第21讲 基因工程

第21讲基因工程考情分析:

(2)考查内容:

①基因工程中三种工具。

②基因工程操作四步曲。

③基因工程成果——转基因生物实例

及安全性讨论。

(3)考查形式:

将选修与必修结合，既可出简答题也可出选择题(1)考查力度：占分比重相对稳定，占20℅：18分

一、基因工程的基本工具[判断正误](1)限制酶只能用于切割目的基因。(

)(2)限制酶切割DNA分子具有特异性。(

)(3)限制酶切割DNA后可产生黏性末端和平末端两种类型。(

)(4)DNA连接酶能将两碱基间通过形成氢键连接起来。(

)(5)E·coliDNA连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端。(

)(6)质粒是小型环状DNA分子，是基因工程常用的载体。(

)(7)载体的作用是携带目的基因导入受体细胞中,使之稳定存在并表达。(

)×√√××√√二、基因工程的操作程序[填空]基因文库PCR技术启动子标记基因农杆菌转化法花粉管通道法显微注射DNA分子杂交分子杂交抗原—抗体杂交个体生物学水平三、蛋白质工程[判断正误](1)蛋白质工程可按照人的意愿生产出自然界中不存在的蛋白质。(

)(2)人类主要通过直接改造蛋白质的结构来生产新的蛋白质。(

)(3)蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程。(

)√×√

考点1核心概念——基因工程的概念及工具1．基因工程的概念理解:⑴操作环境：_____________________体外——关键步骤“基因表达载体的构建”的环境。⑵优点:①与杂交育种相比：____________________________________________________________________克服了远缘杂交不亲和的障碍。②与诱变育种相比：________________________________________________________________定向改造生物遗传性状。⑶操作水平：_____________________________DNA分子水平。⑷原理：__________________________基因重组。⑸本质：___________________________________________________________________________________________甲(供体：提供目的基因)乙(受体：表达目的基因)，即基因未变，合成蛋白质未变，只是合成场所的转移。2.基因工程的基本原理和理论基础概括如下图:

提醒

若题目强调“目的基因”的表达过程，则只包括

“转录和翻译”两个过程，不包括目的基因的复制。

3．操作工具:⑴限制性核酸内切酶——“分子手术刀”①来源：__________________________________________________________________________________________主要是从原核生物中分离纯化出来的。②化学本质：______________________________蛋白质。③催化作用：________________________________________________________________________________可用于目的基因的切割和质粒的切割。④作用特点：———————————————————————————————————————————特异性。即:限制酶可识别特定的脱氧核苷酸序列，

切割特定位点。⑤切割方式________________错位切：平切：产生两个相同的粘性末端形成平末端⑥识别序列的特点：呈现碱基互补对称，无论是奇数个碱基还是偶数个碱基，都可以找到一条中心轴线，如图，中轴线两侧的双链DNA

上的碱基是反向对称重复排列的。如:当限制酶在它识别序列的中轴线两侧将DNA的两条链分别切开时，产生的是黏性末端。而当限制酶在它识别序列的中轴线处切开时，产生的则是平末端。高考警示：①切割的化学键为磷酸二酯键。

②在切割目的基因和载体时要求用同一种限制酶，目的是产生相同的黏性末端。

③将一个基因从DNA分子上切割下来，需要切两处，同时产生4个黏性末端。

④切割质粒需使用限制酶1次，切割目的基因则需要使用相同的限制酶2次。因为质粒是环状DNA，而目的基因在DNA分子链上。⑤不同DNA分子用同一种限制酶切割产生的黏性末端都相同，同一个DNA分子用不同的限制酶切割，产生的黏性末端一般不相同。(2)DNA连接酶——“分子缝合针”常用类型E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶来源大肠杆菌T4噬菌体功能连接黏性末端连接黏性末端或平末端结果恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键

