- 现行
- 正在执行有效
- 2015-07-03 颁布
- 2015-11-27 实施
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文档简介
ICS65020010
B16..
中华人民共和国国家标准
GB/T31796—2015
南美大豆猝死综合症病菌和北美大豆
猝死综合症病菌检疫鉴定方法
DetectionandidentificationofFusariumtucumaniaeand
Fusariumvirguliforme
2015-07-03发布2015-11-27实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布
中国国家标准化管理委员会
GB/T31796—2015
前言
本标准按照给出的规则起草
GB/T1.1—2009。
本标准由全国植物检疫标准化技术委员会提出并归口
(SAC/TC271)。
本标准起草单位中国检验检疫科学研究院中华人民共和国深圳出入境检验检疫局
:、。
本标准主要起草人吴品珊王颖章桂明陈枝楠
:、、、。
Ⅰ
GB/T31796—2015
南美大豆猝死综合症病菌和北美大豆
猝死综合症病菌检疫鉴定方法
1范围
本标准规定了南美大豆猝死综合症病菌和北美大豆猝死综合症病菌的检疫鉴定方法
。
本标准适用于田间大豆和大豆粒携带的土壤和病残体中南北美大豆猝死综合症病菌的鉴定
、。
2仪器和用具
21仪器
.
生物显微镜超净工作台光照培养箱电子天平高压灭菌锅冰箱扩增仪荧光
、、、(1/1000g)、、、PCR、
扩增仪电泳仪凝胶成像仪高速冷冻离心机恒温水浴锅摇床
PCR、、、、、。
22用具
.
烧杯三角瓶量筒试管培养皿酒精灯镊子剪刀解剖刀接种针载玻片盖玻片塑料研杵
、、、、、、、、、、、、、
移液器移液器吸头离心管液氮罐
、、、。
3试剂和培养基
31试剂
.
琼脂粉马铃薯葡萄糖乳酸琼脂糖无菌双蒸水液氮蛋白胨磷酸二氢钾硫酸镁链霉素新
,,,,,,,,,,,
霉素五氯硝基苯氯四环素利福平
,,,,Tris-HCl,MgCl2,HCl,EDTA,NaOH,NaOAc,KCl,Tris,
无水乙醇苯酚溴化乙锭三氯甲烷异丙醇
CTAB,TAE,(Ethanol),(Phenol),(EB),(Chloroform),
异戊醇蛋白酶Taq聚合酶相对分子质量标准
(Isopropanol),(Isoamylalcohol),K,DNA,dNTP,DNA
物双重特异性引物和实时荧光特异性引物及探针和
,PCRFu1/2Fsg-α-1/2,PCR16-FP/16-RP
Taq
16-AG,ManUniversalPCRMasterMix。
32培养基
.
水琼脂培养液选择性培养基马铃薯葡萄糖培养基低营养合成培养基
0.2%,PCNB,(PDA),
具体配方参见附录
(SNA)。A。
4检疫鉴定方法
41症状检查
.
南北美大豆猝死综合症在症状上区别不大病害典型的症状是叶片的叶肉枯黄坏死叶脉有时保
、,,
持绿色根部维管束组织有褐色病变髓部白色参见附录病害症状描述
,,。A。
采集田间疑似症状大豆植株的根部植株周围的土壤备用在大豆粒中筛选其携带的土壤并挑
、,。
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