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文档简介
实验三双重染色与永久
装片的制作授课教师:郑磊2008.12.10实验目的学习并掌握植物制片的双重染色法掌握徒手切片制成永久装片的方法实验原理番红-固绿对染法,是植物制片中最普遍的一种二重染色法,其染色程序简单并能清晰地显示出细胞结构。番红为碱性染料,能将木质化、角质化、栓质化的细胞壁,以及细胞核中的染色质、染色体和花粉外壁等染成红色;固绿为酸性染料,能使细胞质及纤维素的细胞壁染成绿色。实验用具显微镜、载玻片、盖玻片、单面刀片、双面刀片、培养皿、毛笔、滴瓶、胶头滴管、滤纸实验材料与试剂实验材料
吊兰茎、蒜苔试剂
1%番红水溶液、1%固绿酒精溶液实验方法徒手切片
将材料切成薄而透明的切片,镜检以选择较理想的薄片。染色
将选好的切片置于载玻片中央,加一滴1%番红水溶液,染色15~20min,用滤纸吸去染液,再滴蒸馏水洗去浮色。实验方法脱水
依次滴少许30%
50%
70%
85%
95%各等级酒精各10~15s进行脱水,每滴一滴酒精后用滤纸吸去。复染
吸去95%酒精后,加一滴1%固绿酒精溶液,复染5~10s,再滴加95%酒精去浮色。实验方法透明
吸去95%酒精,滴加无水酒精,然后经1/2无水酒精+1/2二甲苯二甲苯(两次)每次2~3s,使材料完全透明。透明后保持二甲苯不挥发,盖好盖片,镜检。制成永久装片
掀开盖片,滴一滴中性树胶,再加盖片封片,然后置于30~35℃恒温箱中烘干。叶的横切玉米茎横切南瓜茎横切南瓜茎纵切作业制作一张合格的双重染色切片,要求薄
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