食品中维生素c测定

课程名称食品理化检测技术授课班级营养1431授课时间2016.4.20授课时数2本次内容维生素c的测定教具多媒体教学目标能力（技能）目标知识目标1.能配制维生素c标准溶液；2.能用2,6-二氯靛酚法进行维生素c的测定；3.能绘制标准曲线。了解维生素c对人体的作用，分类以及常见食物维生素c含量的高低；掌握维生素c的测定原理，实验过程。重点

维C测定原理难点

样品处理、标准曲线制作能力训练方式方法讲解、问答、互动教学环节时间安排复习：5min；讲解、互动：75min小结：5min；看书巩固知识点：5min课外作业预习课堂考勤47参考资料《食品分析与检验技术》《食品理化检测技术》食品中维生素测定维生素缺乏会引起哪些疾病？坏血病：皮肤、牙龈以及黏膜上的出血点维c含量：橘肉：35mg/100g橘皮：>216mg/100g不同维生素在人体作用每100g食品中维生素c含量维c含量：橘肉：35mg/100g橘皮：>216mg/100g一、概述维生素C：又名抗坏血酸、强还原性维生素分类：脂溶性维生素水溶性维生素维生素含量测定方法液相色谱法1比色法2氧化还原法（2,6-二氯靛酚法，碘量法））3荧光法：紫外线照射下、硫色素发出荧光、荧光强度与硫色素量成正比4一、高效液相色谱

色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。液相色谱仪结构图二、2,6二氯靛酚滴定法2,6二氯靛酚(染料）

颜色受存在状态和外界环境影响。

存在状态氧化态：深蓝色还原态：无色外界环境酸性：浅红色碱性：深蓝色1.实验原理

用蓝色的碱性染料标准溶液,对含维生素C的酸性浸出液进行氧化还原滴定,染料被还原为无色,当到达滴定终点时,多余的染料在酸性介质中则表现为浅红色,由染料用量计算样品中还原型抗坏血酸的含量。还原型脱氢型二酮古乐糖酸水解新鲜食品主要以还原型存在当抗坏血酸全部被氧化后，稍多加一些染料，使滴定液呈淡红色，即为终点。VC还原型脱氢VC氧化型2,6-二氯酚靛酚氧化型(酸性溶液中,呈粉红色)2,6-二氯酚靛酚还原型(无色)2.仪器、试剂（1）1%，2%的草酸（乙二酸：HOOC—COOH）（2）维生素C标准溶液（3）2,6-二氯靛酚棕色瓶保存于冰箱内，需标定后使用。标定维生素c的浓度；计算滴定度（2,6-二氯靛酚相当于维生素c的量）（4）6%的KI溶液0.6g碘化钾溶解于9.4g水中。

（5）0.001mol/L的KIO3若配制200ml上述浓度的碘酸钾，需称量碘酸钾的量为多少？MKIO3=214m=cvM=0.001×200×10-3×214=0.0428g3.实验步骤（5min）加入适量白陶土震荡、静止、过滤、收集滤液。脱色样品50g，加入2%的草酸100ml，捣碎，过滤。提取

吸取5ml滤液用2,6-二氯二靛酚滴定至粉红色。滴定

空白试验应用什么代替样品？空白用2%的草酸溶液5ml代替样品，用燃料滴定至粉红色。4.计算维生素c含量（mg/100g）：V1：样品消耗燃料的量；V2：空白样品消耗燃料的量；T:滴定度；m：滴定时滤液中样品量。注意事项2012样品应在草酸溶液中处理，避免维c氧化2013草酸可换做其他酸，如盐酸、乙酸等。2014样品处理中若有泡沫需用辛醇、硅油消泡。2015试剂配制需用重蒸馏水经过两次蒸馏的水，出去杂质三、2,4-二硝基苯肼法原理：

活性炭氧化样品中还原型抗坏血酸为脱氢抗坏血酸、与显色剂2,4-二硝基苯肼生成红色脎、根据脎在硫酸溶液中含量与抗坏血酸含量成正比进行比色测定二、试剂2012

硫酸溶液配制20132,4-二硝基苯肼：遇明火极易燃烧爆炸。干燥时经震动、撞击会引起爆炸，过滤2014硫脲：空气中易潮解、遇明火可燃2015活性炭处理：盐酸回流、过滤、烘干01除去可溶性无机物、有机物三、实验步骤样品制备25ml样品滤液2g活性炭振摇1min、过滤、滤液10ml10ml硫脲取4ml稀释液1mi苯肼溶液37℃水浴3h试管放入冰水中5ml85%硫酸30min500nm测波长维C易被氧化、酸性介质中速度能得到缓解活性炭起氧化作用标准曲线

待测物质浓