小白菜对缺钙胁迫的反应

小白菜对缺钙胁迫的反应摘要：通过研究缺钙营养液处理对小白菜生长的影响。结果表明，在缺钙胁迫下，小白菜的生长受到抑制，提高了POD的活性，降低了….关键词：小白菜、缺钙、生长状况钙是植物生长必需的营养元素之一。蔬菜对钙的需求量不仅高，而且在整个生长过程中的任何期都需要。在钙不足的情况下，会引起作物生理失调，植株生长受阻，导致不结实或很少结实等，同时也会引起其他生理病害的发生，严重地影响了蔬菜的生长。本实验对小白菜在缺钙胁迫后其生长及膜质氧化系统的影响，探讨钙在植物生长中的作用。1材料与方法1.1材料培养及处理实验于2010年10月在广西师范大学生理实验室举行，分别取6六个培养盆，洗净，做好标记，每个培养盆中培养3株小白菜幼苗，实验组浇缺钙培养液，对照组浇完全培养液，培养三个星期后对其各项指标进行测定。1.2测定方法1.2.1植物生长指标测定培养三个星期之后，取缺钙组和对照组的三株长势最好的小白菜进行测定，分别测量其株高、叶宽和叶长，并做好记录。1.2.2细胞膜透性的测定选取叶龄相似的植物叶片，用自来水将供试叶片冲洗，除去表面沾污物，再用蒸馏水冲洗1〜2次，用干净纱布轻轻吸干叶片表面水分，然后剪成约1cm的小叶片，注意除掉大叶脉。将剪下的小叶片混合均匀，快速称取鲜样三份，每份1g，分别放入编号为A、B、C的三个烧杯中，然后分别在烧杯中加入50ml蒸馏水。用电导仪分别测定A、B、C三杯的电导率，同时测定蒸馏水（空白）的电导率。接着把A、B、C三杯放入沸水浴中煮沸10min中，冷却后至室温后再次测定电导率值，所测得的结果记入表格中。1.2.3丙二醛的含量测定MDA的提取称2g叶片，加入10%三氯乙酸（TCA）2ml及少量石英砂，研磨；进一步加入8mlTCA充分研磨，接着把匀浆液以4000r/min离心10min，其上清液即为MDA提取液。MDA显色反应及测定取2mlMDA提取液（对照组取2ml蒸馏水），在加2ml0.6%TBA混匀，在试管上加棉塞，置沸水中加热15min，迅速拿出水浴锅冷却，以4000r/min离心15min，于波长532nm和450nm下测定OD值。1.2.4过氧化物酶（POD）活性的测定POD酶液提取称取适量植物材料剪碎（0.5〜1g），加2mL酶提取缓冲液冰浴研磨成匀浆转移到离心管（磷酸缓冲液PH为7.2，含PVP1%），3mL酶提取缓冲液冲洗研钵后一并倒入离心管，4000r/min离心15min，收集上清液，测量提取液体积（低温分装保存备用）。POD酶活性测定取试管1做对照组，加POD反应混合液3mL和1mL提取缓冲液混匀在470nm下调零，试管2加POD反应混合液3mL和1mLPOD酶液混匀每隔一分钟测470nm下OD值并记录。1.2.5超氧化物岐化酶（SOD）的活性测定SOD酶液提取同POD酶提取方法一样SOD酶活性测定1.2.5.2.1显色反应取5支试管，分别编号,（3支测定管,2支对照管）按照实验课本P99页表格按顺序加入试剂（3支测定管加酶液,2支对照管加缓冲液）.混匀后将1支对照管置暗处，其他各管于4000lx日光下反应15min（要求各管受光情况一致，温度高，时间缩短，低时延长）。1.2.5.2.2SOD活性测定与计算反应结束后，以不照光的对照管作空白进行调零，分别测定其他各管的OD560nm吸光度。并记录好照光对照管的吸光度（ODC）和3支测定管的吸光度（ODS）SOD活性单位：以抑制制氮蓝四唑（NBT）光化还原的50%为一个酶活性单位（U）表示，课本P100页公式计算SOD活性SOD活性（U/g.Fw.min）= （ODC-ODS）XV/0.5XODCXVSXtXm3结果与分析3.1缺钙胁迫对小白菜生长的影响小白菜在培养三周后的生长指标的测定结果来看（表1），对照组的长势比缺钙组的长势较好。说明了缺钙胁迫对小白菜的生长有了一定的影响，抑制了小白菜的正常生长。在外表看来，两组并没有明显的异同，导致这种现象的原因可能是由于培养的时间比较短，所以现象还不明显。表1小白菜生长指标测定\组\别指、标\对照组平均值缺钙组平均值株高16cm15cm14cm15cm14cm16cm12cm14cm叶宽5cm4.5cm4cm4.5cm5.5cm4cm3.2cm4.2cm叶长8cm10cm9cm9cm8.5cm7.8cm6cm7.4cm3.2细胞膜透性的测定、组常温沸水后吸光值_别空白60uQ60uQ对照组70uQ1.94mQ缺钙组82uQ2.04mQ3.3丙二醛的含量测定波•一组对照组缺钙组一、别532nm0.2060.131

450nm0.6760.3513.4过氧化氢酶(POD)的检测时间OD4701min2min3minAOD470缺钙组1.5232.0972.1550.316对照组1.0270.7961.9590.466I ，八r AOD470*VtPOD成每*舌力(U/g.Fw.min)=0.01*w*Vs*t缺钙组POD酶活力=0.316*5/(0.01*0.5*1*3)=105.33U/g.Fw.min对照组POD酶活力=0.466*5/(0.01*0.5*1*3)=155.33U/g.Fw.min3.5超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定\\吸光光组7、一值别ODcODs平均值缺钙组0.6580.2960.2950.2980.290对照组1.6991.2600.9830.8420.848(ODC-ODS)*VSOD活性(U/g.Fw.min)= 0.5*ODc*Vs*t*m实验组SOD活性=(0.658-0.295)*/(0.5*0.658*1*15*0.5)=0.736U/g.Fw.min对照组SOD活性=(1.699-0.983)*/(0.5*1.699*1*15*0.5)=4.562U/g.Fw.min4讨论4.1数据分析：4.1.1两组数据比较缺钙胁迫处理的白菜各项生长指标(株高、叶宽、叶长)比对照组的小。其中对植株叶长的差距n最为明显。4.12在细胞膜透性结果：无论在常温或者煮沸条件下测量，对照组的透性比