TCNHFA 003-2022 乳及乳制品中牛乳酪蛋白成分定性检测 毛细管凝胶电泳法

ICS67.050CCSX04中国营养保健食品协会团体标准T/CNHFA Qualitativedetectionofbovinemilkcaseininmilkanddairyproducts—Capillarygelelectrophoresismethod2022-06-22发布 2022-07-01实施中国营保健协会发布 发布T/CNHFA 003T/CNHFA 003—2022II前 言本文按GB/T1.1—2020《准工作则 第部分标化件结和起规》规起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本文件由海普诺凯营养品有限公司提出。本文件由中国营养保健食品协会归口。T/CNHFA 003T/CNHFA 003—2022鏈鏈鏈鏈乳及乳制品中牛乳酪蛋白成分定性检测毛细管凝胶电泳法范围限为1%（）。（巴）（GB19489GB/T6682GB/T27403下列术语和定义适用于本文件。3.1毛细管凝胶电泳Capillarygelelectrophoresis(CGE)将起分子筛作用的凝胶聚合物灌注于毛细管中，以高压直流电场为驱动力的对生物大分子进行分析检测的技术。缩略语下列缩略语适用于本文件。kD：kilodaltonSDS：SodiumdodecylsulfateTris：Tris（Hydroxymethyl）aminomethaneGB19489SDS10.1mg。12000。7.5 0.5µL～10µL，10µL～100µL，20µL～200µL，100µL～1000µL。pH计。对于实时荧光PCR检出牛源性DNA成分的样品，可进一步采用毛细管凝胶电泳法检测牛源性酪蛋白成分。β-（SDS）。SDS-MWpH=8，0.2%SDS140mL。SDS-MW100mmo/LTris-HCl（pH9.0），1%SDS50mL。10kD5mg/mL，0.4mL。（10kD～225kD），16mg/mL，100μL。0.1mol/LHCl100mL0.1mol/LNaOH100mLSDS-MW10kD84:1制样（50013510mL5mL15mg/mL蛋白质），其中乳酪样品需在涡旋震荡前超声溶解5分钟。10μL（2.0mL85μL5μLβ-沸水浴样品在100℃水浴中加热10min，冷却样品至室温，快速离心，使液体聚集至管底。上样90μL200μLPCR样品在24h内可以保持稳定。250μm30cm（20cm）；（PDA）220nm；-15kV（484V/cm）；202°C；e) 202°C；5kV，20s；2（100μm×200μm）。30psi下0.1mol/LNaOH碱洗10min，30psi下0.1mol/LHCl酸洗5min，30psi下去离子水冲洗5min，50psi下SDS凝胶灌注10min，5.0kV电压分离10min，采用检测器为光电二极管阵列（PDA）检测器，在4℃条件下运行。50psi下0.1mol/LNaOH碱洗5min，50psi下0.1mol/LHCl酸洗2min，50psi下去离子水冲洗2min，50psi下SDS凝胶灌注10min，5.0kV电压上样20s，5.0kV电压分离30min，采用检测器为光电二极管阵列（PDA）检测器，在4℃条件下检测，获取数据。12.3min±0.5min（10kD、20、35kD、50kD100、150kD225kD）30min12.3min0.