DNA连接酶与DNA聚合酶的比较：DNA连接酶DNA聚合酶作用实质都是催化两个脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键是否需要模板不需要需要连接DNA链双链单链作用过程在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键将单个核苷酸加到已存在的核酸片段的3′端，形成磷酸二酯键作用结果将两个DNA片段连接成重组DNA分子合成新的DNA分子

(3)基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”

最常用载体：质粒（其本质是小型DNA

分子，不是细胞器）

其他载体：λ噬菌体的衍生物、

动植物病毒等①类型②功能：将目的基因导入受体细胞。③应具备条件：a.能在宿主细胞内稳定保存并大量复制；b.有一个至多个限制酶的切割位点，以便于与外源基因连接；c.有特殊的遗传标记基因，供重组DNA的鉴定和筛选。高考警示：①一般来说，天然载体往往不能满足人类的所有要求，因此人们根据不同的目的和需要，对某些天然的载体进行人工改造。②常见的标记基因有抗生素抗性基因、产生特定颜色的表达产物基因、发光基因等。③作为载体必须具有一个至多个限制酶切点，而且

每种酶的切点最好只有一个。因为某种限制酶只能识别单一切点，若载体上有一个以上的酶切点，则切割重组后可能丢失某些片段，若丢失的片段含复制起点区，则进入受体细胞后便不能自主复制。

一个载体若只有某种限制酶的一个切点，则酶切后既能把环打开接纳外源DNA片段，又不会丢失自己的片段⑤基因工程中的载体与细胞膜上物质运输的载体不同，基因工程中的载体是DNA分子，能将目的基因导入受体细胞内，膜载体是蛋白质，与细胞膜的通透性有关。⑥质粒能自我复制，既可在自身细胞、受体细胞内，也可在体外。④质粒DNA分子上限制酶切割位点的选择必须保证至少有一个标记基因是完整的，如果标记基因全部被切开则不便于鉴定与选择。

跟踪训练1

关于DNA重组技术基本工具的说法正确的是(

)A．DNA连接酶只能连接双链DNA片段互补的黏性末端。

B．细菌细胞中含有的限制酶不能对自身DNA

进行剪切。

C．限制酶切割DNA后一定能产生黏性末端

D．天然的质粒就可以用来作为载体B

跟踪训练2(2010·浙江卷2)在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，如下操作错误的是(

)

A.用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸

B.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体

C.将重组DNA分子导入烟草原生质体

D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞A考点2以流程图解决知识内在联系

——基因工程的操作步骤

1．基因工程的图解

⑴抗虫棉的培育过程:⑵基因工程技术生产凝乳酶的过程:2．基因工程的操作程序分析:⑴目的基因的获取途径:①从自然界已有的物种中分离出来，如:从基因组文库或cDNA文库中获取目的基因。只含某种生物的部分基因，利用mRNA反转录成DNA；无启动子、无内含子。基因组文库:含该种生物的全部基因，根据目的基因的核苷酸序列、功能、在染色体的位置来获取。用限制酶切割生物的DNA。cDNA文库：基因文库中不是直接保管相应基因，基因文库中的基因保存在受体菌中。②PCR扩增技术与DNA复制的比较：PCR技术DNA复制相同点原理DNA复制(碱基互补配对)原料四种游离的脱氧核苷酸条件模板、ATP、酶、原料、引物不同点解旋方式DNA在高温下变性解旋解旋酶催化场所体外复制(PCR扩增仪)主要在细胞核内酶热稳定的DNA聚合酶(Taq酶)细胞内含有的DNA聚合酶结果在短时间内形成大量的DNA片段形成整个DNA分子③人工合成目的基因：a.化学合成法：

蛋白质――→氨基酸序列――→RNA碱基序列――→DNA碱基序列―→用4种脱氧核苷酸

人工合成目的基因

分析推测推测b.反转录法：分离出供体细胞mRNA――→单链DNA――→合成目的基因

逆转录酶DNA合成酶基因比较小，核苷酸序列已知。合成的目的基因无启动子、终止子、内含子⑵基因表达载体的构建——最核心步骤①基因表达载体的组成：启动子：启动子(DNA片段)≠起始密码子(RNA)终止子(DNA片段)≠终止密码子(RNA)温馨提示：

