析法。一般是在一定温度下，试剂与样品经过一定反应时间，被送人比色系统，然后检测吸光度的变化，由微机系统处理计算和打印显示出结果。其中又分一点终点和两点终点法。6续监测法：也叫速率法，此法通过测定酶所催化的反应速度，间接计算出酶的含量，称酶活性测定法。在酶促反应过程中，不是任何时期的反应速率都和酶浓度成正比。当酶促反应刚一开始，底物处于过量状态，酶与底物开始结合，生成复合物(ES),底物浓度开始下降，此时产物尚未生成。当复合物(ES)分解，生成产物(P),酶促反应速度急骤上升，经过很短的作用时间后，产物的生成量或底物的减少量与反应时间成线性关系，反应速度保持恒定不变，这一时期称为零级反应期。随酶促反应继续进行，底物不断消耗，酶促反应条件逐渐变化，酶促反应速度逐渐减慢，产物生成或底物减少量的变化曲线遂趋平坦，这一时期称为一级反应期。此时的反应速率常常不能准确反应酶的含量。因此其测光点一般要求取在反应达到平衡前。7两点速率法：两点速率法也叫固定时间法，对测定及标准采用两个时间点测定。采用此方法的如肌酐（苦味酸法），目前多数自动分析仪还是用Jaffe氏反应测肌酐，即肌酐能同碱性苦味酸盐生成红橙色化合物，这个反应特异性不高，因为维生素C、丙酣酸、丙酣、葡萄糖、乙酷醋酸、果糖、氨基马尿酸、蛋白质及其他反应产物亦能与碱性苦位酸盐生成红色化合物，血清中的这些假肌酐约含25%。但真性肌酐与苦味酸的反应为快反应，假肌酐为慢反应，因此测试时测试时间一般在样品与碱性苦味酸试剂混合后25秒和1分25秒在500nm处测吸光度变化。两时间点的吸光度变化之差，则为特异反应肌酐浓度。8普通免疫比浊与胶乳增强免疫比浊法：普通免疫比浊法是抗原与相应的抗体直接结合形成的免疫复合物，在反应液中具有一定的浊度，可由一般分光光度法进行透射比浊（ ）测定，可用于某些蛋白质和药物浓度等的测定。该法须做多点校准，再经非线性回归，求出抗原或抗体的含量。胶乳增强免疫比浊法是将抗体吸附在大小适中、均匀一致的胶乳颗粒上，制成致敏的胶乳颗粒，当遇到相应抗原时，发生交联反应，形成抗原抗体复合物，胶乳颗粒发生凝集。单个胶乳颗粒在入射光波长之内并不阻碍光线透过，两个及其两个以上胶乳颗粒凝聚时则使透过的光减少，其减少的程度与胶乳颗粒凝聚的程度呈正比，即与待测抗原量呈正比，由此可检测样本中的特定抗原含量。该法比普通免疫比浊敏感度高，试剂稳定，个体免疫复合物对结果影响也小，因此结果稳定、可靠，特异性好，精确度高。9参考物的量值溯源性:通过一条具有规定不确定度的不间断的比较链,使测量结果或测量标准的值能够与规定的参考标准,通常是与国家标准或国际标准联系起来的特性。10检测限：是指检测系统可检测出的最低分析物浓度。又称分析灵敏度。灵敏度与线性范围：灵敏度与线性范围有着紧密联系，这也是跟生化仪的性能有关。灵敏度与线性范围的取舍就要根据其医学决定水平而定。一般仪器能测的光密度值最大在350。0假0设谋项目的医学决定水平在0~1，0如0果1个单位浓度变化能引起仪器吸光度响应量为10，0那0么它能测的浓度范围为0~3，可5以看出，虽然其灵敏度很高，但在其检测范围没有达到其医学决定水平，即线性范围太窄。相反，如果1个单位浓度变化能引起仪器吸光度响应量为10，0那么它能测的浓度范围为0~3，5这0个线性范围是可以的。因此，灵敏度与线性的评价，要根据其医学决定水平而定。.常9用校准方法：终点法或两点速率法，必须通过使用标准液，建立一条标准曲线；速率法，采用标准液校正可消除系统误差，也可直接输入Factor值。校准类型：空白定标：以水做标准液，消除试剂本身对测试的干扰；（酶类）两点定标：以水作为零点，标准液作为另一点，建立标准曲线；（Y=AX+B）多点定标：两个以上的标准液建立一条标准曲线；（LOGIT-LOG）参0考区间与医学决定水平：临床实验室检验结果对被检验者低正常还是异常，有何临床意义，如何用检验结果协助临床医生诊断和治疗，这就涉及到参考区间和医学决定水平了。参考区间大多是采用正态分布的原理制定，以的分布区间（一土）即为参考区间的上、下限，少数用百分位数来制定参考区间。不论采用什么方法，总有少数正常人的测定值落在异常范围内。因此，假性结果是避免不了的。当结果接近上限或下限时，不要轻易下正常或有病的结论，要根据被测者的其他表征综合判断或过一段时间复查后，再做分析。医学决定水平是由 于年首先提出的。是指临床上必须采取措施时的检测水平。决定性水平是一个阀值，高于该值或低于该值，应决定对患者采取适当的治疗措施。医学决定水平可在疾病诊断中起着排除或确认的作用，对某些疾病进行分级或分类，或愈后做出估计，来提醒医生在临床上做出相应的处理方式。医学决定水平与参考区间的区别在于，它不仅对健康人的数值进行研究，以决定健康人的范围，同时还对有关疾病的不同病情的数据进行研究，以定出不同的决定性限值，以引导医生采取不同的临床措施。它的应用可以克服只使用参考范围的缺点，使一个检验结果对病人能起到提供诊断，处理依据的作用。酶1法检测基本知识：酶是由活细胞产生并能在体内起催化作用的，一类特殊蛋白质。体内几乎所有的代谢反应都是在不同的酶催化下进行的。酶的催化效率高，对底物有严格的选择性，酶非常不稳定，酶浓度的变化是许多疾病的敏感指针，这是建立和发展诊断酶学的依据。用酶作试剂（工具酶）测定非酶物质具有效率高、特异及易于实现自动分析的特点，是目前临床生化检验的主流方法。酶促反应速度的因素：包括酶的浓度、底物的浓度、激活剂与抑制剂、和温度等。在研究某一因素对酶促反应速度的影响时，反应系统中其他因素不变。酶促反应中所指速度是初速度，因为这时的反应速度与酶浓度成正比，可以避免产物及其他因素对反应速度的影响。在建立定量测定酶活性的方法时，需要研究酶促反应的速度及影响此速度的因素，通常称之为反应动力学。酶.活2力测定酶的含量很低，除免疫学方法外，不能直接测定其含量，只能测其催化反应过程中一定时间内物质变化的量，即酶促反应速率，或称酶的活力。要保证只有待测酶的量影响反应速率，其他各种影响反应速率的因素都在严格控制之下，并保持各测定间的一致性。一）酶促反应的过程通过测定底物浓度的下降，或测定产物浓度的上升，可以追踪酶反应过程中底物转变为产物的过程。通常多测定产物的形成，因为测定产物从零或者从低浓度的增加，比测定高浓度底物的下降更可靠。典型的酶反应过程曲线分为几个时期。紧随着加人血清或底物启动反应后，在出现明显的变化前为延迟期;此期从几秒到几分钟。随后是底物和产物变化与时间成直线的时期，形成产物的速率恒定，此时期的速率为"反应初速度"。此期底物也下降，但实际上反应速度与底物浓无关，对底物浓度而言，酶促反应实际上是零级反应。反应曲线的直线期时间长短相差悬殊。紧跟着是反应速率持续下降，进入速度依赖于底物浓度的一级反应期。在这一期中，底物浓度下降，逆反应增加，抑制性产物蓄积，乃至酶本身进行性的灭活等因素也起作用。最后，当底物起尽或达到平衡时，反应停止。在零级反应期中，测定一定时间内形成产物的量，是以此期中速率维持恒定为条件。否则表观的反应速率将不正比于酶浓度。也就是选择的监测点必须在反应速率恒定区（零级反应期）。在正常测定中，为了能缩短延迟期和延长线性期，不仅要适量的底物浓度，还要在试剂中加入某些激活剂和其他的辅助因子。以改善反应进程曲线。）