标准解读
《GB/T 17812-1999 饲料中维生素E的测定 高效液相色谱法》是一项由中国国家标准化管理委员会发布的技术标准,旨在规定使用高效液相色谱法(HPLC)来测定饲料样本中维生素E含量的具体方法和要求。该标准详细阐述了检测过程的各个步骤、所需仪器设备、试剂与材料、操作程序、计算方法及结果判定准则,以确保测试结果的准确性和可重复性。下面是该标准主要内容的概述:
适用范围
本标准适用于各类饲料中维生素E(α-生育酚)含量的测定。维生素E作为一种重要的脂溶性维生素,对动物生长发育、抗氧化功能等方面有显著作用。
试验原理
利用高效液相色谱仪分离饲料样品中的维生素E,通过与标准品比较保留时间及紫外吸收光谱特征,实现定量分析。样品需经过提取、净化、浓缩等预处理步骤,以去除干扰物质并富集目标成分。
仪器与设备
- 高效液相色谱仪:配备紫外检测器,用于分离和检测维生素E。
- 旋蒸仪、离心机:用于样品的预处理。
- 分析天平:精确称量样品及试剂。
试剂与材料
标准规定了所需的各种化学试剂,如甲醇、正己烷、丙酮等,以及维生素E的标准溶液,用于制备标准曲线和样品测定。
操作步骤
- 样品准备:将饲料样品磨碎、混匀后,采用适宜溶剂进行提取,提取液经脱脂、净化处理。
- 标准曲线制备:用不同浓度的维生素E标准溶液进行HPLC分析,绘制标准曲线。
- 样品测定:将处理后的样品注入高效液相色谱仪,根据保留时间和峰面积,与标准曲线对比确定维生素E含量。
- 计算与结果表示:依据标准曲线计算样品中维生素E的含量,结果通常以mg/kg或IU/kg表示。
精密度与准确度
标准提供了重复性和再现性的要求,以及回收率实验的方法,确保检测方法的可靠性和稳定性。
限制与注意事项
强调了实验过程中应注意的细节,如防止光照、氧化对维生素E的影响,确保所有操作在避光条件下进行,以及正确处理和保存样品和试剂。
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文档简介
ICS.65.120B46中华人民共和国国家标准GB/T17812-1999饲料中维生素E的测定高效液相色谱法DeterminationofvitaminEinfeedsHigh-pressureliquidchromatography1999-08-10发布2000-02-01实施国家质量技术监督局发布
中华人民共和国国家标准饲料中维生素E的测定高效液相色谱法GB/T17812一1999中中国标准出版社出版发行北京西城区复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045电话:63787337、637874471999年11月第一版2004年11月电子版制作书号:155066·1-16259版权专有侵权必究举报电话:01068533533
GB/T17812-1999前饲料中维生素E的测定目前尚无国际标准,本标准是参照瑞士罗氏药品化学有限公司维生素研究部发表的《饲料中维生素、类胡萝卜——现代分析方法》中“用高效液相色谱法测定配合饲料、预混合饲料和浓缩维生素中的--生育酚”而制定的。在技术内容上参照该法,在编写格式上依据GB/T1.1—1993《标准化工作导则第1单元;标准的起草与表述规则第1部分;标准编写的基本规定》和GB/T1.4—1988《标准化工作导则化学分析方法标准编写规定》。为了使饲料中维生素E测定方法科学、准确、经济、实用.适合于我国不同实验室大量饲料样品的测定,在参照国外分析方法的基础上增加了反相色谱测定条件。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出并归口。本标准由国家饲料质量监督检验中心(北京)负责起草本标准主要起草人:陈必芳、赵小阳、李俊玲。
中华人民共和国国家标准饲料中维生素E的测定高效液相色谱法GB/T17812-1999DeterminationofvitaminEinfeedsHigh-pressureliquidchromatography1范围本标准规定了饲料中维生素E的测定-高效液相色谱法本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、复合预混料、维生素预混料中维生素E的测定。检测范围为每千克样品中含维生素E的量在1.1IU(dl-a-生育酚1mg)以上.引用标准下列标准所包含的条文,通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时,所示版本均为有效。所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/T6682—1992分析实验室用水规格和试验方法3方法原理用碱溶液皂化试验样品,去除脂肪,使试样中天然生育酚释放出来并水解,添加的生育酚乙酸酯为游离的生育酚。乙醚提取未皂化的物质·蒸发乙醚,用正己烷溶解残渣。提取物注入高效液相色谱柱,用禁外检测器在280nm处测定,外标法计算维生素E(dl-a-生育酚)含量。4试剂和材料除特殊注明外.本标准所用试剂均为分析纯.水为蒸水,色谱用水为去离子水.符合GB/T6682中用水规定4.1无水乙醚:无过氧化物4.1.1过氧化物检查方法:用5mL乙醚加1ml10%碘化钾溶液,振摇1min.如有过氧化物则放出游离碘,水层呈黄色.或加0.5%淀粉指示液,水层呈蓝色。该乙醚需处理后使用。4.1.2去除过氧化物的方法:乙醚用5%硫代硫酸钠溶液振摇,静置.分取乙醚层,再用蒸留水振摇,洗涤两次,重蒸·弃去首尾5%部分,收集留出的乙醚,再检查过氧化物,应符合规定4.2乙醉。4.3正已烷:重蒸(或光谱纯)441,4-二氧六环,4.5甲醇:优级纯4.6
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