BioRad凝胶成像分析仪

BioRad凝胶成像分析仪第1页/共29页主要内容仪器组成成份介绍软件操作界面介绍软件应用介绍第2页/共29页1、仪器基本组成第3页/共29页仪器各组成部分介绍镜头及滤光片位置控制面板紫外透射平台第4页/共29页1.1控制面板

第5页/共29页1.2背面开关及保险丝

UniversalHood电源开关第6页/共29页1.3镜头相机镜头滤光片第7页/共29页2、基本软件操作界面第8页/共29页软件操作界面主窗口工作列分析工具列状态列程序桌面启动精灵第9页/共29页2.1主窗口工具列2.2显示工具列图像显示设定放大缩小全窗口大小亮度明暗度转换改变图像色彩转换3D成模式像图像信息第10页/共29页2.3分析工具列图像工具泳道及条带工具分子量工具自动定量工具注释工具手动定量工具第11页/共29页3、软件基本程序应用第12页/共29页3.1建立图像获取程序双击选择“新建实验协议”第13页/共29页3.1.1

在应用程序下，选择各种成像模式，包括核酸凝胶、蛋白质凝胶、印迹及自定义等第14页/共29页3.1.2在成像区域项下，选择凝胶的类型及图像区域。第15页/共29页3.1.3

在图像曝光、显示选项下，可以手动或自动设置曝光时间，是否高亮显示饱和像素及显示图像色颜色。第16页/共29页3.2.1

将凝胶放入仪器盘里，关好仪器门→点击“放置凝胶”→通过照相机缩放调节图像的大小或打开仪器门，挪动电泳胶，使其处于合适的成像位置→点击运行实验协议即可成像3.2成像第17页/共29页3.2.2

此时可以点击主窗口工具栏的“快照”或“保存”，分别保存照片和软件格式，一边日后查看或分析。第18页/共29页3.3图像分析3.3.1自动分析点击左侧“分析工具箱”下方的“自动分析”，进行“检测设置”和“分子量分析设置”，点击“确定”，完成对图像的自动分析。第19页/共29页3.3.2手动分析

3.3.2.1点击左侧“分析工具箱”下方的“图像工具”，可以对图像进行“水平”和“垂直”的翻转，“向左90°”、“向右90°”和“自定义”的旋转，以及“裁切”、“逆变数据”、“合并”等操作。第20页/共29页3.3.2.2

点击“泳道和条带”，在“泳道”选项下可以进行泳道检测器的“自动”和“手动选择”，可以对“所有泳道”或“单个泳道”进行相关的操作；在“条带”选项下，可以进行“条带的检测”，以及条带的“添加”、“删除”、“调整”。第21页/共29页3.3.2.3分析完毕后，点击主窗口工具栏的“分析表”，显示分析结果。同时“分析表”上方的选项可以调整“分析表”的显示项，及保存成Excel或文件的格式等。显示数据选项更改分析表方向将分析表复制到剪切板将分析表导出到文件将分析表导出到EXCEL第22页/共29页3.3.2.4分子量分析点击“分析工具箱”中的“MW分析工具”，在标准项下，点击“更改”，选择所需的“分子量标准”，选择“标准泳道”，点击“分析表”，即可查看所要检测的蛋白的分子量，通过“主窗口工具栏”的“标准曲线”查看标准曲线、“报告栏”查看报告。第23页/共29页3.3.2.5定量工具

定量工具包括“相对定量”和“绝对定量”。在“相对定量”里我们选用泳道5的1号条带为参考条带，其被定义为“1”，其余条带依次得出相对结果。第24页/共29页3.3.2.5定量工具——“绝对定量”

通过选择已知标准品浓度的条带（至少两个以上，以R表示），并设定合适的回归参数计算所得之标准曲线来推算目标条带的绝对浓度，具体数据可以查看分析表。第25页/共29页3.3.2.6注释工具

可以通过注释工具增加文字批注及箭头批注，并可调整批注相对位置、文字属性、颜色及旋转方向等参数。第26页/共29页3.3.2.7

手动定量工具/体积工具

按下“矩形”、“圆形”、“徒手画”选择较合适的条带型态，选取想要定量分析的条带位置，并在条带上点击左键两下可将样品定义为标准品、未知样品或背景空白，并分别定义其定量依据（如kb、ppm、mg/ml…）。背景扣除方法里的“局部”是通过我们所圈选的未知条带和标准