固定时间法和连续监测法在我国临床实验室中，目前测定酶活性的方法，已从手工操作的固定时间法及两点测定法过渡到连续监测法。固定时间法在反应过程中测定一点的吸光度;两点测定法是在反应开始及反应经一定时间后，分别测两点的吸光度，根据两点间吸光度的差值，推算酶的活力。固定时间法和两点测定法都是在酶和底物孵育一段时间后测定总的变化。两点测定法也应属于酶动力学测定方法，但"动力学测定法"这一术语，习惯上仅指多点测定的动力学方法，即所谓速率法或连续监测法，不论用手工法或自动法。固定时间法和两点测定法可能会有几种误差:酶活力非常高的样品，由于底物消耗速度快，反应很快呈现迟缓或停止；有一些反应类型延迟期长；某些标本的反应曲线可能是非线性的；活力高的标本，超出了限定的活力测定范围，若稀释标本可能会引起催化活力不成比例的变化。由于光度计及方法学的改进，可以缩短孵育时间，增加酶活力测定范围，缩短延迟期，增加线性期，使固定时间法仍发挥重要作用；尤其在中小医院实险室中更有实用价值，甚至一部分生化分析仪也采用了固定时间法。11酶.法3分析酶法分析即酶作为分析试剂，有利于提高测定结果的特异性;不需要先将测定的物质分离和提纯;可以直接分析血清这样复杂的濡合物。具有绝对特异性的酶，即只作用于某一种物质的酶，特别适合分析用。尿酸氧化酶、尿素酶、葡萄糖氧化酶特异性高。但实际上不能都如此。因此，必须了解酶对底物的特异性，从而预料可能发生的干扰反应并设法纠正。在以酶作分析试剂测定某-物质时，也可用偶联反应;而且偶联反应的特异性可以增加反应全过程的特异性。如用己糖激酶 法）葡萄糖，也作用于果糖产生相应的磷酸醋但偶联的指示反应是 。它特异地催化葡萄糖磷酸的反应，用此酶测定己糖激酶催化反应的产物，明显地提高了偶联系统的特异性。）传统的酶法分析非酶物质方法以酶作试剂进行分析的方法有两种。广泛应用的第一种方法，是使反应进行到完全，使全部底物转变成产物，称"终点"法。这是最理想的分析类型。但是，在非理想的平衡时，底物远未完全转变。此时需增加酶或非酶的反应，以转变或捕获第一个反应的产物，使反应在所要求的方向上进行到完全。如用乳酸脱氢酶测定乳酸中，形成的丙酣酸，通过加入硫酸阱形成腺而捕获丙酣酸，使反应达到完全。第二种方法是动力学法，即间隔一定的时间测定底物的变化量（=速率）。由酶促反应进程曲线已知，开始为高底物浓度由酶催化的反应，首先服从零级反应，然后随着底物浓度减低，进入一级反应期。对于任何一级反应，反应开始后在一给定时间的底物浓度为是最初的底物浓度，是自然对数的底，是速率常数。在到的固定时间间隔中，底物浓度的变化量△ 与 的相互关系为△也即在一固定时间间隔中，底物浓度的变化量正比于底物的初浓度。这是一级反应的通性。对于酶的反应，当 《时，米氏方程简化为K为一级速度常数。在反应过程中的两个固定时间，测量与底物浓度性质相关的（如光吸收）的方法为"两点"动力学法。从理论上讲，这是用酶法测定底物的最准确的方法；但方法学上比平衡法要求高，所有影响反应速率的因素如、温度及酶量必须在两点分析中保持恒定，并准确定时。必须用标准液进行校正。为保证一级反应条件，底物浓度必须低至小于 。酶对底物的要高，以便测出较宽范围的底物浓度。为增加试剂酶的表现值，可引进竞争性抑制剂。此外，被测非酶物质作为酶促反应激活剂者，则用连续监测法，如无机离子钾和钙的酶法测定。酶循环法分析非酶物质酶循环法 ，是利用酶的底物特异性放大靶物质被测物）以提高灵敏度的测定方法。只循环靶物质，减少了样品存在的其他物质对测定的干扰，因此不需要对样品进行预处理或对靶物质进行提取，而且不需要特殊设备，是一种很有前途的测定技术。利用酶循环法测定的项目主要是总胆汁酸（）a二、生化仪器基础知识2.1检验科常见全自动生化分析仪：日立：7100、7170、7080、7180、7600,奥林巴斯：AU400、AU640、AU2700、AU5400贝克曼：CX3、4、5、7、9、LX20、DXC800,AU480,AU680,AU5800东芝：TBA-40、TBA-120雅培：2000、C8000、AEROSET拜尔：ADVIA1200、ADVIA1650、ADVIA24002.2下面简单介绍几个常用品牌的相关仪器性能•日立：现在各医院所用日立仪器的型号主要为7180、7600,除7080为31个测光点外，其余都为34点。以下为7180仪器主要性能介绍：分析速度：800个测定/小时（最大）,约4.5秒加样一次可分析项目：86项（带ISE的话，最大可达89项），计算项目8项样本量：1.5~35.0p1，0.1pl可调试剂量：20~270p1，印1可调总反应体积：120~300P1,奥林巴斯：奥林巴斯：AU400、AU640、AU2700、AU5400奥林巴斯生化仪已经被贝克曼收购，除AU400、AU640、AU2700、AU5400外，还有一款AU680，其操作界面为贝克曼公司设计，但主要性能跟以往的AU640基本保持光源灯：保质期750小时比色杯：20只X8组共160只，依据杯空白值进行更换测光系统：采用凹面蚀刻光栅的后分光、双波长测定方式12个波长：340、405、450、480、505、546、570、600、660、700、750、800nm稳定性高且可有效补偿样本混浊、溶血、黄疸及电源电压变动引发的干扰测定过程：全反应监测，10分钟测定34次吸光度值。15分钟测定53次吸光度值依据实验要求选择相应测光点的吸光度值计算结果样本容器：样本针有液面探测装置，可使用原始采血管离出血清后直接上机测定试剂：同一项目最多可加入四步试剂，两试剂舱位置各45个，温度5~15℃。

一致。测光点为27个，R2试剂在10~11点加入。以下为AU400/600/640等型号设参数需了解的仪器性能：Samplevol（样品量）：2~50,可以按0.5ul为单位增减。Reagent1vol（第一试剂量）：25-300,可以按1ul为单位增减。Dilvol（稀释液-吐水量）:一般用浓缩试剂时才用。Reagent2vol（第二试剂量）:25-300，可以按1为单位增减。Dilvol（稀释液-吐水量）:一般用浓缩试剂时才用。第二试剂是固定的10-11点之间加入的。测定波长共有13种：340,380,410,450,520,540,570,600,660,700,750,800nm。Method（方法学）共六种：End,Rate,Fixed;End1,Rate1,Fixed1。前三种与后三种的差别为：前三种是以试剂为空白的，后三种是以比色杯为空白的。Reaction（反应方向）：-，+。End与Fixed法不起作用，但是Rate法一定要输正确。Linearity（线性）:Fst，Lst，Rate法才输入，一般国产试剂30%；进口试剂:15%。No-Lag-Time：Rate法才输入，在读点期内，如果反应太快，超过线性（Linearity限）仪器会自动用线性比较好的那一段来计算。试剂空白OD限：Fst指的是0点，Lst指的是27点。只对Rate法有用，一般向下的反应，输0.9—2.5，向上的反应-2.0—0.8。