目的基因：终止子：标记基因：为RNA聚合酶识别和结合位点，驱动转录mRNA使转录终止的DNA片段②基因表达载体的构建方法：

提醒：该过程把三种工具(两种工具酶、一种载体)全用上了，是最核心、最关键的一步，在体外进行。几个切口？几个粘性末端？⑶将目的基因导入受体细胞：生物种类植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法农杆菌转化法显微注射技术感受态细胞法受体细胞体细胞受精卵原核细胞转化过程将目的基因插入到Ti质粒的T—DNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的染色体DNA上→表达将含有目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物Ca2＋处理细胞→感受态细胞→重组表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子①唯一不涉及到碱基互补配对的操作步骤。

②将微生物作为受体细胞主要原因是个体微小，代谢旺盛，繁殖速度快，获得目的基因产物多。

③植物细胞还可用基因枪法和花粉管通道法。温馨提示：

⑶将目的基因导入受体细胞：⑷目的基因的检测和鉴定：DNA跟踪训练3下面是获得抗虫棉的技术流程示意图。有关叙述错误的是(

)A．重组质粒构建过程中需要限制性内切酶和

DNA连接酶B．图中愈伤组织分化产生的再生植株的基因型一般都相同C．卡那霉素抗性基因中含有相关限制性内切酶酶的识别位点D．转基因抗虫棉有性生殖的后代不能稳定保持抗虫性状（）C跟踪训练4如图为获得抗虫棉的技术流程。在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因(kanr)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。请据图回答：

⑴A过程所用的载体是＿＿＿＿＿＿，需要的工具酶有＿＿＿＿＿＿________和＿＿＿＿＿＿。

⑵C过程的培养基除含有必需的营养物质、琼脂和激素外，还需加入＿＿＿＿＿＿。含kanr质粒限制性核酸内切酶酶DNA连接酶卡那霉素⑶由图中离体棉花叶片组织获得转基因抗虫植株可采用＿＿＿＿＿＿技术，该技术所依据的原理是＿＿＿＿＿＿＿。⑷如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用放射性同位素(或荧光分子)标记的＿＿＿＿＿＿作为探针。⑸如果从个体生物水平来鉴定，D过程可用的最简单检测方法是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。植物组织培养植物细胞全能性抗虫基因让棉铃虫食用再生植株(进行棉铃虫接种实验)考点3关注热点问题——基因工程的应用:1.抗虫棉的培育（1）目的基因：Bt毒蛋白基因。（2）抗虫的原理：②蛋白酶抑制剂、淀粉酶抑制剂：分别抑制相应酶活性，影响消化；③植物凝集素：为糖蛋白，与虫肠黏膜结合，影响营养物质的吸收和利用。

①Bt毒蛋白水解成多肽与虫肠上皮细胞结合，形成穿孔，细胞肿胀裂解致死；注：毒性来自Bt毒蛋白水解后的多肽。（3）受体细胞受精卵→

体细胞→正常发育组织培养（4）方法：花粉管通道法农杆菌转化法基因枪法。注：a.抗虫但不抗病毒、细菌、真菌等；

b.培育抗虫作物的优点：减少环境污染、降低生产成本；

c.不同抗虫基因作用机理不同；

d.Bt毒蛋白基因来自苏云金芽孢杆菌。2.动物反应器（1）外源基因：药用蛋白基因。（2）表达条件：药用蛋白基因＋乳腺蛋白基因(膀胱内表达相应基因)＋启动子。（3）受体细胞：牛、羊哺乳动物等的受精卵。（4）方法：显微注射法。（5）分类：①乳腺反应器：受性别(只能是雌性)和年龄

