标准解读
GB/T 36848-2018《鳄梨日斑类病毒检疫鉴定方法》是一项国家标准,旨在为检测和鉴定鳄梨日斑类病毒提供科学、准确的方法。该标准详细规定了从样本采集到实验操作的一系列流程和技术要求,适用于植物检疫机构及相关部门对鳄梨及其繁殖材料中是否感染有鳄梨日斑类病毒进行检测。
标准首先明确了适用范围,即针对的是鳄梨(Persea americana Mill.)以及与之相关的植物材料中的鳄梨日斑类病毒(Avocado sunblotch viroid, ASBVd)。随后,介绍了所需的主要仪器设备如RT-PCR仪等,并列出了用于提取RNA、反转录成cDNA以及后续扩增所需的试剂清单。
在采样部分,标准指定了如何正确选择代表性样品以确保检测结果的有效性和可靠性;同时,也给出了保存条件及运输过程中应注意的事项,保证样本质量不受影响。接下来是详细的实验步骤说明,包括总RNA的提取、cDNA合成、特异性引物设计原则以及实时荧光定量PCR反应体系建立等内容。通过这些步骤可以获得目标片段的扩增产物,从而实现对鳄梨日斑类病毒的存在与否做出判断。
此外,还特别强调了实验过程中的质量控制措施,比如设置阳性对照和阴性对照来验证整个检测系统的灵敏度与特异性。最后,标准还提供了结果分析指南,帮助使用者根据实验数据作出准确结论。
此标准为我国鳄梨产业健康发展提供了技术支持,在防止外来有害生物入侵方面发挥着重要作用。
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....
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- 现行
- 正在执行有效
- 2018-09-17 颁布
- 2019-04-01 实施
文档简介
ICS6502001
B16..
中华人民共和国国家标准
GB/T36848—2018
鳄梨日斑类病毒检疫鉴定方法
DetectionandidentificationofAvocadosunblotchviroid
2018-09-17发布2019-04-01实施
国家市场监督管理总局发布
中国国家标准化管理委员会
中华人民共和国
国家标准
鳄梨日斑类病毒检疫鉴定方法
GB/T36848—2018
*
中国标准出版社出版发行
北京市朝阳区和平里西街甲号
2(100029)
北京市西城区三里河北街号
16(100045)
网址
:
服务热线
:400-168-0010
年月第一版
20189
*
书号
:155066·1-61332
版权专有侵权必究
GB/T36848—2018
前言
本标准按照给出的规则起草
GB/T1.1—2009。
本标准由全国植物检疫标准化技术委员会提出并归口
(SAC/TC271)。
本标准起草单位中国检验检疫科学研究院中华人民共和国深圳出入境检验检疫局中华人民共
:、、
和国山东出入境检验检疫局
。
本标准主要起草人张永江郑耘张京萱辛言言向均卢小雨
:、、、、、。
Ⅰ
GB/T36848—2018
鳄梨日斑类病毒检疫鉴定方法
1范围
本标准规定了鳄梨日斑类病毒逆转录聚合酶链式反应和往复双向聚丙烯酰胺凝胶电泳
(RT-PCR)
的检疫鉴定方法
。
本标准适用于可能携带鳄梨日斑类病毒的植物及其果实的检疫鉴定
。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文
。,
件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件
。,()。
分析实验室用水规格和试验方法
GB/T6682
3基本信息
中文名鳄梨日斑类病毒
:
学名Avocadosunblotchviroid
:
缩写
:ASBVd
分类地位鳄梨日斑类病毒科Avsunviroidae鳄梨日斑类病毒属Avsunviroid
:()()。
鳄梨日斑类病毒的其他信息参见附录
A。
4方法原理
根据在寄主植物上的症状进行初步判定根据其自然状态和变性后的不同结构分子
ASBVd;RNA
在聚丙烯酰胺凝胶电泳中迁移率的差异进行往复双向聚丙烯酰胺凝胶电泳
(Return-Polyacrylamide
检测根据基因组特征进行检测通过电泳条带大小进行结果
GelElectrophoresis,R);RT-PCR,
判定
。
5仪器设备及设施用具及试剂
、
51仪器设备及设施
.
天平感量高速冷冻离心机计仪电泳仪电泳槽凝胶成像系统隔离检疫温
(0.001g)、、pH、PCR、、、、
室恒温水浴低温冰箱等
、、。
微量移液器研钵离心管花盆
(2μL、10μL、20μL、100μL、200μL、1000μL)、、(1.5mL、2.0mL)、、
消毒土等
。
52RT-PCR检测试剂
.
除另有规定外所有试剂均为分析纯实验用水应符合
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