下图显示屏幕上的基本显示模型Sample:Volume3-0uLDilution| 0疝Pre-DilutionRate:Reagents:RIVolumeISOuLDilution| 0uLMinODMaxODR2VolumeTerNo.Dihition0uLNo-Lat-TinieOnboardStabilitxPenod:\SelectfromlistdisplayedbySpacekeyorclickthemouse.ALARMCLEARReactionSlope:Wavelength:Method:Sec.MeasuringPoint1:FirstMeasuringPoint2:LincaritxReagentODLimir：DynamicRausu[end2JiRIRoudne(P)Paramder(AjAiixiliaryCM)Maintenance(UmerjlHogSample:Volume3-0uLDilution| 0疝Pre-DilutionRate:Reagents:RIVolumeISOuLDilution| 0uLMinODMaxODR2VolumeTerNo.Dihition0uLNo-Lat-TinieOnboardStabilitxPenod:\SelectfromlistdisplayedbySpacekeyorclickthemouse.ALARMCLEARReactionSlope:Wavelength:Method:Sec.MeasuringPoint1:FirstMeasuringPoint2:LincaritxReagentODLimir：DynamicRausu[end2JiRIRoudne(P)Paramder(AjAiixiliaryCM)Maintenance(UmerjlHog嬴05/13Z201346.GALB〜LXHF -ISECalculatedTests 〜LXHF -ISECalculatedTests 1iRange _L 1R1(R11)120uLRl-2■血R2(R2-1)-40uLType\onePri.600-0.100045.10000.001 (•贝克曼：CX3、4、5、7、9、LX20、DXC800,贝克曼仪器是作为急诊用的优先选择仪器，其有较高的准确度，精密度和稳定性，抗交叉污染也是一流的，但不适合常规大量样本的检测，其试剂消耗量也是现有仪器中比较大的。贝克曼仪器波长数为10个，340,380,410,470,520,560,600,650,670,700nm。监测时间不是以周期（点）计，而是以秒来计，每8s测一次吸光度。加样时间为第0s,第二次灌注时间为-180s，或9~738s。贝克曼仪器必须用两个波长测定，否则仪器不运行，在设参数时必须符合这一规律。

•拜尔（西门子）:，2测4试0速0度小时，比色法时，电解质60测0试/小时。其中有波长：个。测试方法：终点法（）、速率法（）、两点速率法（）及多点均相免疫分析。微量取样技术:所有的样本按 比例进行预稀释处理（样品 生理盐水）一般可作15个项目分析。微量技术加试剂保证每测试平均试剂体积为80U1-120U1，理论上1mL的试剂能做12.5个测试，最低也能做到8个测试。体现了其最大优点就是省试剂。■RequestCalibrationMairit.微量技术加试剂保证每测试平均试剂体积为80U1-120U1，理论上1mL的试剂能做12.5个测试，最低也能做到8个测试。体现了其最大优点就是省试剂。■RequestCalibrationMairit.ReagentBultipointCaiSetting；二J"JDPPprobedidnotdetectsampleOae-PomtCalSettingVpIPovnrStandnrdj(processingReac1'1.0000.tingI一］2.3不同型号的生化仪每毫升试剂测试数是不一样的，以下是各品牌的理论测试数：■7170：180-380ul5.5T/ml■7060：250-500ul4T/ml■AU400:150-350ul6.6T/ml■BECKMAN:200-330ul5T/ml■TBA-40:120-360ul8.3T/ml■TBA-120:80-360ul12.5T/ml■ADVIA2400：80-120ul12.5T/ml■进口仪器4-5人份/毫升；国产仪器3-4人份/毫升三、各生化项目的临床意义及其检测原理：3.肝1功能测定项目（15项）血清总胆汁酸B胆汁酸是由胆固醇在肝脏中分解代谢所生成的，肝胆、肠、门静脉都参与胆汁酸的自主循环过程。胆汁酸主要存在于肠肝循环系统并通过再循环起一定的保护作用。只有一少部分胆汁酸进入外周循环。促进胆汁酸肝肠循环的动力是肝细胞的转运系统素吸收胆汁酸并将其分泌入胆汁，经胆囊诱导的胆囊收缩，小肠的推进蠕动，回肠粘膜的主动运输从血液经门静脉流入。血清中胆汁酸的水平是反映肝脏损伤的重要指征，一旦肝细胞发生病变，血中胆汁酸浓度极易升高。急性肝炎、慢活肝、肝硬化、肝癌， 结果明显升高。与比较，急性肝炎、慢性活肝、都较敏感，但肝硬化、肝癌两种结果差异明显：阳性率高达5而阳性率仅为0因此， 测定用于监测慢性肝病价值很大。其测定方法简单，是一项很具实用价值的肝功能诊断指标。检验原理血清中的胆汁酸（a羟类固醇）会被a羟类固醇脱氢酶（a ）及0硫烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型 特异性地氧化，生成酮类固醇，同时被还原成B硫烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原型 -新生成的酮类固醇在a羟类固醇脱氢酶（a）及|3烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原型 存在下，还原成胆汁酸，同时氧化成B烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型（D通过酶的循环反应，微量胆汁酸的量被放大。在处测定 吸光度的变化值，可求得血清中胆汁酸的含量。谷丙转氨酶/丙氨酸氨基转移酶 、又称谷丙转氨酶，主要存在于组织细胞中，正常状况下只有极少量释放入血液中，所以此酶在血清中活性很低。当组织发生病变时，组织细胞中就大量释放于血液，使血清中该酶的活性升高。血清中主要来源于肝脏，各种肝炎活动期、肝癌、肝硬化和阻塞性黄疸时的活性显著增高，心肌梗塞时的活性仅有轻度增高。检验原理:本法为推荐的测定丙氨酸氨基转移酶的动力学方法，在速率法测定中酶偶联反应为：丙氨酸酮戊二酸—丙酮酸谷氨酸丙酮酸 ―乳酸波长下检测 的氧化速率，吸光度的下降速率与 活性成正比。谷草转氨酶 :天门冬氨酸氨基转移酶 ，又称谷草转氨酶，此酶在组织中分布很广，如心肌、横纹肌、肝脏，其中心肌含量最高。心肌梗死后6-1小2时开始增高，小时达最高值， 天恢复正常。肝炎时， 和一样明显升高，急性期由于清除率较慢，往往大于活力。恢复时也是较慢， 比值小于1如转氨酶升高，且比值大于常说明有慢性肝炎的可能，肝硬化则比值明显升高。因此，活性的增高意味着心肌或肝细胞损害的发生。检验原理本法为 推荐的测定天门冬氨酸氨基转移酶的动力学方法，在速率法测定中酶偶联反应为：天门冬氨酸a酮戊二酸草酰乙酸 谷氨酸草酰乙酸 苹果酸Y谷氨酰转移酶Y：Y主要用于诊断肝胆疾病。