TGDP 029-2021 草地贪夜蛾人工养殖技术规程

ICS65.020.01B16

T/GDP广 东 省 农 药 协 会 团 体 标 准T/GDP029—2021草地贪夜蛾人工养殖技术规程TechnicalspecificationsforartificialbreedingofSpodopterafrugiperda2021-4-16发布 2021-4-16实施广东省农药协会 发布T/GDP029—2021T/GDP029—2021II前  言GB/T1.1—20201本标准由广东省农药协会归口。本标准起草单位：华南农业大学、广州市金农科技开发有限公司、广东宇农生物科技有限公司。本标准的主要起草人为：徐汉虹、张志祥、吴吉英子、黄长安、张欣倩、章婉贤、杨文。本标准为首次发布。T/GDP029—2021T/GDP029—2021PAGEPAGE9草地贪夜蛾人工养殖技术规程范围本标准规定了草地贪夜蛾的室内人工养殖技术。本标准适用于草地贪夜蛾卵、幼虫、蛹、成虫的室内人工批量养殖。规范性引用文件GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》术语下列术语和定义适用于本规程。Spodopterafrugiperda(Smith)也称秋黏虫,隶属于鳞翅目Lepidoptera夜蛾科Noctuidaeartificialbreeding人工培育和繁殖动植物的过程。本规程中特指利用人工饲料室内养殖草地贪夜蛾的过程。provenanceofinsect5-10rejuvenation通过一定的方法和技术，使人工养殖数代后发生退化的草地贪夜蛾的各项指标恢复到正常水平的过程。饲养场所饲养室要求饲养室应配备可调节温度、湿度、光照的设备和紫外消毒设备，并能够保温、保湿、通风、透光、消毒紫外消毒在开始规模化饲养前，将饲养室内其它养殖昆虫移出，用75%酒精溶液喷洒柜台、桌面、地面和工具后，进行紫外消毒30-60min。消毒使用的紫外线是C波紫外线，其波长范围是200～280nm，杀菌作用最强的波段是260～265nm6020253.7nm紫外线强度不70u/cm。注意紫外消毒时人不得进入房间，需等关闭紫外后开空调或打开门窗通风30min后方可进入。甲醛熏蒸消毒按每103用5L甲醛和1g高锰酸钾的量，将甲醛和高锰酸钾分别用10mL或200L的烧杯盛装，并用双层纱布盖住盛装甲醛的烧杯口。在相对湿度6524-40h，熏蒸结束后打开所有门窗通风24h，待气体完全散去，再用75%酒精溶液擦拭桌台、工具后方可使用。饲养盒用于草地贪夜蛾初孵至2龄末幼虫的饲养以及卵块、蛹的集中放置，用长15-20cm、宽10-15cm、高5-7cm的透明塑料盒即可，需在盖子上开10-15个直径3mm左右的圆孔。饲养盒使用前应置于高压灭菌锅中121℃高压灭菌20min，或用75%酒精溶液擦拭。饲养管草地贪夜蛾2龄末以后的幼虫需要单管饲养，用高6-9cm、直径3-5cm的透明塑料指形管即可，需在盖子上开2-7个直径3mm左右的圆孔。饲养管使用前应置于高压灭菌锅中121℃高压灭菌20min，或用75%酒精溶液浸泡1min后晾干。饲养笼草地贪夜蛾成虫的饲养需用到干净的长40-80cm、宽40-60cm、高40-60cm的饲养笼。饲养笼其中一个侧面设置一个可活动的粘贴门（长10-20cm、宽10-20cm），以方便放置玉米叶片、替换食物和收集卵块，其余各侧面为80-100目纱网，顶部和底部为金属板或木板。一个饲养笼可饲养40-80头成虫。饲养笼使用前用75%酒精溶液擦拭。饲养筒草地贪夜蛾成虫饲养量不大的情况下，可将干净的A4纸卷成纸筒（高21cm、直径9cm），并在两端盖上塑料培养皿固定，竖直放置。每个饲养筒可放置1-3头雄蛹和1-3头雌蛹，羽化后受精交配产卵。其他工具、仪器和其他相关用品成虫饲料器皿1-210%蜂蜜水的脱（铺满培养皿底部移动工具不可直接用手接触虫体，可用消毒后的镊子或毛笔移动卵块、幼虫和蛹。