GB/T 35806-2018动物流感检测H7N9亚型流感病毒双重荧光RT-PCR检测方法

ICS11220

B41.

中华人民共和国国家标准

GB/T35806—2018

动物流感检测H7N9亚型流感病毒

双重荧光RT-PCR检测方法

Animalinfluenzadetection—Protocolofduplexreal-timeRT-PCR

forinfluenzavirussubtypesH7andN9

2018-02-06发布2018-09-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

中华人民共和国

国家标准

动物流感检测H7N9亚型流感病毒

双重荧光RT-PCR检测方法

GB/T35806—2018

*

中国标准出版社出版发行

北京市朝阳区和平里西街甲号

2(100029)

北京市西城区三里河北街号

16(100045)

网址

:

服务热线

:400-168-0010

年月第一版

20182

*

书号

:155066·1-59180

版权专有侵权必究

GB/T35806—2018

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由农业部提出

。

本标准由全国动物卫生标准化技术委员会归口

(SAC/TC181)。

本标准起草单位北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心中国出入境检验检疫协会中国农业

:、、

科学院哈尔滨兽医研究所中国检验检疫科学研究院

、。

本标准主要起草人蒲静高志强汪琳乔彩霞张锡全周琦张鹤晓张伟尹羿柏亚铎刘艳华

:、、、、、、、、、、、

刘环王秀荣包红梅韩雪清王慧煜

、、、、。

Ⅰ

GB/T35806—2018

动物流感检测H7N9亚型流感病毒

双重荧光RT-PCR检测方法

1范围

本标准规定了同时检测和亚型动物流感病毒核酸的双重荧光操作

H7N9TaqManRT-PCR

方法

。

本标准适用于和亚型动物流感病毒核酸的快速检测和筛查

H7N9。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

。,()。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

禽流感病毒通用荧光检测方法

GB/T19438.1—2004RT-PCR

实验室生物安全通用要求

GB19489

3缩略语

下列缩略语适用于本文件

。

或值每个反应管内的荧光信号量达到设定的阈值所经历的循环数

Ct(Cp):(ThresholdCycle,or

CrossingPoint)

焦碳酸二乙酯

DEPC:(Diethypyrocarbonate)

羧基荧光素

FAM:(Carboxyfluorescein)

血凝素

HA:(Hemagglutinin)

六氯甲基荧光素

HEX:-6-(Hexachlorofluorescein)

小沟结合物

MGB:(MinorGrooveBinder)

神经氨酸酶

NA:(Neuraminidase)

羧基四甲基罗丹明

TAMRA:(Carboxytetramethylrhodamine)

荧光实时荧光反转录聚合酶链反应

RT-PCR:(Real-timeRT-PCR)

4试剂和材料

41试剂

.

411总则除另有说明所用试剂均为分析纯所用液体试剂均需使用无酶的容器进行分装

..:,,RNA。

412保存

..TRIzol:2℃~25℃。

413氯仿预