标准解读

《GB/T 33409-2016 β-半乳糖苷酶活性检测方法 分光光度法》是一项国家标准，规定了通过分光光度法测定β-半乳糖苷酶活性的具体方法。该标准适用于食品、饲料及其原料中β-半乳糖苷酶活性的测定。

根据此标准，β-半乳糖苷酶活性的测定基于底物对硝基苯-β-D-半乳吡喃糖苷（pNPG）在酶的作用下分解生成对硝基苯酚（pNP），后者在碱性条件下呈黄色，在特定波长下有最大吸收峰，通过测量其吸光度值来间接反映酶活性大小。具体步骤包括样品处理、酶反应、终止反应以及比色测定等几个关键环节。

首先，需将待测样品进行适当处理，以释放其中可能存在的β-半乳糖苷酶；然后，在一定条件下使酶与底物pNPG充分作用，产生pNP；接着使用NaOH溶液停止酶促反应，并同时使生成的pNP显色；最后利用紫外可见分光光度计于405nm处测定吸光度值。通过比较不同浓度的标准品所获得的吸光度曲线，可以计算出样品中β-半乳糖苷酶的具体活性单位。


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....

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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2016-12-30 颁布
  • 2017-07-01 实施
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GB/T 33409-2016β-半乳糖苷酶活性检测方法分光光度法_第1页
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文档简介

ICS7104030

G66..

中华人民共和国国家标准

GB/T33409—2016

β-半乳糖苷酶活性检测方法分光光度法

Determinationoftheactivityofbeta-galactosidase—Spectrophotometricmethod

2016-12-30发布2017-07-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T33409—2016

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由全国生化检测标准化技术委员会提出并归口

(SAC/TC387)。

本标准起草单位深圳市计量质量检测研究院中国测试技术研究院

:、。

本标准主要起草人张世伟周李华赖心田陈血建唐栋洪晓明王珍妮杨国武

:、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T33409—2016

β-半乳糖苷酶活性检测方法分光光度法

1范围

本标准规定了乳酸克鲁维酵母Kluveromceslactis脆壁克鲁维酵母Kluveromces

(yy)、(yy

railis马克斯克鲁维酵母Kluveromcesmarxianus脆壁酵母Saccharomcesrailis大肠

fg)、(yy)、(yfg)、

杆菌Escherichiacoli米曲霉Aspergillusoryzae黑曲霉Aspergillusniger发酵生产的半乳

()、()、()β-

糖苷酶活性检测方法

。

本标准适用于生化试剂工业酶制剂中半乳糖苷酶活性的测定

、β-。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

。,()。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件

。

31

.

β-半乳糖苷酶活性单位beta-galactosidaseactivityunit

在规定的反应条件下每分钟催化转化一个微摩尔邻硝基苯半乳糖苷的酶量

,-β-D-。

4原理

半乳糖苷酶能迅速催化邻硝基苯半乳糖苷生成邻硝基苯酚和半乳糖通过吸光度值的变化

β--β-D-,

得出邻硝基苯酚的生成量计算出酶活

。

5仪器设备及器具

51计精确至

.pH:0.01pH。

52分析天平感量

.:0.0001g。

53紫外可见分光光度计波长准确度吸光度值精确至

.-:±1nm,0.001。

54石英比色皿

.1cm。

55恒温水浴槽控温精度

.:±0.5℃。

6试剂

除非另有规定本方法所用试剂均为分析纯水为

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