山东大学2023年-2023年学年第1学期生物技术《现代分子生物学》考试试卷(附答案)

第第16页2023—20231学期《现代分子生物学》考试试卷〔A卷〕院/系 年级 专业 姓名 学号考生答题须知全部题目答题答案必需做在考点发给的答题纸上，做在本试题册上无效。请考生务必在答题纸上写清题号。评卷时不评阅本试题册，答题如有做在本试题册上而影响成绩的，后果由考生自己负责。答题时一律使用蓝、黑色墨水笔或圆珠笔作答〔画图可用铅笔，用其它笔答题不给分。答题时不准使用涂改液等具有明显标记的涂改用品。一、单项选择题〔共10题，每题2分，共20分。每题的备选项中，只有一个最符合题意〕1．以下关于基因表达调控的论述正确的选项是〔 。A．在原核生物中，阻遏物的调整功能只能发生在RNA聚合酶结合启动子之前B．在原核生物中，由激活物调控的基因往往需要下游调控因子C．大肠杆菌的CAP蛋白可以调控很多个基因的表达D．原核生物核糖体蛋白的表达调控主要发生在转录水平2．原核生物基因启动子中－10区与－35区的最正确距离是〔 。[中山大学2023研]A．＜15bp B．16～19bpC．20bp D．0＞20bp信号识别颗粒〔SRP〕的作用是〔 。[河北大学2023研]A．指导RNA拼接B．在蛋白质的共翻译运转中发挥作用C．指引核糖体大小亚基结合D．指导转录终止4．蛋白质翻译后的修饰主要包括〔。A．乙酰化B．糖基化C．磷酸化D．上述各种修饰操纵子模型可以成功地说明基因转录的调控机制，照此假说，实现对基因活性起调整作用的是〔 。诱导酶B．阻遏蛋白C．RNA聚合酶D．DNA聚合酶以下关于乳糖操纵子的调控作用表达错误的选项是〔 。cAMP可与CRP结合成复合物cAMP-CRP复合物结合在启动子前方葡萄糖充分时，cAMP水平不高D．葡萄糖和乳糖并存时，细菌优先利用乳糖E．葡萄糖和乳糖并存时，细菌优先利用葡萄糖7．真核基因常常被断开〔 。A．反映了真核生物的mRNA是多顺反子B．由于编码序列外显子被非编码序列内含子所分隔CDNA于不同的染色体上D．说明初始转录产物必需被加工后才可被翻译E．说明真核基因可能有多种表达产物，由于它有可能在mRNA加工的过程中承受不同外显子重组方式以下哪种是终端分化细胞？〔 。A．神经元B．骨髓干细胞C．肝细胞D．表皮细胞有关原核生物EF-Ts因子，错误的选项是〔 。A．是一个翻译起始因子B．是一个翻译延长因子C．参与EF-Tu的再生D．BC都正确以下有关SD序列的说法，哪个是正确的？〔 〕A．SD序列对原核生物和真核生物的翻译都是重要的B．SD序列相对于起始密码子AUG而言，是与方向和位置都无关的C．SD序列有时也会隐蔽在mRNA的茎一环构造中，对翻译起到抑制作用D．原核生物中的编码基因的翻译共同受到一个上游SD序列的掌握二、填空题〔5210分〕大肠杆菌DNA聚合酶I经酶切后，得到大小片段，其中大片段具有 酶活性和 酶活性，小片段具有 酶活性。对于低丰度mRNAcDNA克隆的分别，一种方法是构建的cDNA文库，另一种方法是。在大肠杆菌中，cAMP的浓度受到葡萄糖代谢的调整假设将细菌放在缺乏碳源的培育基中培育，细胞内cAMP浓度就高；假设在含葡萄糖的培育基中培育，cAMP的浓度就 ；假设培育基中只有甘油或乳糖等不进展糖酵解途径的碳源，cAMP的浓度会 。因此推想糖酵解途径中位于葡糖-6-磷酸与甘油之间的某些代谢产物是腺苷酸环化酶活性的抑制剂。人X染色体具有一个重要的基因 ，该基因只在失活的X染色体上表达，而不在活性的X染色体上表达。在活性X染色体上该基因总是 。而失活X染色体上该位点都是 的。