标准解读
《NY/T 577-2002 山羊关节炎/脑炎琼脂凝胶免疫扩散试验方法》是一项农业行业标准,旨在规定用于检测山羊关节炎/脑炎(CAE)病毒抗体的琼脂凝胶免疫扩散试验的具体操作流程。该标准适用于兽医实验室中对山羊血清样品进行CAE病毒感染状态的初步筛查。
根据标准内容,首先需要准备的是试验材料与试剂,包括但不限于纯化的CAE抗原、待测血清样本、以及作为对照使用的阳性血清和阴性血清等。接着,在制备好的琼脂平板上按照特定模式打孔,并将不同类型的样本分别加入到相应的孔洞中。通过适当条件下培养后,观察并记录各孔之间是否形成沉淀线及其特征,以此来判断样品中是否存在针对CAE病毒的特异性抗体。
此外,标准还详细描述了如何正确配置琼脂凝胶、如何处理血清样品以去除可能干扰实验结果的因素、以及如何准确地读取和解释实验结果等内容。对于实验过程中可能出现的各种情况,如交叉反应现象等也给予了相应指导说明。
本标准为从事相关研究或工作的人员提供了科学规范的操作指南,有助于提高检测准确性及可靠性。
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- 现行
- 正在执行有效
- 2002-08-27 颁布
- 2002-12-01 实施
文档简介
1C5.11.220B41NY中华人民共和国农业行业标准NY/T577-2002山羊关节炎/脑炎琼脂凝胶免疫扩散试验方法Agargelimmunodiffusiontestforcaprinearthritis/encephalitis2002-08-27发布2002-12-01实施中华人民共和国农业部发布
NY/T577-2002山羊关节炎/脑炎(caprinearthritis/encephalitis,简称CAE)是由山羊关节炎/脑炎病毒(CAEV)引起的山羊的一种慢性病毒性传染病,其主要特征是成年的羊垦缓馒发展的关节炎,间或伴有间质性肺炎和间质性乳房炎。羔羊表现为上行性麻牌的神经症状,被世界动物卫生组织WorldOrganizationforAnimalHealth(英)OfficeInternationaldesEpizooties(法),TEJ列为B类疾病,我国农业部把该病列为二类动物疫病。本病的诊断方法为琼脂凝胶免疫扩散(ACID)试验,是根据(IE《诊断试验的疫苗标准手册》2000版)和我国的实际情况制定的。技术上与OIE保持一致,该法简便、特异,在国际贸易中为指定的诊断方法本标准由农业部畜牧鲁医局提出。本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口。本标准起草单位:中国农业科学院哈尔滨鲁医研究所、新疆畜牧科学院本标准主要起草人:相文华、王治才。
NY/T577-2002山羊关节炎/脑炎琼脂凝胶免疫扩散试验方法1范围本标准规定了山羊关节炎/脑炎琼脂凝胶免疫扩散试验的技术要求。本标准适用于山羊关节炎/脑炎的诊断和检疫脂凝胶免波扩做试验2.1材料准备2.1.1试剂及器血:氯化钠(NaCI),叠氮钠(NaN.),1mol/l.三羟甲基氨基甲烧-盐酸(Tris-HCI)琼脂精,移液器(50L~100%I.)及吸嘴,外径7mm薄壁金属打孔器,直径9.5cm平咀。2.1.2抗原、标准阳性血清、阴性血清。2.2操作方法2.2.1琼脂精凝胶板制备称琼脂糖1.0g、氟化钠8g暨100ml.三角瓶中,加入pH8.00.05mol/.Tris-HCl100ml.隔水煮沸至全部溶化。将其自然冷却至60C左右时.倒人平血。每只平血加15mL.·待其凝因后加盖,置湿盒内·放4(待用。2.2.2打孔将琼脂板放于打孔模式图上(见图1),用打孔器按图样打梅花型孔,孔径7mm,孔距2.5mm.打完孔后,挑出孔中琼脂块,再用溶化的琼脂封底。图1AGID打孔模式图2.2.3加样按图上中心孔加入抗原,2、4、6孔滴加阳性血清,1、3、5孔滴加被检血清,加满样品后,置37℃温金内。2.3结果判定2.3.1于24h、48h及72h观察是香有沉淀线出现,终判时间为72h。
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