Y明显增高见于原发继发性肝癌、阻塞性黄疸、胆汁性肝硬化、胰头癌、肝外胆道癌等。轻度或中度增高见于传染性肝炎、肝硬化、胰腺炎以及嗜酒和长期服用某些药物（如苯巴比妥）者，在解释酶活性增高的原因时应全面考虑。检验原理 谷氨酰羧基硝基苯胺双甘氨肽」 谷氨酰双甘氨肽氨基硝基苯甲酸碱性磷酸酶 ：骨骼系统疾患如纤维骨炎、变形性骨炎、成骨不全症、骨质软化症、佝偻病、转移性骨瘤和骨折愈合期等可使 活性增高。肝胆疾患如阻塞性黄疸、急性或慢性黄疸型肝炎、肝癌和肝脓肿等，以及甲状腺功能亢进、妊娠后期等均可使 活性增高。而重症慢性肾炎、儿童甲状腺功能不全、贫血、恶病质等则使 活性下降。检验原理 推荐的标准化测定方法，其原理是以磷酸对硝基苯酚一为底物，氨基 甲基 丙酮 为磷酸酰基的受体物质，增进酶促反应速率。一在碱性溶液中为无色，在催化下，一分裂出磷酸基团，生起游离的对硝基苯酚一，后者在碱性溶液中转变成醌式结构，呈现较深的黄色。在波长 处监测吸光度增高速率，计算活性单位。白蛋白：血清白蛋白在肝脏合成。在营养不良的病人中可看到很低水平的血浆白蛋白。另外，血液稀释或由于营养不良，肝脏疾病使合成白蛋白能力下降，或由于肾病综合症、蛋白丢失性肠道疾病等均可导致低白蛋白。高白蛋白血症则常见于脱水或血液浓缩。检验原理在 的酸性条件下，白蛋白作为一种阳离子，结合阴离子染料溴甲酚绿,生成蓝绿色复合物，在波长 处有吸收峰。其吸光度与白蛋白浓度成正比，与同样处理的白蛋白标准比较，可求得血清中白蛋白的含量。总蛋白：血液中水分增加，营养不良和消耗增加，肝脏疾病以及肾病综合症等均可导致总蛋白水平下降。脱水症及免疫球蛋白增加的疾病则可使血清总蛋白水平增高。检验原理:在碱性溶液中，血清蛋白与二价铜离子反应生成紫色络合物（双缩脲反应），颜色深浅与总蛋白的浓度成正比例关系。总胆红素T直接胆红素：胆红素与重氮化对氨基苯磺酸（）反应生成一种红色偶氮染料，在5波长处染料的吸光度与样本中胆红素的浓度成正比。水溶性胆红素葡萄糖醛酸直接与重氮化对氨基苯磺酸反应，而白蛋白结合的间接胆红素只有在促进剂作用下才能反应，总胆红素=直接胆红素+间接胆红素。检验原理胆红素与重氮化对氨基苯磺酸（）反应生成一种红色偶氮染料，在5波长处染料的吸光度与样本中胆红素的浓度成正比。水溶性胆红素葡萄糖醛酸直接与重氮化对氨基苯磺酸反应，而白蛋白结合的间接胆红素只有在促进剂作用下才能反应，总胆红素=直接胆红素+间接胆红素。a岩藻糖苷酶：是溶酶体酶，其作用是分解岩藻糖甘油结合物。血清a岩藻糖苷酶（ 是肝细胞肝癌诊断的一个新标记物。在甲胎蛋白（ 阴性的原发性肝癌病例中，大约有0〜%出现阳性结果，而且小细胞肝癌病人血清的阳性率高于。同时测定与，可使原发性肝癌的阳性检出率从单独测定的％左右提高到〜4。因此，检测血清活性，对肝癌的早期诊断和肝癌高发人群的筛查均有重要意义。检验原理氯硝基苯酚a岩藻吡喃糖苷在酶的水解作用下生成氯硝基苯酚和a岩藻糖，可用速率法监测氯硝基苯酚，5波长处的吸光率的上升速率。反应速率与a岩藻糖苷酶的含量成正比，可计算出样本中a岩藻糖苷酶的活力。5‘核苷酸5‘NT：5'NT是一种特殊的水解酶。能特异性的将次黄嘌呤核苷酸水解为次黄苷和磷酸，此酶广泛分布在人体和动物的组织中，5’NT经肝细胞膜进入胆汁，随之进入血清中，是检测肝胆疾病的重要指标。肝内外胆管阻塞，肝癌和伴随循环转移的乳房切除术后的病人此酶升高明显。诊断肝胆疾病和肝癌，5’NT较其他酶类更敏感。检验原理：次黄嘌呤核苷酸 5'NT次黄苷磷酸—次黄苷磷酸核苷酸磷酸化酶次黄嘌呤核酸磷酸次黄嘌呤 黄O吟氧化酶尿酸—T 红色醌类—腺苷脱氨酶D 活性是反映肝损伤的敏感指标，可作为肝功能常规检查项目之一，与或Y 等组成肝酶谱，能较全面地反映肝脏病的酶学改变。血清中活性的测定可①用于判断急性肝损伤及残留病变；②协助诊断慢性肝病；③有助于肝纤维化的诊断④有助于黄疸的鉴别： 在良恶性难辨的渗出液鉴别诊断上有重要价值。结核性胸腹水活性显著增高，癌性胸腹水不增高。⑤此外，脑脊液检测可作为中枢神经系统疾病诊断和鉴别诊断的重要指标，结核性脑膜炎活性显著增高，病毒性脑炎不增高，颅内肿瘤及中枢神经系统白血病稍增高。检验原理:本方法原理反应方程式如下：腺苷 1H次黄苷 N次黄苷 __NP次黄嘌呤一磷酸核苷次黄嘌呤 H尿酸 DT醌55酶解腺苷产生次黄苷，再应用嘌呤核苷磷酸化酶 N酶解次黄苷产生次黄嘌呤，然后通过黄嘌呤氧化酶 的作用，生成，再在过氧化物酶 作用下生成醌色素。通过测22量55处吸光度上升的速度，计算的活性大小。胆碱酯酶 H胆碱酯酶可用于有机磷杀虫剂和战争剂急慢性中毒的诊断。在病情严重的肝炎患者中，约有五分之四的病人胆碱酯酶降低至正常的60，%危重病人可降至正常的10以%内，甚至完全缺乏。另外，慢性活动型肝炎、肝硬化均可导致胆碱酯酶活力下降。检验原理:胆碱酯酶催化水解丁酰硫代胆碱酯酶形成胆碱酯酶和丁酸盐。黄色三价铁氰化钾转化为无色二价亚铁氰化钾，吸光度降低程度与样本中胆碱酯酶活性成正比关系。单胺氧化酶A单氨氧化酶广泛存在于体内各组织中，以肝、肾、脑等组织为最多，临床上常用来观察肝脏纤维化的程度。据报道，在腹腔镜观察下肝脏表面的结节形成与单氨氧化酶活性相平行，80以%上的肝硬化单氨氧化酶增高。急性肝炎或暴发性肝炎有坏死时，肝细胞线粒体大量破坏，单氨氧化酶血浓度上升。检验原理：基质中的苄胺在血清单氨氧化酶（）的作用下，生成氨，生成的氨在作用下与a酮戊二酸和辅酶反应。通过测定辅酶吸光度下降的变化测定血清 的活性。血氨M血氨是正常体内代谢产物。来源于肠道产氨、肾脏泌氨、肌肉产氨等。机体可通过合成尿素、谷氨酸、谷氨酰胺，以及经肾脏排出、肺脏呼出清除多余的氨来保持体内含量稳定。肝功能衰竭时，肝合成尿素能力下降，或因门体侧支循环，肠道产氨增多直接进入体循环，使血氨增高。增高：见于肝昏迷、重症肝炎、肝肿瘤、休克、尿毒症、有机磷中毒、先天性高氨血症及婴儿暂时性高氨血症。减低：见于低蛋白饮食、贫血等。检验原理：a本法测定血浆氨具有特异、简便、快速等优点。通过谷氨酸脱氢酶（ ）的作用，还原成为，从而引起 处吸光度的下降，反应所产生的吸光度变化和样品中氨的含量成正比。测定 处的吸光度变化量，即可计算出样品中氨的浓度。.血2脂类测定项目（9项）甘油三酯：甘油三酯升高：是冠心病的诱因之一。可引起冠状动脉粥样硬化、心肌梗塞、糖尿病、原发性高血脂症、肥胖症、急性胰腺炎、胆道梗阻、极度贫血等。甘油三酯降低：有严重营养不良，脂肪消化吸收障碍，甲亢等。检验原理:甘油三酯经酯酶水解被测定，生成的过氧化氢，4-氨基安替比林和4-氯酚在过氧化物酶催化下生成醌亚胺。有色物质造成吸光度的改变与甘油三酯的浓度成正比。胆固醇O长期的高胆固醇、高饱和脂肪和高热量饮食，遗传因素、缺少运动、脑力劳动、精神紧张等可使胆固醇升高；遗传因素、甲亢、营养不良、慢性消耗性疾病等可使胆固醇降低。检验原理:胆固醇经酶水解和氧化被测定。在酚和过氧化物酶存在情况下，过氧化氢和4-氨基安替比林形成有颜色的醌类物质。高密度脂蛋白胆固醇 L高密度脂蛋白胆固醇被视为防止冠心病的一种保护性脂类成分，与低密度脂蛋白胆固醇一起对冠心病的危险因素进行评价。