标准解读
《GB/T 31796-2015 南美大豆猝死综合症病菌和北美大豆猝死综合症病菌检疫鉴定方法》是一项国家标准,旨在提供一套科学、准确的方法用于检测与鉴定引起南美及北美大豆猝死综合症的特定真菌。该标准适用于进出口大豆及其产品中这两种病原体的检疫检验工作,对于防止这些有害生物跨境传播具有重要意义。
标准详细规定了从样品采集到最终结果报告的一整套流程。首先,在样品准备阶段,明确了如何正确地收集代表性样本,并对不同类型的样品提出了具体的处理要求。接着,在实验室条件下,通过形态学观察结合分子生物学技术(如PCR)来进行病原菌的初步筛选与确认。其中,特别强调了使用特异性引物设计以提高检测准确性的重要性。
此外,《GB/T 31796-2015》还包含了详细的实验操作步骤说明,包括但不限于DNA提取方法、PCR反应条件设定等关键环节的具体指导。同时,为确保检测结果的有效性和可靠性,本标准也列出了质量控制措施以及可能出现的问题解决方案。
该文件不仅为从事相关领域工作的技术人员提供了权威的操作指南,也为加强我国进出境植物检疫监管能力贡献了一份力量。通过严格执行这一标准,可以有效降低因进口受感染大豆而引发国内农业生产损失的风险。
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....
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- 现行
- 正在执行有效
- 2015-07-03 颁布
- 2015-11-27 实施
文档简介
ICS65020010
B16..
中华人民共和国国家标准
GB/T31796—2015
南美大豆猝死综合症病菌和北美大豆
猝死综合症病菌检疫鉴定方法
DetectionandidentificationofFusariumtucumaniaeand
Fusariumvirguliforme
2015-07-03发布2015-11-27实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布
中国国家标准化管理委员会
GB/T31796—2015
前言
本标准按照给出的规则起草
GB/T1.1—2009。
本标准由全国植物检疫标准化技术委员会提出并归口
(SAC/TC271)。
本标准起草单位中国检验检疫科学研究院中华人民共和国深圳出入境检验检疫局
:、。
本标准主要起草人吴品珊王颖章桂明陈枝楠
:、、、。
Ⅰ
GB/T31796—2015
南美大豆猝死综合症病菌和北美大豆
猝死综合症病菌检疫鉴定方法
1范围
本标准规定了南美大豆猝死综合症病菌和北美大豆猝死综合症病菌的检疫鉴定方法
。
本标准适用于田间大豆和大豆粒携带的土壤和病残体中南北美大豆猝死综合症病菌的鉴定
、。
2仪器和用具
21仪器
.
生物显微镜超净工作台光照培养箱电子天平高压灭菌锅冰箱扩增仪荧光
、、、(1/1000g)、、、PCR、
扩增仪电泳仪凝胶成像仪高速冷冻离心机恒温水浴锅摇床
PCR、、、、、。
22用具
.
烧杯三角瓶量筒试管培养皿酒精灯镊子剪刀解剖刀接种针载玻片盖玻片塑料研杵
、、、、、、、、、、、、、
移液器移液器吸头离心管液氮罐
、、、。
3试剂和培养基
31试剂
.
琼脂粉马铃薯葡萄糖乳酸琼脂糖无菌双蒸水液氮蛋白胨磷酸二氢钾硫酸镁链霉素新
,,,,,,,,,,,
霉素五氯硝基苯氯四环素利福平
,,,,Tris-HCl,MgCl2,HCl,EDTA,NaOH,NaOAc,KCl,Tris,
无水乙醇苯酚溴化乙锭三氯甲烷异丙醇
CTAB,TAE,(Ethanol),(Phenol),(EB),(Chloroform),
异戊醇蛋白酶Taq聚合酶相对分子质量标准
(Isopropanol),(Isoamylalcohol),K,DNA,dNTP,DNA
物双重特异性引物和实时荧光特异性引物及探针和
,PCRFu1/2Fsg-α-1/2,PCR16-FP/16-RP
Taq
16-AG,ManUniversalPCRMasterMix。
32培养基
.
水琼脂培养液选择性培养基马铃薯葡萄糖培养基低营养合成培养基
0.2%,PCNB,(PDA),
具体配方参见附录
(SNA)。A。
4检疫鉴定方法
41症状检查
.
南北美大豆猝死综合症在症状上区别不大病害典型的症状是叶片的叶肉枯黄坏死叶脉有时保
、,,
持绿色根部维管束组织有褐色病变髓部白色参见附录病害症状描述
,,。A。
采集田间疑似症状大豆植株的根部植株周围的土壤备用在大豆粒中筛选其携带的土壤并挑
、,。
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