失活的X染色体上其他绝大多数基因都处于关闭状态，DNA序列都呈高度 。5．RNA分子结合氨基酸和识别mRNA的两个构造区域分别称为和。三、是非题〔共5题，每题2分，共10分。正确的用T表示，错误的用F表示〕1．依据某一感兴趣蛋白质的序列、抗原性以及配基结合性质制备探针，可从DNA文库筛选到相应的基因。〔 〕[华南理工大学2023研]2．基因工程的一个必需步骤是利用限制性内切核酸酶切割目的基因使其产生黏性末端，然后连接到载体上。〔 〕[四川大学2023研]在真核生物中，双链DNA的交换是一种普遍现象，而在原核生物中，双链DNA的重组交换是很少见的。〔 〕阻遏作用和诱导作用的解释都是以乳糖操纵子学说为根底。〔 〕真核生物基因表达的调控单位是操纵子。〔 四、简答题〔共5题，每题6分，共30分〕1．举例说明什么是C值悖论。阐述同源重组的机理。说明基因克隆的一种方法。怎样将一个平末端DNA片段插入到EcoRⅠ限制位点中去？为什么被RNA聚合酶Ⅲ识别的启动子不常见？五、论述题〔21530分〕你对应用RACE技术克隆cDNA53′末端的原理有怎样的了解？[山东师范大学2023研]试述DNA的主要理化性质。2023—20231学期《现代分子生物学》考试试卷〔A卷〕标准答案一、单项选择题〔10220分。每题的备选项中，只有一个最符合题意〕12345678910CBBDBDAADC二、填空题〔5210分〕1．5＇→3＇聚合；3＇→5＇外切；5＇→3＇外切富含目的基因序列；扣除杂交低；很高Xist；甲基化；去甲基化；甲基化受体臂；反密码子臂三、是非题〔5210分。正确的用TF表示〕1 2 3 4 5F F T T F四、简答题〔5630分〕1．C值即一种生物的单倍体基因组的DNA总量。它是每一种活生物的一共性质。C值悖论指物种的C值与生物构造或组成的简单性或生物在进化上所处地位的凹凸不全都的现象，C值与其进化简单性之间无严格对应关系。基因组中编码序列的选择压力大，而真核生物中不编码蛋白的序列很多，发生变异的概率增加，因此基因组大小会消灭很大的变化，在长期的进化过程中，基因组的大小不能完全代表生物进化程度。举例如下：①人类和两栖类有格外接近的C值，说明并非越高等的生物遗传简单性越高。②两栖类生物中最小的基因组缺乏，，最大的则达，家蝇和果蝇，二者的C6倍。则说明表现简单度没有明显变化的肯定物种中，C值却有很大变化。同源重组是指发生在DNA的同源序列之间的重组，真核生物的非姐妹染色单体的交换，细菌的转化、转导和接合，噬菌体的重组等都属于这种类型。同源重组要求较大的DNA片段进展交换，它们的序列一样或接近一样。同源重组的机理是：两个双链DNA分子配对，同源区发生链的断裂；断开的单链穿插连接，形成异源双链DNA；分支点迁移：两个双螺旋形成的穿插连接以拉链式效应集中，即链交换沿双链滑动，形成异源双链区的杂种DNA长片段；Holliday中间体的形成；连接分子的拆分：依据切开方向，Holliday中间体的拆分可产生两种螺旋，亲体双螺旋和重组双螺旋。无论哪种拆分方式，链交换后总会在两条DNA分子上留下一段异源双链区，但侧翼区域的重组过程不肯定会同时发生。基因克隆是70年月进展起来的一项具有革命性的争论技术，可概括为∶分、切、连、转、选。最终目的在于通过相应技术手段，将目的基因导入寄主细胞，在宿主细胞内目的基因被大量的复制。基因克隆的方法有多种，常见的基因克隆的方法有：基因捕获技术，功能克隆，定位克隆，差异克隆等。其中差异克隆的方法如下：差异克隆是利用来源不同DNA之间的表现度差异来分别差异表达基因的功能克隆方法。