检验原理乳糜微粒，极低密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇通过与抗人B脂蛋白抗体反应被特异性消除和破坏，在过氧化氢酶作用下水解。剩余的高密度脂蛋白胆固醇在加入特异性的表面活化剂后经胆固醇脂酶 及胆固醇氧化酶 等特异的酶促反应被测定。通过对蓝色结合物吸光度的测量对应得出的浓度。这种方法要比其它检测方法更加特异。低密度脂蛋白胆固醇 L低密度脂蛋白胆固醇 被认为是导致冠心病）的脂质成份与高密度脂蛋白胆固醇 ）同时检测，用于冠心病的诊断和风险评估。检验原理:本检测中第一步反应通过酶反应特异性去除乳糜微粒、极低密度脂蛋白和高密度脂蛋白胆固醇，保护不与酶进行反应。第一步： 、 、 _表面活性剂胆甾烯酮脂肪酸过氧化物酶第二步：通过酶反应和特殊的表面活性剂测定剩下的低密度脂蛋白胆固醇。通过对蓝色结合物吸光度的测量，得出的浓度。表面活性剂胆甾烯酮脂肪酸色原过氧化物酶有颜色的醌类物质载脂蛋白P载脂蛋白的测定是评价心血管疾病危险因素的指标，对于发现和诊断载脂蛋白异常，研究载脂蛋白在脂类代谢和动脉粥样硬化的发生有重要意义。I和 11一起占蛋白的,因此，血清中1可以代表水平，与呈明显正相关。 I降低主要见于高脂血症、冠心病、脑血管病、 o缺乏症、家族性低a脂蛋白血症、鱼眼病等。检验原理:当样品与缓冲液和抗体混合，样品中的载脂蛋白缺1与试剂中的抗人载脂蛋白缺抗体特异性结合,形成浊度增加，通过测定浊度的透光率判断样品中的载脂蛋白缺1含量。载脂蛋白 ：载脂蛋白的测定是评价心血管病危险因素的指标，对于发现和诊断载脂蛋白异常，研究载脂蛋白在脂代谢和动脉粥样硬化的发生有重要意义。是的主要蛋白质，因此，血清中 主要代表水平，与一成显著正相关。高是冠心病的危险因素，也是较好的动脉粥样硬化标志物。银屑病患者 也可升高。检验原理:当样品与缓冲液和抗体混合，样品中的载脂蛋白脂与试剂中的抗人载脂蛋白脂抗体特异性结合,形成浊度增加，通过测定浊度的透光率判断样品中的载脂蛋白脂含量。脂蛋白（） （）：是含有独自的载脂蛋白的脂蛋白，脂质组成结构与极其相似，密度位于低密度脂蛋白和高密度脂蛋白之间。 年发现 时，因其病理意义不明，未被引起重视。 年发现 的一级结构与纤溶酶原部分相同，作为动脉粥样硬化的独立因子越来越受到人们的重视。 （）水平的差异是由遗传因素决定的，受生活方式影响并不大。血清中高浓度的（）可用为动脉粥样硬化和冠心病危险的一种有意义的指标。流行病学研究表明血清胆固醇正常，而血清脂蛋白（）水平超过 的人患冠心病的危险增加倍。如果和（）水平同时升高其危险性增加8倍。检验原理：当样品与缓冲液和抗体混合，样品中的脂蛋白（）与试剂中的抗人脂蛋白（）抗体特异性结合,生成不溶性的沉淀物，引起浊度的增加，通过测定浊度的透光率判断样品中的脂蛋白（）含量。游离脂肪酸 ：游离脂肪酸简称 ，存在于人体内的脂质（ ）i它是热量的直接来源：游离脂肪酸是中性脂肪分解成的物质。当肌肉活动所需能源－－肝醣耗尽时，脂肪组织会分解中性脂肪成为游离脂肪酸来充当能源使用。所以，游离脂肪酸可说是进行持久活动所需的物质。增高：常见于肥胖、肢端肥大症、糖尿病、甲状腺功能亢进、心肌梗死、严重肝病等。降低：常见于甲状腺功能低下、艾迪生病、脑下垂体功能不全等。检验原理：游离脂肪酸和辅酶缺在乙酰辅酶缺合成酶的作用下反应生成乙酰辅酶缺。乙酰辅酶在乙酰辅酶氧化酶的作用下生成 ，随后通过 底物在过氧化物酶的作用下生成有色产物， 时红色染料的吸光度与样本中游离脂肪酸的浓度成正比。磷脂 i人体所有细胞中都含有磷脂，它是维持生命活动的基础物质。磷脂对活化细胞，维持新陈代谢，基础代谢及荷尔蒙的均衡分泌，增强人体的免疫力和再生力，都能发挥重大的作用。血清磷脂的增高见于糖尿病、肾病综合症、慢性出血性贫血、肝硬化、肝坏死、胆道阻塞、甲状腺功能减退、原发性高血压、梅毒等；降低见于甲状腺功能亢进、急性感染性发热、营养不良性肝硬化等。检验原理：磷脂在磷脂酶的作用下水解生成胆碱和磷脂酸，胆碱被胆碱氧化酶氧化生成过氧化氢，过氧化氢与氨基安替比林、反应生成蓝色染料。此染料在 有最大吸收峰，吸收强度与血清中磷脂含量成正比。.肾3功能测定项目（9项）尿素（ ）:血清尿素升高：正常生理状况下的高蛋白饮食。病理状况下的原因之一是由于尿素排泄减少，如肾功能损害引起的肾小球滤过率降低，结石、肿瘤、前列腺肥大引起的尿道或输尿管阻塞使尿量排出减少，低血压或肾血流减少所致的尿形成减少。病理状况下另一原因是蛋白分解代谢的增加、可见于长期发烧、肾上腺皮质类固醇分泌的增加、使用皮质激素类药物、胃或十二指肠出血。检验原理:本法为测定尿素的酶学方法，反应式如下：尿素脲酶谷氨酸a酮戊二酸谷氨酸尿素和水在脲酶作用下生成氨和二氧化碳。产生的氨与a酮戊二酸盐和 在谷氨酸脱氢酸（ ）催化下形成谷氨酸盐和 。其吸光度降低速率与尿素浓度成比例。尿酸（双试剂）血清中尿酸增高常见于痛风。另外核酸代谢增加的白血病多发性骨髓瘤、红细胞增多症等患者血清中尿酸亦常见增高；其次肾功能降低、铅中毒、酒精中毒、肿瘤化疗、放射治疗后和妊娠毒血症等均可使血清尿酸增高。血清尿酸的减少可见于服用可的松、双香豆素、丙磺舒等药物以后。检验原理尿酸酶水解尿酸，产生的 在过氧化物酶的催化下与，一二氯羟基苯磺酸和氨基安替比林 反应，形成一种紫红色醌亚胺。肌酐 （苦味酸）肌肉中的磷酸肌酸变成肌酸后，再经过脱水生成肌酐肌酐与肌肉组织有密切的关系，肌酐的生成量可作为判断肌肉疾病的有用指标。另外，尿中肌酐的排泄量与肌肉总量成一定比例，不受饮食和尿量的影响，经肾小球滤过后也不被肾小管重吸收，因此可用来检测肾小球功能。肾脏疾病初期，一般血清肌酐浓度不升高。直至肾脏实质性损害，如肾功能不全、尿毒症和肾功能障碍引起血清肌酐浓度升高。检验原理:肌酐在碱性溶液中与苦味酸形成一种桔红色络合物。该络合物的吸光度与样品中肌酐浓度成正比。肌酐（酶法）肌肉中的磷酸肌酸变成肌酸后，再经过脱水生成肌酐肌酐与肌肉组织有密切的关系，肌酐的生成量可作为判断肌肉疾病的有用指标。另外，尿中肌酐的排泄量与肌肉总量成一定比例，不受饮食和尿量的影响，经肾小球滤过后也不被肾小管重吸收，因此可用来检测肾小球功能。肾脏疾病初期，一般血清肌酐浓度不升高。直至肾脏实质性损害，如肾功能不全、尿毒症和肾功能障碍才引起血清肌酐浓度升高。检验原理:反应分两步，在第一步，存在于标本中的内源性肌酸被分解生成水，不对本反应产生影响。样本中的肌酐在各种酶的作用下生成红色的醌色素，根据比色法测定醌色素的量，从而计算出肌酐的含量。乙酰B葡萄糖苷酶 是一种在糖蛋白降解代谢中起作用的溶酶体酶。尿中 升高可明确显示肾脏疾病，同样可作为某些疾病的肾病监测指标，如肾病综合症、血管球性肾炎、毒品引起的中毒性肾损害、糖尿病的肾病变、高血压及尿路感染等。检验原理： 水解甲氧基 （2硝基）苯基乙酰氨去氧B氨基葡萄糖苷（ ）为 甲氧基 42硝基）苯酚。在碱性溶液中 波长处比色测定。光抑素 肾小球滤过率（）是检测肾功能的最直接的指标，在肾病早期就出现 的降低。准确的肾小球滤过率的检测能够反映肾病的进程，指导用药从而避免肾脏功能的损伤。目前，常用肌酐清除率的方法来评价肾小球滤过率。血清中的肌酐中度特异，但是灵敏度低，只有当 下降到0或更低时才有显著升高。