第二章中药制剂的鉴别

中药制剂的鉴别药物分析教研室1第二章中药制剂的鉴别定义中药制剂鉴别是利用一定的分析方法和技术来确定中药制剂的真伪。内容

性状鉴别

显微鉴别理化鉴别2定义

中药制剂的性状是对药品颜色和外表的感官描述，包括形状、大小、色泽、表面特征、质地、气味等方面。

性状与投料的原料质量及工艺有关初步反映中药制剂质量状况中药制剂的鉴别性状鉴别黄连上清丸：

“本品为黑褐色的大蜜丸；气芳香，味苦。”3内容颜色：与所含成分、制备工艺有关复方制剂考虑到贮存期间颜色会变深形态：不同剂型，形态不一形状：与设备模具有关（栓剂）气：香、芳香、清香、腥、臭、特异等不明显用气微，香气浓厚时用芳香浓郁味：甜、酸、苦、涩、辛、凉、咸、辣、麻等中药制剂的鉴别性状鉴别4注意1.制剂的性状指成品的颜色、形态、气味等2.有包衣的丸剂、片剂应描述除去包衣后的片心、丸心的颜色及气味3.硬胶囊应写明除去胶囊后内容物的性状4.制剂色泽有两种色调组合，描写时以后者为主，如棕红色中药制剂的鉴别性状鉴别56789中药制剂的鉴别物理常数测定

折光率、旋光度、比旋度、凝点、熔点、相对密度定性鉴别的一种手段性状鉴别10局限性

中药种类繁多，品种复杂。中成药而言，包括“丸、散、膏、丹、片”等多种剂型，仅靠传统的性状鉴定方法不能识别出其中的方药组成和药材的真伪。中药制剂的鉴别丸散膏丹、神仙难辨性状鉴别11发展

我国著名生药学家徐国钧教授，开创了中药制剂显微鉴定，从实际上解决了中药材粉末和含有中药原粉的中成药制剂的真伪鉴定问题。在我国历版药典中均有很大部分的中成药采用显微方法鉴定。

中药制剂的鉴别显微鉴别12定义利用显微镜来观察中药制剂中原料药材的组织碎片、细胞或内含物等微观特征，从而鉴别制剂的处方组成。

中药制剂的鉴别显微鉴别13使用范围

以药材粉碎成细粉后直接制成制剂或添加有部分药材粉末的制剂，原药材的显微特征仍保留。蛇胆川贝散：川贝母仅用淀粉粒作为指标牛黄解毒片：大黄用草酸钙簇晶作为鉴别特征中药制剂的鉴别显微鉴别1415制片方法显微鉴定，制作良好的切片或标准片是关键。把切片或粉末标准片用适当的试液进行处理和封藏，试液的选择必须具有合理性。中药制剂的鉴别显微鉴别16制片方法——试液的选择1.水或稀甘油：细胞壁颜色及淀粉粒、油滴、树脂2.水合氯醛：组织构造和细胞形状及叶片、花和花粉粒，尤其适于观察草酸钙结晶3.

5%氢氧化钾液：可溶解糊粉粒、淀粉粒及蛋白质，使细胞壁膨胀，从而增强透明度4.氯化碱液：试剂可漂白切片及除去叶绿素5.1:1乙醚乙醇液：用于脱去种子类药材切片中的脂类及挥发油类成分中药制剂的鉴别显微鉴别17制片方法中药制剂的鉴别散剂、胶囊剂：粉末+载玻片+适当的试液显微观察片剂：正中切开，由切开面由外至内刮取少量样品装片；粉末+载玻片+适当的试液显微观察丸剂、颗粒剂：研成粉末，装片粉末+载玻片+适当的试液显微观察显微鉴别18中药制剂的鉴别1.5%氢氧化钾液适量蜜丸+试管中+5%氢氧化钾液加热至玻璃棒挤压能离散为止，倾出碱液+水洗涤，取出少量+试液处理观察蜜丸：正中切开，由切开面由外至内刮去少量样品，装片；或切碎除蜜蜜丸——除蜜方法显微鉴别19中药制剂的鉴别2.氯酸钾法：适量蜜丸+试管中+硝酸溶液及氯酸钾少量缓缓加热至产生的气泡渐少时+氯酸钾少量玻璃棒挤压能离散为止，倾出酸液+水洗涤，取出少量+试液处理观察显微鉴别20蜜丸切碎+水洗涤离心管中离心分离沉淀（多次）取出少量+试液处理观察中药制剂的鉴别4.离心分离法：适量蜜丸+试管中+硝铬酸液

