标准解读
《GB/T 27533-2011 犬细小病毒病诊断技术》是由中国国家标准化管理委员会发布的一项国家标准,旨在为犬细小病毒(Canine Parvovirus, CPV)感染的诊断提供科学、规范的方法。该标准详细规定了从样本采集到结果分析的一系列操作流程和技术要求。
首先,在样本收集方面,标准指出了适合用于检测的不同类型样本,包括但不限于粪便、肠内容物以及组织样本,并对如何正确保存这些样本提出了具体建议,以保证其在运输和储存过程中的稳定性。
其次,对于实验室检测方法的选择,《GB/T 27533-2011》推荐了几种常用的诊断手段,其中包括荧光定量PCR法、常规PCR扩增后电泳检测法、ELISA酶联免疫吸附测定法等。每种方法都有其特点及适用范围,如荧光定量PCR具有高灵敏度与特异性,适用于快速准确地定性或定量分析;而ELISA则更侧重于抗体水平的监测。
此外,该文件还强调了实验室内质量控制的重要性,包括使用阳性对照品和阴性对照品来验证每次实验的有效性,定期校准仪器设备,确保所有试剂都在有效期内使用等措施。同时,也提醒技术人员需接受专业培训,掌握正确的操作技能,减少人为因素造成的误差。
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....
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- 现行
- 正在执行有效
- 2011-11-21 颁布
- 2012-03-01 实施
文档简介
ICS11220
B41.
中华人民共和国国家标准
GB/T27533—2011
犬细小病毒病诊断技术
Diagnostictechniquesforcanineparvovirusdisease
2011-11-21发布2012-03-01实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布
中国国家标准化管理委员会
GB/T27533—2011
前言
本标准的附录和附录为资料性附录
AB。
本标准由中华人民共和国农业部提出
。
本标准由全国动物防疫标准化技术委员会归口
(SAC/TC181)。
本标准起草单位青岛农业大学动物科技学院中华人民共和国上海出入境检验检疫局
:、。
本标准主要起草人单虎温建新熊炜黄娟秦晓冰于鹏程
:、、、、、。
Ⅰ
GB/T27533—2011
犬细小病毒病诊断技术
1范围
本标准规定了犬细小病毒病的临床检查血凝与血凝抑制试验检测的操作方法
、、PCR。
本标准适用于犬细小病毒病的鉴定及其流行病学调查诊断和监测其中病毒分离血凝与血凝抑
、。、
制试验检测适用于犬细小病毒病的病原诊断
、PCR。
2试剂和材料
21细胞猫肾细胞
.FK81()。
22生理盐水配制参见附录中
.0.9%:AA.1。
23猪红细胞液配制参见附录中
.1%:AA.2。
24犬细小病毒阳性血清
.。
25孔形微量反应板
.96“v”。
26酶及倍酶反应缓冲液酶浓度为保存
.Taq10Taq:Taq5U/μL,-20℃。
27管
.1.5mLEppendorf。
28薄壁管
.0.2mLPCR。
29含各保存
.dNTP:dCTP、dGTP、dATP、dTTP10mmol/L,-20℃。
210引物浓度为其序列如下
.:20μmol/L,:
上游引物
(CPVF):5′GAATCTGCTACTCAGCCACCAAC3′;
下游引物
(CPVR):5′GTGCACTATAACCAACCTCAGC3′。
211十二烷基硫酸钠配制参见附录
.10%:A。
212蛋白酶贮备液配制参见附录中
.K:AA.4。
213电泳缓冲液配制参见附录中
.5×TBE:AA.6。
3器材和设备
31仪
.PCR。
32高速台式冷冻离心机可控温至离心速度可达g以上
.:4℃、12000。
33水平电泳仪
.。
34凝胶成像系统
.。
4临床检查
41临床特征
.
411潜伏期周到周病初无任何症状食欲减退或废绝体温以上粉红色黏稠血样物
..12,,,40℃,。
412病犬先出现呕吐呕吐出白色泡沫或黄色液体继而腹泻粪便稀薄而恶臭剧烈的腹泻呈喷射
..,,,,
状粪便呈红色混有大量黏液或假膜后期排番茄汁样稀便并有特殊的腥臭味
,,。,。
413患犬迅速消瘦倦卧不起目光呆滞眼窝下陷腹围紧缩机体脱水皮肤干燥弹性降低
..,,,,,,、。
42病理变化
.
421心脏肿大呈灰黄色切面外翻质地松软心肌有出血性斑纹
..,,,。
422肝脏肿大包膜紧张多呈黄褐色质地松软有局灶性坏死断面有豆蔻状花纹
..,,,,。
423胃空虚黏膜轻度潮红附有大量黏液小肠壁增厚肠管变粗
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