并且肌酐的升高受肌肉重量，体表面积，饮食摄入影响很大，也就是说和年龄，性别，身高都会影响肌酐量。胱抑素（ ）是一种小分子量的胱氨酸蛋白酶抑制剂。所有的有核细胞都能稳定地产生s 几乎完全被肾小球滤过，然后由肾小管重吸收，并且肾小管不分泌，也不通过肾小管排泄。 不受炎症反应、性别、肌肉以及年龄变化的影响。所以 是一个非常稳定的反映肾小球滤过率的指标检验原理样本中的 与超敏化的抗 抗体胶乳颗粒试剂反应，形成免疫复合物，在 波长处检测其吸光度的变化，其变化程度与样本中的 含量成正比。微球蛋白 G微球蛋白是一种几乎在所有体细胞的细胞膜上部都存在的低分子量（ 道尔顿）蛋白质，游离的B2微球蛋白是细胞裂解的产物。它是由肾小球分泌的，然后被肾小管细胞吸收和分解。肾小管功能异常时，血清中 、尿液中的浓度升高。细胞破碎后，浓度显著升高，如在急性白血病中血清中的 浓度升高。尿微量白蛋白 微量白蛋白尿是糖尿病肾病最早的临床表现，是心血管发病率和死亡显著增高的一个标志。早期检测微量白蛋白尿能够使个体化的积极治疗及早实施。新近发表的几项临床试验已经显示早期发现微量白蛋白尿并尽早治疗，可以预防或延缓糖尿病肾病进展至终末期肾病的效果。检验原理：白蛋白与试剂中抗人白蛋白抗体在缓冲液中快速形成抗原抗体复合物，使反应液出现浊度。当反应液中保持抗体过剩时，形成的复合物随抗原量增加而增加，反应液的浊度亦随之增加，与校准品对照，即可算出未知白蛋白的含量。微球蛋白 a微球蛋白（a）是体内有核细胞合成的一种由个氨基酸残基组成的糖蛋白。它主要由肝肾合成，在人体液中浓度基本恒定且在较宽的范围内保持稳定。血清a-升高多见于原发性肾小球炎、糖尿病、狼疮性肾病、间质性肾炎， 综合症和急慢性肾功能衰竭。而尿中a-的浓度为临床肾功能测定、肾移植成活、糖尿病肾病、肾功能不全、痛风肾、重金属镉、汞中毒的临床诊断提供了重要依据。检验原理：标本中的a微球蛋白与包被在胶乳颗粒上的抗a微球蛋白产生浊度，其浊度与浓度成正比，在波长下，测定该浊度，与标准血清比较，即能得出样本血清中的a1微球蛋白含量。视黄醇结合蛋白视黄醇结合蛋白是反映机体营养状态的一个灵敏指标，特别是蛋白质-热卡营养不良。内脏的蛋白质是作为蛋白质-能量营养不良传统的实验室指标，而根据营养状态视黄醇结合蛋白能做出更快反应。主要在肝脏合成，因此血清中的降低和增加和肝脏疾病有关，并受肝脏疾病的出现和严重程度的影响。在肝病，肝硬化及急、慢性肝炎的血清水平均显著降低。可作为肾小管损伤的早期诊断指标。视黄醇结合蛋白在尿中稳定性强，不易分解，不受和血压干扰。在肾近曲小管损伤时，其尿排量明显增加，故尿中排量增加可作为肾近曲小管损伤的标志物。当肾脏滤过功能降低时，血中因贮积而显示浓度升高。血液或尿液中的浓度可以作为一种理想的肾功能指标应用于临床。检验原理:以胶乳增强免疫比浊法为测定原理，样品中的视黄醇结合蛋白和被乳状液粒吸附的抗体引起抗原抗体反应，形成免疫复合物，在波长处检测其浊度的变化，其变化程度与样本中的视黄醇结合蛋白成正比。.心4肌类测定项目（10项）肌酸激酶各种类型进行性肌萎缩时，血清活性均可升高。神经因素引起的肌萎缩如脊髓灰白质炎时活性正常，皮肌炎时活性可有轻度或中度增高。急性心肌梗塞后3-小8时就开始增高，可高达正常上限的10-1倍2，病毒性心肌炎时也明显升高，对诊断及预后有参考价值。检验原理:磷酸肌酸 —肌酸葡萄糖磷酸葡萄糖葡萄糖磷酸葡萄糖磷酸葡萄糖酸: 磷酸葡萄糖脱氢酶:肌酸激酶：己糖激酶肌酸激酶同功酶 在急性心肌梗塞〜小时升高，〜小时达到峰值，小时恢复正常。一主要用于诊断急性心肌梗塞。但 对心肌并非完全特异，外科手术和骨骼疾病时也会升高。检验原理本法为测定活性的免疫抑制酶动力学方法。在抗 单体抗体存在的条件下，标本中全部活性和的活性被抑制，而和中亚基的活性则不受影响。由于循环中活性可忽略不计，将活性测定值乘以倍即得活性。磷酸肌酸葡肌酸葡萄糖 磷酸葡萄糖葡萄糖磷酸葡萄糖磷酸葡萄糖酸羟丁酸脱氢酶 a羟丁酸脱氢酶的活性定义为：当用a酮丁酸作为底物时所获得的乳酸脱氢酶的活性。 较其他同工酶对a酮丁酸有更大的亲合力，因此当用a酮丁酸作为底物时，含 多的组织如血清、心肌、红血球等就具有较高的活性，即。 活性高；而肝、骨胳肌等具有较低的活性，即。 活性低。常用a 来测量血清中 的活性。a与、 、、 一起构成了心肌酶谱。检验原理采用德国临床化学协会 推荐的方法改良而成。样本中的a羟丁酸脱氢酶催化a氧代丁酸生成a羟丁酸，同时，还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸被氧化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，从而引起 处吸光度的下降，此种变化与样本中的a羟丁酸脱氢酶活性成正比。乳酸脱氢酶 （）乳酸脱氢酶增高主要见于心肌梗塞、肝炎、肺梗塞、某些恶性肿瘤、白血病等。某些肿瘤转移所致的胸腹水中乳酸脱氢酶活力往往升高。检验原理采用德国临床化学协会（）推荐的方法改良而成。样本中的乳酸脱氢酶催化乳酸生成丙酮酸，同时，氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸被还原为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，从而引起4处吸光度的上升，此种变化与样本中的乳酸脱氢酶活性成正比。4乳酸脱氢酶同工酶 乳酸脱氢酶增高主要见于心肌梗塞、肝炎、肺梗塞、某些恶性肿瘤、白血病等。某些肿瘤转移所致的胸腹水中乳酸脱氢酶活力往往升高。检验原理采用德国临床化学协会（ ）推荐的方法改良而成。样本中的乳酸脱氢酶催化乳酸生成丙酮酸，同时，氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸被还原为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，从而引起4处吸光度的上升，此种变化与样本中的乳酸脱氢酶活性成正比。4同型半胱氨酸 同型半胱氨酸）是蛋氨酸代谢产生的一种含硫氨基酸，的在血中通过二硫键与蛋白质结合，只有很少一部分游离同型半胱氨酸参加循环。水平与心血管疾病密切相关。是心血管疾病发病的一个重要危险因子。血液中增高的因为刺激血管壁引起动脉血管的损伤，导致炎症和管壁的斑块形成，最终引起心脏血流受阻。高同型半胱氨酸尿症患者，由于严重遗传缺陷影响代谢，造成高血症轻微的遗传缺陷或族维生素营养缺乏会伴随中度或轻度的升高，也会增加心脏病的危险。升高还可引起神经管畸形及先天性畸形等出生缺陷类疾病。检验原理基于小分子捕获技术的腺苷同型半胱氨酸水解酶被转化为游离型后，通过与共价底物反应，循环放大，同时产生腺苷。腺苷立即水解成氨和次黄嘌呤，氨在谷氨酸脱氢酶的作用下，使转化为样本中的浓度与转化速率成正比4高敏反应蛋白 反应蛋白（）是组织损伤或发炎刺激时肝细胞合成的最敏感的急性时相反应蛋白之一。外伤、炎症、囊肿和组织再生等，都会令血清中的在24--2小时内升高，可达正常值的2倍。它对心肌损伤不具有专一性。虽然传统意义上的升高主要用于监测和查明发炎的程度，但是几项研究已经报到了低浓度的升高，（ ）在预测心血管外周动脉血管性疾病的危险性上有重大的意义。