放置玻璃棒挤压能离散为止，倾出酸液+水洗涤，取出少量+试液处理观察3.硝铬酸法：显微鉴别21例中药制剂的鉴别显微鉴别22例中药制剂的鉴别显微鉴别山药茯苓熟地黄牡丹皮山茱萸泽泻23局限性1.药材粉末特征间的交叉干扰；2.经过提取的药材，其化学成分已被浸出，但仍然保持着原来的细胞形态特征，所以仅通过显微观察不能完全解决内在的质量问题；3.一种药材具有多种植物来源，通常粉末的特征各不相同；4.药材在处方中所占的比例小(如贵重药、剧毒药)专属性特征出现的几率更小；有的粉末粒度过细(如水飞法制得的矿物药粉末)，使特征变得不明显。中药制剂的鉴别显微鉴别24定义

利用物理的、化学的或物理化学的方法对制剂中所含的化学成分进行定性鉴别，从而判断制剂的真伪。中药制剂的鉴别理化鉴别方法化学反应法、显微化学法、光谱法、色谱法、指纹图谱鉴别法、特征图谱鉴别法25

化学反应法

中药制剂的鉴别中药制剂化学成分的性质+合适的提取溶剂提取待检测成分排除其他成分干扰理化鉴别26

化学反应法——注意事项

1.避免附加成分的干扰：如注射剂、颗粒剂及糖浆剂2.慎重使用专属性不好的分析反应：如泡沫反应、三氯化铁显色反应3.对样品进行分离、精制：除去干扰分析反应的物质，借此改善鉴别方法的专属性4.采用阴性及阳性对照方式，对拟定的鉴别方法进行反复验证：防止出现假阳性中药制剂的鉴别27

化学反应法——例

中药制剂的鉴别牛黄解毒片中大黄、黄芩的定性鉴别反应取本品6片(包衣者除去包衣)，研细，加乙醇1Oml，温热10分钟，过滤，滤液作如下反应

(1)取滤液5ml，加镁粉少量与盐酸0.5ml，加热，即显红色。

(2)另取滤液4ml，加氢氧化钠试液，即显红色，再加30%过氧化氢溶液，加热，红色不消失，加酸或酸性时，则红色变为黄色。28定义：将具有升华性质的成分，在一定的温度下从制剂中分离出来，并以升华物所具有的某些理化性质作为制剂鉴定的依据。制剂中若有2种以上的药味都含有升华物，升华的温度不同，可控制加热的温度分段收集升华物，分别进行鉴定。中药制剂的鉴别升华法

理化鉴别29中药制剂的鉴别光谱法荧光法可见－紫外分光光度法红外分光光度法理化鉴别30光谱法——荧光法有些中药材中含有能产生荧光的化学成分：在可见光or紫外光照射下发出荧光，有的须经试剂处理后发出荧光。含有这类药材的中药制剂:荧光法鉴别操作方法:取制剂的提取液点在滤纸上或试纸上，置紫外光灯下(365nmor254nm)观察，有时则是加一定的试剂后再进行观察。中药制剂的鉴别理化鉴别31光谱法——紫外－可见分光光度法

中药材有些化学成分在紫外可见光区有选择性吸收，显示特征吸收光谱。不同的药材所含的成分不同，在一定条件下吸收光谱的特征可用于鉴别药材，因此该法也可用于中药制剂的鉴别。中药制剂的鉴别理化鉴别32光谱法——紫外－可见分光光度法中药制剂成分复杂，具吸收的加和性，样品不纯化，所得光谱为混合光谱，专属性差。样品纯化后测定吸收光谱，常见方法：1.规定吸收波长法2.对照品对比法

3.规定吸收波长和吸收度法

4.规定吸收波长和吸收度比值法

5.多溶剂光谱法中药制剂的鉴别理化鉴别331.规定吸收波长法：样品经适当处理后，测定吸收光谱，在一定波长处有最大吸收。

中药制剂的鉴别复方丹参片紫外光谱图283nm理化鉴别2.对照品对比法：取对照品或对照药材及供试品经处理后，制成对照品及供试品溶液，分别测定吸收光谱，比较二者吸收光谱的一致性。样品与对照品在280±2nm处皆有最大吸收，在254±4nm处皆有最小吸收。