(哺乳期)限制，优点可以不用提取可直接服用；

②膀胱反应器：提取后服用，但不受性别和年龄的限制。用基因工程的方法，使外源基因得到高效表达的菌类细胞株系。3.工程菌：4.动物反应器与工程菌比较：比较项目乳腺生物反应器工程菌基因结构动物基因的结构与人类基因的结构基本相同细菌或酵母菌等生物基因的结构与人类基因的结构有较大差异基因表达合成的药物蛋白与天然蛋白质相同细菌细胞内没有内质网、高尔基体等细胞器，产生的药物蛋白可能没有活性药物提取从动物乳汁中提取从微生物细胞中提取生产设备

畜牧业生产，加提取设备工业生产，设备精良受体细胞动物的受精卵微生物细胞导入目的基因方式显微注射法感受态细胞法生产条件不需严格灭菌，温度等外界条件对其影响不大需严格灭菌，严格控制工程菌所需的温度、pH、营养物质浓度等外界条件比较项目乳腺生物反应器工程菌5.基因检测和基因治疗的比较：基因检测制作相应探针，利用DNA分子杂交原理，快速、准确检测人类某种疾病；制作探针三要求：①标记——同位素或荧光②单链③序列与待测基因相同临床应用阶段基因治疗把健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞中，可分为：体外基因治疗和体内基因治疗两种方法仅处于实验阶段，仍有许多问题和困难制约该技术的开展，所以该技术并未在临床开展误区警示：

①基因治疗目前只是处于初期的临床试验阶段，在临床上未开展、未实现这方面的治疗。②DNA分子制作探针进行检测时应检测单链，即将双链DNA分子打开。③原核生物基因(如抗虫基因)可作为真核生物

(棉花)的目的基因。

目前人类利用基因工程的方法成功培育出转基因抗虫棉，以下说法正确的是()A.苏云金芽孢杆菌的毒蛋白基因与质粒结合后直接进入棉花的叶肉细胞表达B.抗虫基因导入棉花叶肉细胞后，可通过传粉、受精的方法，使抗虫性状遗传下去C.标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因D.转基因抗虫棉经过种植，棉铃虫不会产生抗性，这样可以有效消灭棉铃虫跟踪训练5C考点4关注生物新技术——蛋白质工程:1．蛋白质工程的概念:蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。特别提醒对蛋白质工程的概念的理解：⑴蛋白质工程的实质：⑵蛋白质工程的产物：改造控制该蛋白质合成的基因；产生新的蛋白质。2．蛋白质工程的过程和实例：⑴蛋白质工程的基本途径（过程）：是从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)。其流程图如下：⑵蛋白质工程的实例：①通过蛋白质工程改造的干扰素可在－70℃条件下保存半年。②经过蛋白质工程改造天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶这两种酶后，使玉米体内赖氨酸的含量大大提高。3．与基因工程的关系：⑴区别：基因工程是借助于另外一种生物生产自然界已有的蛋白质；而蛋白质工程生产自然界没有的新的蛋白质。⑵联系：蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。因为对现有蛋白质的改造或制造新的蛋白质，必须通过基因修饰或基因合成实现。拓展延伸:蛋白质组计划和人类基因组计划的比较蛋白质组计划基因组计划启动时间2003年正式启动1990年正式启动主要内容“肝脏蛋白质”和“血浆蛋白质”的研究测定人类基因组24条染色体上全部DNA序列参加国家16个国家，80多个实验室6个国家，中国是唯一的发展中国家我国承担任务牵头执行“人类肝脏蛋白质组计划”承担1%的测序工作意义揭示并确认肝脏(血浆)蛋白质为重大疾病预防、诊断、治疗以及新药研发提供科学基础；推动支持蛋白质工程遗传病的诊断和治疗；揭示基因表达的机理跟踪训练6

胰岛素可以用于治疗糖尿病，但是胰岛素被注射到人体后，会堆积在皮下，要经过较长的时间才能进入血液，而进入血液的胰岛素又容易分解，因此，治疗效果受到影响。如图是用蛋白质工程设计速效胰岛素的生产过程，请据图回答有关问题：⑴构建新的蛋白质模型是蛋白质工程的关键，图中构建新的胰岛素模型的主要依据是＿＿＿＿＿。

