标准解读
《GB/T 24863-2010 畜禽细胞体外培养与冷冻保存技术规程》是由中国国家标准化管理委员会发布的一项国家标准，主要针对畜禽细胞在实验室环境下的培养及长期保存提供了具体的操作指南。该标准涵盖了从样本采集、处理到细胞培养以及最终的冷冻保存等多个环节的技术要求。
首先，在样本采集方面，规定了应选取健康且无特定病原体感染的动物作为供体，并详细描述了不同组织或器官样本的正确采集方法及其注意事项，以确保获得高质量的起始材料。
接着，对于细胞分离与初步处理，标准中列举了几种常用的酶消化法和机械分散法来获取单个细胞悬液，并对如何根据目标细胞类型选择合适的分离策略进行了指导。此外还强调了在整个过程中保持无菌操作的重要性，防止污染发生。
然后是关于细胞培养的部分，包括基础培养基的选择、血清及其他添加剂的使用比例、pH值调整等关键参数设置；同时指出了定期更换培养液、监测细胞生长状态、适时传代扩增等日常维护工作的要求。
最后，针对细胞冷冻保存，《GB/T 24863-2010》推荐采用逐步降温的方法进行冷冻保护，并介绍了DMSO（二甲基亚砜）等常用冻存剂的配制比例及其作用机制。还特别提到了解冻后细胞复苏效率评估的重要性，建议通过观察存活率、贴壁能力等指标来判断保存效果。
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- 现行
- 正在执行有效
- 2010-06-30 颁布
- 2011-01-01 实施
文档简介
犐犆犛６５．０２０．３０
犅４０
中华人民共和国国家标准
犌犅／犜２４８６３—２０１０
畜禽细胞体外培养与
冷冻保存技术规程
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２０１００６３０发布２０１１０１０１实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
发布
中国国家标准化管理委员会
书
犌犅／犜２４８６３—２０１０
前言
本标准由中华人民共和国农业部提出。
本标准由全国畜牧业标准化技术委员会（ＳＡＣ／ＴＣ２７４）归口。
本标准起草单位：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所。
本标准主要起草人：关伟军、马月辉、李向臣、李晗、闫雷、赵倩君、宫雪莲。
Ⅰ
书
犌犅／犜２４８６３—２０１０
畜禽细胞体外培养与
冷冻保存技术规程
１范围
本标准规定了畜禽体细胞保存方法。
本标准适用于猪、牛、羊、马、驴、鸡、鸭、鹅等畜禽细胞体外培养与保存。
２规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有
的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究
是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
ＧＢ／Ｔ６６８２分析实验室用水规格和试验方法
３术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。
３．１
体细胞体外培养犻狀狏犻狋狉狅狊狅犿犪狋犻犮犮犲犾犾犮狌犾狋狌狉犲
将体细胞在模拟体内生存环境的体外条件中进行培养，使细胞生长增殖，并保留其完整结构和功能
特性的方法。
３．２
原代细胞培养狆狉犻犿犪狉狔犮犲犾犾犮狌犾狋狌狉犲
将体细胞在模拟体内生存环境中进行培养，使细胞生长增殖达到可传代状态的培养方法。
３．３
细胞冷冻保存犮犲犾犾犮狉狔狅狆狉犲狊犲狉狏犪狋犻狅狀
将体外培养细胞与冻存液按一定比例混匀后，按设定的降温速率降温，使其于液氮中长期保存的
过程。
４工作区条件
工作区一般要由准备室、缓冲间、无菌室、细胞保存室组成。
其中，缓冲间面积应不小于３ｍ２，并设有更衣柜和紫外灯，紫外灯的强度为不少于１．５Ｗ／ｍ３。紫
外线灯管距地面不应超过２．５ｍ，每次照射时间为２０ｍｉｎ～３０ｍｉｎ。无菌室无菌等级的最低标准应达
到万级。
５主要仪器、设备
超净工作台、冰箱、鼓风干燥箱、高压蒸汽消毒器、液氮生物容器、离心机、电子天平、ＣＯ２
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