例：大山馇丸的紫外光谱鉴定343.规定吸收波长和吸收度法：样品经处理后，在规定波长下，应有若干个吸收峰，并有相应的吸收度值。

中药制剂的鉴别4.规定吸收波长和吸收度比值法：样品在一定波长下应产生相应的吸收峰，并且吸收度与对照峰吸收度比值应在一定的范围内。需有对照品或参照物。

理化鉴别35光谱法——红外分光光度法对于中药材的真伪鉴别及掺杂检查可提供有价值的信息。主要成分的质和量大致相同，而且基本恒定，所得红外光谱也呈现很好的相似性，可重复，因而可作真伪鉴别依据：1.不太复杂的混合体系，图谱有特征性

2.统一分离提取方法，图谱特征强重复性好

中药制剂的鉴别理化鉴别36例1：熊胆、牛胆、猪胆的红外图谱比较

中药制剂的鉴别在特征区和指纹区三者则有明显的差别理化鉴别37色谱法

纸色谱

TLC法

GC法

HPLC法

中药制剂的鉴别理化鉴别38色谱法—纸色谱法

载体：纸固定相：纸上所含水分或其他物质展开剂供试品、对照品、对照药材

中药制剂的鉴别理化鉴别39色谱法—TLC法中药制剂的鉴别理化鉴别定义：

将适宜的吸附剂或载体涂布于玻璃板、塑料或铝基片上，成一均匀薄层。待点样、展开后，与适宜的对照物按同法在同板上所得的色谱图对比，并可用薄层扫描仪扫描，用于中药制剂的鉴定。40中药制剂的鉴别理化鉴别供试品溶液的制备

薄层板的制备点样展开显色与检视

操作步骤41色谱法—TLC法中药制剂的鉴别理化鉴别单一溶剂萃取法：采用单一溶剂萃取出样品中待测成分，舍弃其他成分

分段萃取法液－液萃取法固－液萃取法供试品溶液的制备：42中药制剂的鉴别理化鉴别TLC法使用的材料：

薄层板涂布器点样器材层析缸显色与检测仪器色谱法—TLC法43中药制剂的鉴别理化鉴别手工自制板：玻璃：1～2mm优质平板玻璃洗净至不挂水珠，晾干吸附剂或载体

预制板：普通薄层板和高效薄层板TLC法使用的材料—薄层板44中药制剂的鉴别理化鉴别市售薄层板：临用前，110℃活化30min

聚酰胺薄膜不用活化

自制薄层板1份固定相+3份水（or含粘合剂的水溶液），在研钵中向同一方向研磨混匀，驱除气泡，铺板（0.2～0.3mm)。置水平台上室温晾干，110℃活化30min，置有干燥剂的干燥箱中备用。使用前检验均匀度、麻点、气泡、有无污染操作方法—薄层板的制备45中药制剂的鉴别理化鉴别手工、半自动、全自动；固定厚度或可调节厚度TLC法使用的材料—涂布器定量点样毛细管：0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、10µl微量注射器（针尖平头）半自动、自动点样器TLC法使用的材料—点样器材46中药制剂的鉴别理化鉴别注意：点样时勿损伤薄层表面操作方法—点样（1）器具：毛细管、微量注射器（2）点样方法：垂直方向，成圆点状(斑点直径≤3mm)or窄细的条带状（增大上样量）1cm1cm1cm10cm47中药制剂的鉴别理化鉴别展开剂的制备：新鲜配制展开：点样后的薄层板放入加有展开剂的层析缸中，密闭，一般上行展开，薄层板浸入展开剂深度一般要求溶剂最初的前沿距原点约5mm，展开至规定展距后立即将薄层板取出，晾干，以备检测。展距：一般8～15cm，高效板5～8cm操作方法—展开48中药制剂的鉴别理化鉴别TLC法使用的材料—显色与检测仪器49中药制剂的鉴别理化鉴别照相扫描图谱描画记录与保存50中药制剂的鉴别理化鉴别1.样品的预处理及供试液的制备2.薄层色谱的点样技术3.吸附剂的活性与相对湿度的影响4.空气温度、湿度的影响色谱法—TLC法主要影响因素51中药制剂的鉴别理化鉴别1.

样品的预处理及供试液的制备：制备样品供试液的溶剂要求:溶解度不宜太大，粘度不易太高（如正丁醇）or太低（如乙醚），沸点适中供试液净化处理相当重要2.薄层色谱的点样技术：

点样量不宜过大，最好控制在10µl以下不要破坏薄层板52中药制剂的鉴别理化鉴别3.吸附剂的活性与相对湿度的影响