它的浓度高于时，意味着有明显的发炎产生。临床不应该仅仅从单一结果下结论，而是综合临床和其它实验数据来判断。检验原理：人血清中高敏反应蛋白 与其相应抗体在液相中相遇，立即形成抗原抗体复合物，并形成一定浊度。与通过同样处理的校准血清比较，定量检测出样品中高敏反应蛋白的含量。4肌钙蛋白 肌钙蛋白是一种由肌钙蛋白原肌球蛋白有序构成的复合抑制蛋白，它增强钙离子对横纹肌动蛋白酶的活性的敏感性，由此调节横纹肌动和肌球蛋白的相互作用。随着对心肌肌钙蛋白 深入研究，无论是对心肌的特异性还是诊断敏感性， 的地位都受到了严重挑战 被认为是目前最好的确定标志物，正逐步取代成为的诊断“金标准”。检验原理：将特异性抗体结合于胶乳颗粒表面，样本与胶乳试剂在缓冲液中混合，样本中的肌钙蛋白I与胶乳颗粒表面的抗体结合，使相邻的胶乳颗粒彼此交联，在附近测量溶液浊度的增加，其增加的程度与样本中的肌钙蛋白I含量相关。肌红蛋白 测定血清肌红蛋白可作为急性心肌梗死 诊断的早期最灵敏的指标。肌红蛋白增高：见于急性心肌梗死早期、急性肌损伤、肌营养不良、肌萎缩、多发性肌炎、急性或慢性肾功能衰竭、严重充血性心力衰竭和长期休克等。在心肌梗死后即可增高，但〜内即恢复正常。检验原理：本方法是一种胶乳自动增强免疫比浊法。将特异抗体结合于胶乳颗粒表面，标本与胶乳颗粒在缓冲液中混合，标本中的与胶乳颗粒表面的抗体结合，使相邻的胶乳颗粒彼此交联，在附近测量溶液浊度增加，其增加的程度与标本中的含量相关。髓过氧化物酶 髓过氧化物酶是一种重要的含铁溶酶体，存在于髓系细胞（主要是中性粒细胞和单核细胞）的嗜苯胺蓝颗粒中，是髓细胞的特异性标志，髓过氧化物酶与冠状动脉疾病冠心病是心血管系统中最常见的疾病，而动脉粥样硬化又是形成冠心病的重要病理基础，髓过氧化物酶是血管炎症的标志。此外，髓过氧化物酶的含量与糖尿病、肾功能衰竭、心血管疾病、急性冠脉综合症也有一定影响。检验原理：髓过氧化物酶活性的检验是通过测定总的过氧化物反应减去非髓过氧化物反应而实现的，该过程需两步反应：第一步，测出样本与过氧化氢、和苯酚进行总过氧化物反应；第二步，通过将髓过氧化物酶特异性抑制剂加入到反应中而测出非髓过氧化物反应。然后用总的过氧化物反应减去非髓过氧化物反应得出髓过氧化物酶活性。.糖即代谢类测定项目（即项）3.即.葡1萄糖GL（UGO）D:生理性血糖增高:一般发生在餐后1-2小时，注射葡萄糖后，情绪紧张时，肾上腺素分泌增多或注射该药后。病理性高血糖：常见于糖尿病患者；升血糖的激素分泌增加，如垂体前叶功能亢进、肾上腺皮质功能亢进、甲状腺功能亢进、嗜铬细胞瘤、胰岛a细胞瘤等；颅内压增高刺激血糖中枢，如颅外伤、颅内出血、脑膜炎等；有脱水引起的血糖浓缩，如呕吐，腹泻、高热等。生理性血糖降低：见于饥饿和剧烈运动后，口服降糖药物后；病理性低血糖则见于胰岛B细胞瘤引起的胰岛素分泌过多症；升血糖的激素分泌减少，血糖损失过多。检验原理:葡萄糖经葡萄糖氧化酶氧化，形成的过氧化氢在过氧化物酶催化下与酚和4-氨基安替 比林生成红色的醌亚胺。葡萄糖（）检验原理葡萄糖经己糖激酶 作用转化成葡萄糖磷酸，然后再经葡萄糖磷酸脱氢酶 作用在和参与下，转化成磷酸葡萄糖酸和，其吸光度增加与样品中葡萄糖浓度成正比。葡萄糖—糖化血红蛋白 红细胞的平均寿命为天，在这期间糖化血红蛋白持续不断的形成。由于红血球中的糖化血红蛋白含量反映过去4至6周血中葡萄糖的平均含量，并且在红血球的整个寿命中是稳定的，所以糖化血红蛋白的测量对糖尿病人的长期监护提供非常有价值的诊断依据。检验原理 检测通过溶解破坏全血样本释放大量蛋白酶。此过程中释放出氨基酸，包含从血红蛋白B链中的甘油缬氨酸。甘油缬氨酸作为酶的底物通过应用过氧化物酶催化反应特异性测量相配色团的浓度。羟丁酸:正常人血液中B羟丁酸含量极少，这是人体利用脂肪氧化供能的正常现象。但在某些生理情况（饥饿、禁食）或病理情况下（如糖尿病），糖的来源或氧化供能障碍，脂动员增强，脂肪酸就成了人体的主要供能物质。脂肪酸分解代谢产生酮体（-羟丁酸含量最多，约占78，%乙酰乙酸约占20，%丙酮约占2%量超过肝外组织利用的能力，二者之间失去平衡，血中B羟丁酸浓度就会过高，导致酮血症和酮尿症。乙酰乙酸和B羟丁酸都是酸性物质，因此酮体在体内大量堆积还会引起代谢性酸中毒。检验原理：本实验采用酶动力学法来测定血液或血清中的 羟丁酸。在 羟丁酸脱氢酶的催化作用下， 羟丁酸被氧化，生成乙酰乙酸，同时 被还原为，在处有最大吸收峰，其吸光度值与 羟丁酸的浓度呈正相关。糖化白蛋白：血浆葡萄糖分子中的羰基能与白蛋白分子末端的自由氨基发生非酶促糖基化反应,形成不稳定的、可逆的醛亚胺,再经醛亚胺分子结构的重排反应从而形成高分子酮胺结构。是此酶促反应结合的产物。 代表过去周〜周血糖水平而主要代表体内白蛋白的糖化作用白蛋白在体内比较稳定，水平也比较稳定，白蛋白由于半衰期短〜产生比快因此是有效反映患者过去周〜周平均血糖水平。检验原理:在血浆或血清中使对白蛋白有特异性的蛋白酶发生作用从中生成糖化氨基酸。利用酮胺氧化酶 将糖化氨基酸分解成氨基酸、葡萄糖酮醛和双氧水生成的双氧水在过氧化物酶的作用下定量地与发色色素缩合生成兰紫色生通过测定兰紫色色素的吸光度来定量从血清生成的糖化氨基酸。第一步：糖化氨基酸消除反应内源性糖化氨基酸酮胺氧化酶葡萄糖酮醛氨基酸第二步：糖化白蛋白的糖化氨基酸分析糖化白蛋白蛋白水解酶糖化氨基酸糖化氨基酸酮胺氧化酶葡萄糖酮醛氨基酸—过氧化物酶蓝紫色色素—第三步：白蛋白分析：白蛋白+溴甲酚紫——绿色络合物第四步：计算糖化白蛋白占总白蛋白的比率浓度糖化白蛋白（）（ X100%）白蛋白浓度果糖胺：果糖胺代表一组糖基化了的血液与组织蛋白质。由蛋白质的非酶糖化反应而形成的糖化蛋白被称为果糖胺，其形成的量取决于血糖浓度。依血糖水平而形成的果糖胺在1-周3内发生代谢变化，这与大多数血清蛋白质的代谢周期相同，因此果糖胺的浓度反映了在这一段时间内持续变化着的血糖浓度的均值，测定果糖胺浓度对于糖尿病来说，是一个理想而快速的血糖监测指标。检验原理标本中加入试剂 试剂缓冲液该比色方法基于在碱性条件下以烯醇形式存在的果糖胺还原为甲醛。在此过程中形成的颜色与浓度成正比。.胰6腺功能（3项）a淀粉酶a :血清淀粉酶测定主要用于诊断急性胰腺炎，在急性发作期，活性明显升高。尿淀粉酶在发病后12-2小4时也会升高。其他急性疾病，如溃疡病穿孔、急性腹膜炎、肠梗性胰腺炎、胰腺肿瘤以及流行腮腺炎、唾液腺化脓或腺管堵塞时，血清淀粉酶也会有所升高。而对于各种肝脏疾病、肝炎、肝硬化、肝脓肿、肝癌及胆囊炎等，则淀粉酶活性下降。检验原理a淀粉酶检测中使用一种新的底物一氯——硝基苯一麦芽丙糖苷（ ）g该底物直接与淀粉酶反应而不需辅酶，从底物中释放出一氯——硝基苯（）。波长下监测吸光度的变化。吸光度变化速率与样本中淀粉酶活性成正比。胰淀粉酶 ：血清中胰淀粉酶测定主要用于诊断急性胰腺炎。在急性发作期淀粉酶活性显著增高。尿中胰淀粉酶在发病后12-小2时4也会升高。而对于各种肝脏疾病，如肝炎、肝硬化、肝癌及胆囊炎等，则淀粉酶活力下降。检验原理：+月夷淀粉酶・N1-葡萄糖苷酶 k脂肪酶 ：胰腺是人体最主要来源。血清脂肪酶对急性胰腺炎的诊断有很大帮助。