• 现行
  • 正在执行有效
  • 2015-07-03 颁布
  • 2015-11-27 实施
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GB/T 31793-2015油菜茎基溃疡病菌检疫鉴定方法_第1页
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文档简介

ICS65020010

B16..

中华人民共和国国家标准

GB/T31793—2015

油菜茎基溃疡病菌检疫鉴定方法

DetectionandidentificationofLeptosphaeriamaculansFuckelCes.etDeNot.

()

2015-07-03发布2015-11-27实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T31793—2015

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由全国植物检疫标准化技术委员会提出并归口

(SAC/TC271)。

本标准起草单位中国检验检疫科学研究院中华人民共和国上海出入境检验检疫局

:、。

本标准主要起草人吴品珊易建平周国梁杜洪忠

:、、、。

Ⅰ

GB/T31793—2015

油菜茎基溃疡病菌检疫鉴定方法

1范围

本标准规定了油菜茎基溃疡病菌的检疫鉴定方法

。

本标准适用于油菜和油菜茎基溃疡病菌其他十字花科寄主种子和植株中油菜茎基溃疡病菌的检疫

和鉴定

。

2仪器和用具

21仪器

.

电子天平感量生物显微镜体视显微镜高速冷冻离心机纯水仪超净工作台高压灭菌

(0.01g)、、、、、、

锅制冰机仪凝胶成像系统电泳仪实时荧光仪培养箱冰箱

、、PCR、、、PCR、、。

22用具

.

烧杯三角瓶量筒培养皿酒精灯镊子剪刀解剖刀接种针载玻片盖玻片研钵移液器移

、、、、、、、、、、、、、

液器吸头离心管液氮罐孔径和的网筛

、、、2.5mm1.5mm。

3试剂和培养基

31试剂

.

次氯酸钠琼脂粉马铃薯葡萄糖乳酸琼脂糖无菌双蒸水液氮蛋白胨磷酸二

1.0%(NaClO),,,,,,,,,

氢钾硫酸镁链霉素新霉素五氯硝基苯氯四环素利福平

,,,,,,,Tris-HCl,MgCl2,HCl,EDTA,NaOH,

无水乙醇苯酚溴化乙锭三氯甲烷

NaOAc,KCl,Tris,CTAB,TAE,(ethanol),(phenol),(EB),(chloro-

异丙醇异戊醇蛋白酶Taq聚合酶相对

form),(isopropanol),(isoamylalcohol),K,DNA,dNTP,DNA

分子质量标准物特异性引物和实时荧光特异性引物及探针

,PCRPCR。

32培养基

.

马铃薯葡萄糖琼脂培养基酸性马铃薯葡萄糖琼脂培养基具体配方参见附录

(PDA),(APDA)。A。

4检疫鉴定方法

41种子检测

.

未带有种衣剂的种子解剖镜下挑取皱缩干瘪变色畸形残缺或有霉变的种子带有种

,、、、、1g~2g;

衣剂的种子先用自来水浸泡洗去种衣剂或用纱布包裹浸泡搓洗种子自来水冲洗去种衣剂待风干后

,,,,

挑取异常种子做分离培养

,。

商用油菜籽样品取用孔径和的网筛过筛孔径筛上物多为豆荚和

1kg,2.5mm1.5mm,2.5mm

茎等植株残体孔径筛下物多为碎屑和细小油菜籽筛上物和筛下物混匀后取制

,1.5mm。,

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