在任何cDNAcDNA去除其次个来源中共同的RNA，留下独特的RNA用于文库构建。将一个平末端DNA片段插入到EcoRⅠ限制位点中，操作步骤如下：将平末端片段利用甲基化酶处理，保护其中的EcoRⅠ识别序列〔假设平末端序列中不含有EcoRⅠ位点，则此步骤省略〕；化学合成一些长为10bp含有EcoRⅠ识别位点的短的DNA片段，然后与带克隆片段两端连接起来；；利用EcoR工切割该片段，产生带有EcoRⅠ黏性末端的片段；通过DNA连接酶的作用，将处理后的片段插入到EcoRⅠ限制位点中。5．被RNA聚合酶Ⅲ识别的启动子不常见的缘由如下：RNA聚合酶Ⅲ负责转录一类具有转录物不编码蛋白质和基因通常以多拷贝存在两种特征基因。RNA5SrRNAtRNA基因。与其他基因的启动子不同，在争论5SrRNA550对核苷84＋50到＋845SrRNA基因的启动子。更少见的是，tRNA基因的启动子被分成A和B两局部，它们之间的序列缺失不影响启动子的效率。五、论述题〔21530分〕RACE全称是rapidamplificationofcDNAendcDNA末端快速扩增法。RACE是用于从cDNA片段扩增全长基因的方法，依据序列设计基因片段内部特异引物，由该片段向外侧进展PCR扩增得到目的序列。RACE技术在cDNA53′端RNA5′端的方法5′RACE33′RACE。原理如下：〔1〕5′RACE的原理5′端RNA寡聚接头的局部序列和基因特异的3′端反向引物进展PCR5′端序列。①在反转录酶的作用下，用基因片段内部特异性引物〔GSP1〕cDNA第一条链的合成。②用RNase混合物降解模板mRNA并纯化已合成的cDNA的第一条链。③用末端转移酶在cDNA3′端参加连续的dCTP，形成oligo〔dC〕尾巴。④以连有oligo〔dC〕的锚定引物AP和基因片段内部特异的引物GSP2进展巢式PCR扩增，以5′端片段。〔2〕3′RACE的原理53′端寡dT下游局部序列为引物进展PCR3′端序列。①在反转录酶的作用下，以连有可以和mRNA3′多核苷酸末端配对的oligo〔dT〕的锚定引物AP起始cDNA第一条链的合成。②用RNase降解模板mRNA。③用锚定引物AP和基因片段内部特异引物GSP进展PCR3可用巢式PCR的方法连续进展检测和扩增。DNA的主要理化性质如下：核酸的带电荷性质①无论是DNA还是RNA，核苷酸链内既有酸性的磷酸基又有碱性的含氮杂环碱基，因此核酸是两性电解质。②由于磷酸基的酸性较强，核酸通常表现为酸性。③在中性或碱性溶液中，核酸带负电荷，在外加电场作用下向阳极移动。④核酸的带电荷性质可用于分别分子质量大小不同的核酸。带负电荷的核酸与带正电荷的金属离子成盐，在有乙醇或异丙醇存在时核酸即可从溶液中沉淀析出。⑤常用氯化钠、乙酸钠、乙酸钾或乙酸铵等盐溶液来制备核酸。核酸的高分子性质①核酸是分子质量很大的高分子化合物，因此核酸溶液具有较大的黏性。②核酸溶液的黏性与分子的不对称性有关，分子不对称性愈大，其黏度也就愈大，不规章分子比球形分子溶液的黏度大，线性分子溶液的黏度更大。③DNA107，因此极稀的DNA溶液也有较大的黏度。④RNA溶液的黏度较DNA小。当核酸溶液在受热或酸碱等因素作用下发生变性时，分子不对称性变小，溶液黏度下降。因此可用黏度测定作为DNA变性的指标。核酸的紫外吸取①核酸分子的碱基中含有的共轭双键具有吸取紫外线的性质。①核酸分子的碱基中含有的共轭双键具有吸取紫外线的性质。280nm260nm。③利用核酸的紫外吸取特性可鉴别核酸样品中的蛋白质杂质，对核酸进展定性、定量分析。也可以利用核酸的最大紫外