⑵通过DNA合成形成的新基因应与＿＿结合后转移到＿＿＿＿＿＿＿＿＿中才能得到准确表达。

⑶若要利用大肠杆菌生产速效胰岛素，需用到的生物工程有＿＿＿＿__、＿＿＿＿和发酵工程。

⑷图中从胰岛素模型到新的胰岛素基因合成的基本思路是什么？＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿____。蛋白质的预期功能载体大肠杆菌等受体细胞蛋白质工程基因工程根据新的胰岛素中氨基酸的序列，推测出其基因中的脱氧核苷酸序列，然后利用DNA合成仪合成出新的胰岛素基因1．(2010·全国卷Ⅱ)下列叙述符合基因工程概念的是(

)A．B淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因B．将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株C．用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株D．自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上2.【12浙江6】天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B，现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是()A．提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因BB．利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因BC．利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞D．将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞3.[2014重庆卷]如图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述，正确的是(

)A．②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与B．③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上C．④的染色体上若含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状D．⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异4.[2014·天津卷]为达到相应目的，必须通过分子检测的是(

)A．携带链霉素抗性基因受体菌的筛选B．产生抗人白细胞介素­8抗体的杂交瘤细胞的筛选C．转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定D．21三体综合征的诊断A．过程①需使用逆转录酶B．过程②需使用解旋酶和PCR获取目的基因C．过程③使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备D．过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞5.[2014·广东卷](双选)利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如图所示，下列叙述正确的是(

)6.[2014·江苏卷](多选)下列关于基因工程技术的叙述，错误的是(

)A．切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列B．PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应C．载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因D．抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达1．(2010·全国卷Ⅱ)下列叙述符合基因工程概念的是(

)A．B淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因B．将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株C．用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株D．自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上

B2.【12浙江6】天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B，现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是()A．提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因BB．利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因BC．利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞D．将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞A3.[2014重庆卷]如图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述，正确的是(

)A．②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与B．③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上C．④的染色体上若含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状D．⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异D4.[2014·天津卷]为达到相应目的，必须通过分子检测的是(

)A．携带链霉素抗性基因受体菌的筛选B．产生抗人白细胞介素­8抗体的杂交瘤细胞的筛选C．转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定D．21三体综合征的诊断BA．过程①需使用逆转录酶B．过程②需使用解旋酶和PCR获取目的基因C．过程③使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备D．过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞5.[2014·广东卷](双选)利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如图所示，下列叙述正确的是(

)A、D6.[2014·江苏卷](多选)下列关于基因工程技术的叙述，错误的是(

)A．切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列B．PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应C．载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因D．抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达A、B、C祝同学们前程似锦!2.(2012·福建卷)肺细胞中的let－7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let－7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。图1图2限制性核酸内切(或限制)

启动子胰蛋白请回答：(1)进行过程①时，需用_____________________酶切开载体以插入let－7基因。载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let－7基因转录，该部位称为________。(2)进行过程②时，需用________酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。(3)研究发现，let－7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2。据图分析，可从细胞中提取________进行分子杂交，以直接检测let－7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中________(RASmRNA/RAS蛋白)含量减少引起的。RNARAS蛋白祝同学们前程似锦!最近在基因工程教学，对2011年高考题学生有疑问，我也解释不清楚，就借助绍兴柯桥中学叶建伟老师的解释，选部分供大家参考。例题（2011年高考理综浙江卷第6题）将ada（腺苷酸脱氨酶基因）通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是

A．每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒

B．每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点

C．每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada

D．每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子参考答案：C

考生对A和D选项基本没有异议，B和C二个选项在师生中引起广泛争议，甚至有人认为试题存在科学性错误。下面是一些具有代表性的错误观点和笔者（叶建伟老师）对相关疑难问题的阐述（节选）。

1

重组质粒是否含有限制性核酸内切酶识别位点

认为B选项表述的含义是错误的原因分析：目的基因和质粒能够形成重