毛笔或镊子使用后用75%酒精溶液浸泡1min121℃高压灭菌仪器电子天平、高速打碎机、高压灭菌锅、超净台、电磁炉、锅等。其他用品人工饲料配方成虫人工饲料（10蜂蜜水脱脂棉）草地贪夜蛾蛹羽化将脱脂棉浸入10%蜂蜜水中，均匀地浸透脱脂棉，以拿起脱脂棉不滴液为宜。幼虫人工饲料饲料配方表1 草地贪夜蛾人工饲料配方表成分用量成分用量黄豆粉(g) Soymealpowder125肌醇(g) Inose0.1玉米粉(g) Maizepowder225山梨酸(g) Sorbicacid6酵母粉(g) Yeastpowder40氯化胆碱(g) Cholinechloride3琼脂(g) Agar30复合维生素(g) Multi-vitamins7干酪素(g) Casein20对羟基苯甲酸甲酯(g) Methylparaben7.5胆固醇(g) Cholesterol0.6蒸馏水(ml) Distilledwater1500饲料制作按表1配方分别称取黄豆粉和玉米粉于饲料盆中,加入500mL准确称取30g琼脂于锅中，加入1000mL蒸馏水，在电磁炉上加热并匀速地搅拌。待琼脂在水中完全溶化呈透明状时停止加热,加入上一步骤中已灭菌的饲料匀速搅拌。60cm厚的饲料，盖上盖子，并用保鲜膜封住盖子上的圆孔，放4℃冰箱冷藏，作为初孵幼虫的饲养场所备用。饲料从冰箱取出后应先等其温度恢复至室温后再使用。人工养殖过程养殖条件16h∶8h、光照强度8000lx。卵的集中放置块，沿着卵块边缘将玉米叶片、保鲜膜或褶皱红色塑料纸剪下，用镊子夹住边缘，将卵块置于低浓度（0.5%-1%）的次氯酸钠水溶液中浸泡5s左右取出，用滤纸吸干表面，置于培养皿中，在干燥、阴凉、幼虫饲养初孵幼虫的饲养2草地贪夜蛾幼虫生长至2龄末以后需单管饲养，用消毒的毛笔分装到消毒的饲养管中，每管一头，并放置一块长2-3cm、宽1-2cm、高3-4cm的饲料块，盖口封上一层高温灭菌的厨房纸，确保厨房纸完全盖住盖口，盖上已开好圆孔的盖。持续喂养，直到老熟。蛹的集中放置待老熟幼虫化蛹，隔2天再将蛹挑出，用4%甲醛水溶液浸泡10s左右，进行体表消毒，再用灭菌水将蛹体洗净后放置于塑料培养皿中，于超净台上室温将蛹晾干。晾干后放入消毒的饲养盒中，每盒放20-40头。蛹应平铺盒底，不能堆放。成虫的饲养待蛹变为红褐色即将羽化时，将1-2个盛装蛹的饲养盒放入饲养笼内待其羽化。羽化前先在饲养笼里放入2-3个装有吸足10%蜂蜜水脱脂棉的培养皿（脱脂棉铺满整个培养皿底部），供成虫食用。在开始羽化后的前5-6天，每天换入长约10cm的新鲜玉米叶片、保鲜膜或褶皱的红色塑料纸供成虫产卵。注意每天更换一次糖水和玉米叶片、保鲜膜或褶皱的红色塑料纸，收集卵块并清理死成虫。复壮26℃±0.5655%、光周期L∶D=16h∶8h、光照强度8000lx的条件下培育，孵化后选择体壮、个头大、活动能力强的5-6龄幼虫作为种虫，淘汰体瘦、个头小、活动能力弱或反应迟钝的幼虫、蛹和成虫。附 录 A（资料性附录）草地贪夜蛾形态鉴别特征卵图A.1 草地贪夜蛾卵（章婉贤，2019）幼虫草地贪夜蛾1龄幼虫体色为黄色或绿色，头部青黑色，体长1.7mm左右。2龄幼虫头部由青黑色变为24个长有刚毛的黑色或黑褐色斑点，从3龄开始，第8、9腹节背面的斑点显著大于其他各节斑点，并表现出特有的排8腹节49腹节的4Y”形纹路。图A.2 草地贪夜蛾幼虫不同龄期《草地贪夜蛾识别与应急防治技术挂图，2019）图A.3 草地贪夜蛾幼虫（马千里，2019）蛹14-18mm，宽2至7腹节气门呈椭圆形，开口向后方，围气门片黑色，第8腹节两侧气门闭合。第5至7腹节可自由活动，后缘颜色较深，第4至7腹节前缘具磨砂状刻点。腹部末节具两根臀棘，臀棘基部较粗，分别向外侧延伸，呈“八”字形，臀棘端部无倒钩或弯曲。图A.4 草地贪夜蛾蛹《草地贪夜蛾识别与应急防治技术挂图，2019）成虫16-8mm10.-