病毒灭活血浆临床应用

输血安全策略献血者筛选：低危人群—自愿无偿献血提高检测灵敏度：试剂改进，方法提高ELISANAT。安全血液制品：洗涤、过滤去白细胞、辐照、病毒灭活，血浆的再次检测(国外部分临床用血浆）。科学合理输血：血液制品的认知应用。FourProtectingWallsDonorCriteriaTestingPrionsInactivationLeukocyteRemoval……Modifiedfrom:NDhingra,17-18June2003RationalUse输血安全血浆病毒灭活必要性窗口期：检测方法与试剂的灵敏度检测病毒种类局限性:HIVHBVHCV（未检测的：HTLV、CMV和细小病毒B19）。病毒变异及新病毒出现:WNVSARS-CoVMPXV（包膜病毒）人为的差错输血传播风险存在：某地HBV1：9000（国际检验医学杂志2010,31(7):764-5）输血性传染病之1/10000=患者的100%病毒灭活进行时一经开始从未间断源自发达国家血液制品病毒灭活从非细胞成分到细胞成分逐步推进中国病毒灭活：卫政药发（1994）第264号文/卫药生发（1997）第443号文/国药监注（2002）160号文病毒灭活方法化学方法：有机溶剂/去污剂用于IgG凝血因子血浆的灭活有机溶剂磷酸三丁酯（TNBP)

去污剂TritonX-100Tween-80光化学法：亚甲蓝（美兰）+可见光适用于血浆灭活物理方法：去除：纳米过滤：联合应用IgG凝血因子沉淀法层析法加热灭活：干热法：凝血因子巴氏消毒法：白蛋白IgG凝血因子S/D法Solvent/detergent灭活机制：有机溶剂破坏病毒包膜脂质结构的完整性或靶细胞受体的识别位点，去污剂协同作用。脂质包膜病毒：HBV、HCV、HIV有较好的灭活效果。非脂质包膜病毒HAV、细小病毒B19无杀灭作用。有感染甲肝报道。6S/D法有效性：凝血因子活性损伤，但能满足临床的应用要求。蛋白C、蛋白S含量可下降20%-40%，VWF含量最低，用来治疗血管性假血友病、肝病和DIC应慎用，不能用来制备病毒灭活冷沉淀。缺点：混合制备，存在污染可能。国外：临床部分血浆此法灭活。国内：临床用血浆不使用该法灭活。7亚甲蓝光化学法病毒灭活血浆

（MB-P)亚甲蓝抗病毒作用最早报道于1933年;1955年已开始用MB灭活人血浆病毒;Pohi和Mohl于1966年首次临床应用报道;1992年德国红十字会MB-P正式用于临床;2004年亚甲蓝光化学血浆病毒灭活技术被列入世界卫生组织“人血浆制品病毒灭活或去除指南”；2006年俄罗斯、阿根廷、新加坡、马来西亚使用;欧盟和英国输血指南纳入亚甲蓝光化学病毒灭活技术;亚甲蓝光化学法病毒灭活血浆Between1992and1998,morethanamillionunitsofMBFFPwereusedinGermany,Switzerland,Austria,andDenmark.UsehascontinuedintheUK,Portugal,andSpainusingtheGrifols,Baxter,andMacopharmaversionsofthetechnology(VoxSanguinis200792,319-326）.亚甲蓝光化学法病毒灭活血浆

在欧洲AsofDecember2007,theTheraflexsystemhasbeenregisteredorinroutineusein20countries.CountriesinEuropethathavebeenusingMB-plasmaincludeGermany,Switzerland,theUK,Spain,Greece,Italy,FranceandBelgium.Sofarover4millionunitsofMB-FFPhavebeentransfusedinvariousclinicalsettings.亚甲蓝光化学法病毒灭活血浆

在其他国家国内1995年开始亚甲蓝病毒灭活血浆研究;中国2001年上海;青岛2005年;亚甲蓝光化学法病毒灭活血浆比利时、德国、西班牙、瑞士等发达国家已立法全国100%临床使用灭活血浆。全国200多家血液中心和中心血站开展,国内年用量近千万单位用于临床。标准依据血站技术操作规程（2012版）；GB18469-2012全血及成分血质量要求；中国药典2005版二部；国药监注［2002］160号血液制品去除／灭活病毒技术方法及验证指导原则；YY0765.1-2009一次性使用血液及血液成分病毒灭活器材第1部分：亚甲蓝病毒灭活器材。亚甲蓝光化学法病毒灭活血浆灭活原理：亚甲基蓝（MB）嵌入病毒膜脂质及核酸，在可见光的作用下，发生光化学反应，发生电子和能量转移，脂质、鸟嘌呤氧化，使病毒核酸断裂、包膜破损，阻止病毒复制，达到病毒灭活效果。灭活机制LIGHTMBMB灭活流程血浆含MB血浆荧光照射照后血浆滤后血浆专用病毒灭活箱内保存输注过滤MB、白细胞全血MB添加过滤连接可灭活病原体种类脂质包膜病毒：对HIV、HBV、HCV、CMV、HTLV较好的灭活作用。非脂质包膜病毒：对Calici、ParvoB19有一定灭活作用，对HAV无效。

