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文档简介

实验三组织分离法组织分离法（离析法）组织分离法：是利用物理（机械）的方法或化学的方法（如药品或者酶的作用）把生物细胞间的胞间层溶解，使生物组织间的细胞分离开来，从而得到单个完整细胞，以便在显微镜下观察细胞的立体形态结构。缺点：由于组织的细胞间彼此分离，细胞间的关系无法显示，也就不可能了解整个组织的结构。一、实验目的学习物理（机械）分离制片方法；学习化学分离制片方法。二、实验材料及用品实验材料：叶片（新鲜和固定）、南瓜茎。实验用具：载、盖玻片；显微镜；镊子；离心机等。实验药品：蒸馏水、梯度酒精、½二甲苯+½纯酒精，Naocl，½10%铬酸+½10%硝酸离析液，二甲苯，I-KI染液，1%番红水溶液，1%番红酒精溶液、加拿大树胶。三、实验步骤（一）——表皮制片步骤临时装片法选材

撕取下表皮

染色

封固

镜检

新鲜材料，靠近中脉部分1（I-KI染色2min）加盖玻片置载玻片，加一滴水，充分展开三、实验步骤（一）——表皮制片步骤永久制片法选材固定（FAA固定液，24h）清洗Naocl撕取下表皮染色（1%番红水溶液30min-1.5h）水洗（洗去浮色，一次即可）

（I-KI染色）分色（用盐酸水）水洗（洗去酸液）粘片、烘片脱水（50%，70%，80%，95%，100%，½二甲苯+½100%酒精，各2min）透明（二甲苯）封固镜检

靠近中脉部分染色期间观察如染色液干涸，再滴加载玻片上滴一滴蛋白黏贴剂，期间加入一滴水，移入叶表皮，水分吸干后放入烘箱烘干2345放入30-40度温箱，周边泛白三、实验步骤（二）——离析制片步骤取材加热离析（10%铬酸：10%硝酸=1:1离析液）水洗染色（1%番红的50%酒精溶液4-24h或更长）水洗（7%AL，1-2次）脱水（50%，70%，85%，95%AL各5min，100%AL，两次，每次5min）透明（½二甲苯+½100%酒精，二甲苯各5min）封藏将茎切成1cm长，撕成细丝状离析液为材料的20倍，30-40℃的温箱中24-48h水洗数次，在离心管中进行四、实验结果表皮制片：表皮细胞的形态？气孔器的类型？离析制片：南瓜茎的导管及木纤维形态？气孔器

气孔器类型无规则型不等型平列型横列型离析法杨茎的木纤维和导管分子五、作业实验完毕

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