临床研究证实，其灵敏度为〜 ，特异性为〜，而淀粉酶的灵敏度为〜9特异性为〜 4血清脂肪酶活性测定对急性胰腺炎诊断的灵敏度及特异性均优于淀粉酶活性测定。血清增高常见于急性胰腺炎及胰腺癌，偶见于慢性胰腺炎。急性胰腺炎时，血清淀粉酶增加的时间较短，而血清活性上升可持续〜天。腮腺炎未累及胰腺癌时， 通常在正常范围。止匕外，总胆管结石或癌、肠梗阻、十二指肠穿孔等有时亦可增高。检验原理：采用1该淀邻-二月桂宗甘油-3戌-二酸-（6’-甲基试卤灵）-酯在碱性条件下在脂肪酶的催化下分解成邻二月桂宗甘油，戌二酸和甲基试卤灵，在下。根据产物的甲基试卤灵生成速率测定脂肪酶活性。3.营7养（3项）前白蛋白:血清前白蛋白是血清蛋白质，其主要生理功能是运输甲状腺素和维生素A并具有胸腺激素活性，可通过促进淋巴细胞的成熟来增加机体的免疫力。肝癌，肝硬化，慢性活动性肝炎，堵塞性黄疸患者均显著降低，使早期肝功能损伤的指标。营养不良和急性感染的病人也可降低。检验原理：当样品与缓冲液和抗体混合，样品中的前白蛋白与试剂中的抗人前白蛋白抗体特异性结合,生成不溶性的沉淀物，引起浊度的增加，通过测定浊度的透光率判断样品中的前白蛋白含量。转铁蛋白R转铁蛋白（ ）连接上铁离子后可以防止铁中毒以及通过肾脏的损失。水平升高，常见于缺铁性贫血，妊娠，雌激素的控制和脂肪性肾病。水平下降常见于遗传缺陷，睾丸激素控制，感染，急性炎症，某些类型肾炎，肿瘤，血色素缺失，急性疟疾和营养不良。检验原理：人体中的转铁蛋白与试剂中抗人转铁蛋白抗体在缓冲液中形成抗原抗体复合物，使反应液出现浊度。当反应液中保持抗体过剩时，形成的复合物随抗原量增加而增加，反应浊度亦随之增加，在 以终点法监测吸光度变化，与标准品对照，即可计算出未知蛋白的含量。铁蛋白：铁蛋白是公认的反映储存铁是否充足的最敏感指标。在缺铁早期，体内储存的铁含量减少，即可导致铁蛋白降低。此时，还没有缺铁的红细胞生成，更没有血红蛋白的减少。此时如能及时纠正缺铁，对健康的影响相对较小。对可能存在铁缺乏的妇女和儿童，应经常监测铁蛋白水平。病理性降低：缺铁性贫血；营养不良。病理性升高：慢性疾病引起的贫血；再生障碍性贫血、铁粒幼红细胞贫血和慢性溶血性贫血；特发性血色素沉着症（血色病）；多次输血的病人。检验原理:使用抗铁蛋白抗体包被的胶乳颗粒，和样品中的铁蛋白进行抗原-抗体反应。反应完成后，用透射比浊法检测吸光度的变化反映铁蛋白的浓度。3.凝8血（2项）二聚体 ：二聚体是纤维蛋白单体经活化因子X交联后，再经纤溶酶水解所产生的一种特异性降解产物，是一个特异性的纤溶过程标记物。二聚体来源于纤溶酶溶解的交联纤维蛋白凝块。纤溶蛋白降解产物中，唯二聚体交联碎片可反映血栓形成后的溶栓活性。因此理论上，二聚体的定量检测可定量反映药物的溶栓效果、及可用于诊断、筛选新形成的血栓。心肌梗死、脑梗死、肺栓塞、静脉血栓形成、手术、肿瘤、弥漫性血管内凝血、感染及组织坏死等均可导致二聚体升高。检验原理：试剂中包含胶乳颗粒与抗二聚体的单克隆抗体结合。胶乳颗粒在 产生吸收，当和样本中的二聚体发生凝集，在 吸光度上升，吸光度上升决定于二聚体的浓度。根据标准曲线可以检测出样本中二聚体含量。纤维蛋白原：人纤维蛋白原是人体凝血系统的重要成分之一，纤维蛋白原在体内经凝血酶作用转变为纤维蛋白发挥其凝血和止血功能，并参与体内一系列病理、生理过程，如炎症组织损伤修复等，其增加往往是机体的一种非特异性反应，常见于毒血症，肺炎，轻型肝炎，胆囊炎，肺结核等感染及肾病综合症，风湿热，恶性肿瘤，风湿性关节炎，脑血栓，脑梗死，心肌梗死等无菌性炎症，另外如外科手术，放射治疗，月经期及妊娠期见于纤维蛋白原轻度增高。检验原理:样本中纤维蛋白原与试剂中相应的抗体在溶液中相结合，立即形成抗原-抗体复合物，并形成一定的浊度。该浊度的高低在一定量抗体存在时与抗原的含量成正比，通过与同样处理的校准液比较，计算未知样本中纤维蛋白原的含量。3.胃9肠功能：（2项）胃蛋白酶原I胃蛋白酶原是胃液中胃蛋白酶的无活性前体，分为胃蛋白酶原I和胃蛋白酶原n两种亚群。胃蛋白酶原I来源于胃底腺的主细胞和颈粘液细胞。胃蛋白酶原n则来源于全胃腺（胃贲门腺、胃底腺、胃窦幽门腺）和远端十二指肠 氏腺，前列腺和胰腺也产生少量胃蛋白酶原n，胃粘膜合成的胃蛋白酶原n约为总量的 .合成后的胃蛋白酶原大部分进入胃腔，在酸性胃液作用下活化成胃蛋白酶，只有少量（约1%）胃蛋白酶原透过胃粘膜毛细血管进入血循环。血清胃蛋白酶原水平反映了不同部位胃粘膜的形态和功能： 是检测胃泌酸腺细胞功能的指针，胃酸分泌增多 升高，分泌减少或胃粘膜腺体萎缩 降低； 与胃底粘膜病变的相关性较大（相对于胃窦粘膜），其升高与胃底腺管萎缩、胃上皮化生或假幽门腺化生、异型增值有关； 比值进行性降低与胃粘膜萎缩进展相关。因此，联合测定 和 比值可起到胃底腺粘膜“血清学活检”的作用。检验原理：以胶乳增强免疫比浊法为测定原理，样品中的 和被乳状液粒吸附的的抗体引起抗原抗体反应，形成免疫复合物，在 波长处检测其浊度的变化，其变化程度与样本中的 成正比。胃蛋白酶原：胃蛋白酶原1是胃液中胃蛋白酶的无活性前体，分为胃蛋白酶原I和胃蛋白酶原n两种亚群。胃蛋白酶原I来源于胃底腺的主细胞和颈粘液细胞。胃蛋白酶原n则来源于全胃腺（胃贲门腺、胃底腺、胃窦幽门腺）和远端十二指肠 氏腺，前列腺和胰腺也产生少量胃蛋白酶原n,胃粘膜合成的胃蛋白酶原n约为总量的.合成后的胃蛋白酶原大部分进入胃腔，在酸性胃液作用下活化成胃蛋白酶，只有少量（约1）%胃蛋白酶原透过胃粘膜毛细血管进入血循环。血清胃蛋白酶原水平反映了不同部位胃粘膜的形态和功能：是检测胃泌酸腺细胞功能的指针，胃酸分泌增多升高，分泌减少或胃粘膜腺体萎缩降低；与胃底粘膜病变的相关性较大（相对于胃窦粘膜），其升高与胃底腺管萎缩、胃上皮化生或假幽门腺化生、异型增值有关； 比值进行性降低与胃粘膜萎缩进展相关。因此，联合测定和比值可起到胃底腺粘膜“血清学活检”的作用。.1免0疫&风湿类测定项目（8项）免疫球蛋白：床意义：免疫球蛋白的测定是一种表征免疫缺乏症和骨髓瘤的重要手段。它在免疫系统的急性和慢性感染方面也占据重要地位。占血清中总免疫球蛋白到5的单体结构形式类似于。有的是以多聚体形式存在，具有抵抗病原体细菌的破坏作用。分泌型功能比较重要，通常存在于泪液、汗液、唾液、乳汁及支气管分泌物中。的增加见于急性甲型肝炎、慢性攻击性肝炎、肝后性或隐性肝硬化、主动性酒精肝、慢性感染、风湿性关节炎、多重皮肤病、混合性关联组织疾病等。降低常见于获得性先天免疫缺陷症、肠道疾病的蛋白质流失及皮肤烧伤。检验原理:当样品与缓冲液和抗体混合，样品中的免疫球蛋白意试剂中的抗人免疫球蛋白意抗体特异性结合,生成不溶性的沉淀物，引起浊度的增加，通过测定浊度的透光率判断样品中的免疫球蛋白意含量。免疫球蛋白 ： 是在人体血清中占主导地位的免疫球蛋白，它占到总的，具有吞噬作用，能有效地激活补体活化途径，从而中和毒素，移除致病抗原。 的测定对免疫缺陷和骨髓瘤的判定十分重要，其水平的升高常见于慢性感染和慢性发炎。 是唯一能通过胎盘的免疫球蛋白，因而对胎儿抵御感染有着特殊的重要性。机体对外来细菌和毒素的免疫应答生成，分为 、 、 、四种类型，多克隆 升高预示有，慢性心脏疾病，感染，囊肿性纤维化。单克隆 升高发生于骨髓瘤，下降见于先天性亚型缺失症，也见于肠道蛋白质流