TransfusionandApheresisScience382008正在被关注的：吩噻嗪对朊病毒的作用；查加斯病原体，疟疾？？

VoxSang2006；91：285-91细菌的灭活效果；

MB光敏效应对血液中革兰阴性菌的灭活效果要优于革兰阳性菌。JOURNALOFPREVENTIVEMEDICINEINFORMATION2003Vol.19No.6病毒灭活血浆中凝血因子的含量05101530Fg回收率Ⅷ:C回收率Ⅸ:C回收率707580859095100(%)照射时间病毒灭活血浆中凝血和抗凝活性FⅤ、FⅧ、FⅨ、FⅪ≥80%；VWF≥90%纤维蛋白原≥70%；

AT-Ⅲ≥90%；蛋白C、蛋白S活性影响小;白蛋白、球蛋白＞85%。GB18469-2012MB-P:FⅧ≥0.5IU/ml。亚甲蓝光化学法病毒灭活血浆FⅡ:C、FⅤ:C、FⅦ:C和FⅩ:C的含量在冻存12个月时含量还能维持在70%以上。FⅧ:C和FⅨ:C在冻存12个月时含量仅维持在30%～50%,Fib在冻存12个月时含量约维持在60%。亚甲蓝病毒灭活血浆1年保存期质量调查研究国家卫生公益性行业科研专项（200902008）欧洲研究报道：病毒灭活新鲜冰冻保存27个月后凝血因子活性≥70%。首选病毒灭活血浆免疫缺陷或抑制导致免疫功能低下造血干细胞移植器官移植幼儿需要CMV病毒血清学阴性血液应首选病毒灭活血浆MB-P婴幼儿患者使用wereinstructedtoseeksuppliesofUSplasmaforFFPproductionforchildrenbornafterJanuary1,1996,ThisimportedFFPwillbesubjectedtoMBtreatment,and,inpreparation,UKTransfusionServiceshavealreadyintroducedMBFFPforthisagegroup.

InAugust2002,UKTransfusionServices临床适应症先天性或获得性凝血因子缺乏(在不能获得其它常规凝血因子补充制剂时使用)；各种原因所致PT及APTT＞1.5倍正常时间；创面弥漫性渗血；口服香豆素类抗凝剂（如华法林、双香豆素）引起的出血；大量输血：MTP临床适应症AT-Ⅲ减少；严重烧创伤（三度烧伤）；血浆置换异常蛋白血症：多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、异常蛋白血症伴发的多神经病（伴IgG/IgA抗体或IgM抗体）临床适应症自体免疫疾病：格林-巴利综合征；重症肌无力；多发性硬化（急性爆发性、复发性）；炎症性肌病（多发性肌炎和皮肌炎，包涵体肌炎等）；免疫复合物相关疾病：SLE类风湿关节炎；ITP成人急性型效果较好；TTP：非VWF裂解酶缺乏导致的可以用用FFP或病毒灭活血浆，如果为VWF裂解酶导致的TTP考虑使用少冷沉淀血浆；人工肝技术：重症肝炎肝衰竭。输注参考剂量首次10-15ml/kg，维持5-10ml/kg。GBS的血浆置换：在发病后14天内，严重患者总量可以达到250ml/kg，分5-6次使用。重症肌无力早期治疗可以1-1.5倍的血浆容量连续两天，急性加重者的强化治疗可以隔日置换1.5倍血浆容量，连续5-6次。根据不同因子回收率及治疗需要的不同因子用量，调整病毒灭活血浆用量。不能耐受大剂量血浆者应考虑冷沉淀使用。参考文献略肝功能衰竭：常规用法每次200ml，隔日或每周2-3次。重症肝炎患者、肝性脑病患者应进行血浆置换，成人一般2000-3000ml。活动性出血患者禁忌。参考文献略不良反应临床多年的观察报道MB-P：1/8500，过敏反应；未灭活血浆：1/2217,过敏反应,过敏性休克、细菌污染、非溶血性发热反应。TransfusionandApheresisScience38(2008)271–280关于MB（美蓝)

国家药典收录静脉输注药物3,7-双（二甲氨基）吩噻嗪-5-翁氯化物，又称亚甲基蓝、次甲蓝、美蓝、瑞士蓝，无水分子量319.9。临床治疗治疗剂量途径高铁血红蛋白血症1-5mg/kg静脉氰化物中毒5-10mg/kg静脉亚硝酸盐中毒1-2mg/kg静脉

MB-P(去除MB)0.04-0.06mg/L

静脉中国：MB-P中亚甲蓝≤0.3umol/L,MB≤0.1mg/L。国外：过滤去除MB与不过滤MB共存Springe法MB≤0.32mg/LUK:≤30ug/unitMB代谢

Fora70-kgadultreceivingtherecommended15mLperkgofFFP,thisequatestoatotalMBdoseofapproximately33mg,orlessthan1mgina2-kg

prematureinfant.InfusedMBisrapidlyclearedfromthecirculationandmarrowtoanextentthatitspresenceinblood(half-lifeinmanapprox.60min)isdifficulttodetectafterinfusionofMBFFP.Therei