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小鼠感染产气荚膜梭菌及细胞免疫现象检验病原学设计实验小鼠感染产气荚膜梭菌及细胞免疫现象检查第1页试验原理

试验材料试验流程132试验材料2试验材料2试验材料2病原学设计实验小鼠感染产气荚膜梭菌及细胞免疫现象检查第2页试验原理

免疫荧光技术：免疫学基本反应是抗原-抗体反应。因为抗原抗体反应含有高度特异性，所以当抗原抗体发生反应时，只要知道其中一个原因，就能够查出另一个原因。免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体活性荧光色素标识在抗体（或抗原）上，与其对应抗原（或抗体）结合后，在荧光显微镜下展现一个特异性荧光反应。病原学设计实验小鼠感染产气荚膜梭菌及细胞免疫现象检查第3页试验材料病原菌：产气荚膜梭菌悬液，小白鼠：A、B两组器材：注射器、解剖器材、荧光显微镜材料：荧光色素病原学设计实验小鼠感染产气荚膜梭菌及细胞免疫现象检查第4页试验流程结果分析免疫荧光试验取B组腹腔液取A组腹腔液48hB组腹腔注射菌液，A组腹腔注射等量生理盐水吸收接种物预试验病原学设计实验小鼠感染产气荚膜梭菌及细胞免疫现象检查第5页免疫荧光试验目标：1、检验吞噬细胞吞噬功效

2、检验T淋巴细胞转化情况步骤：1、检验吞噬细胞吞噬功效1）用荧光物质标识产气荚膜梭菌抗体，并将此抗体与细菌混合，从而标识产气荚膜梭菌。

2）将从A、B小鼠腹腔取得吞噬细胞分别与已标识产气荚膜梭菌混合培养一定时间3）马上用荧光显微镜观察。观察标本特异性荧光强度普通可用“+/-”表示

4）统计数据病原学设计实验小鼠感染产气荚膜梭菌及细胞免疫现象检查第6页2、检验T淋巴细胞转化情况

1）用不一样荧光物质分别标识Thy-1(CD90)抗体和CD45R/B220（对应mAb为RA3-6B2）抗体

2）将从A、B小鼠腹腔取得细胞分别与已标识Thy-1(CD90)抗体和CD45R/B220（对应mAb为RA3-6B2）抗体混合培养一定时间3）马上用荧光显微镜观察。观察标本特异性荧光强度普通可用“+/-”表示

4）统计数据活化T细胞表面标志T细胞表面标志病原学设计实验小鼠感染产气荚膜梭菌及细胞免疫现象检查第7页结果分析1、检验吞噬细胞吞噬功效B组小鼠特异性荧光强度强于A组B组小鼠吞噬细胞吞噬功效强于A组病原学设计实验小鼠感染产气荚膜梭菌及细胞免疫现象检查第8页结果分析2、T淋巴细胞转化情况B组小鼠特异性荧光强度强于A组B组小鼠T淋巴细胞转化情况强于A组病原学设计实验小鼠感染产气荚膜梭菌及细胞免疫现象检查第9页问题分析1.观察时发觉荧光现象减弱处理方法：经荧光染色标本最好在当日观察原因：普通标本在高压汞灯下照射超出3min就有荧光减弱现象经荧光染色标本最好在当日观察伴随时间延长荧光强度会逐步下降。2.所取组织材料中吞噬细胞数量少处理方法：预试验——寻找含吞噬细胞较多组织

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