分子医学冬-实验报告_第1页
分子医学冬-实验报告_第2页
分子医学冬-实验报告_第3页
已阅读5页，还剩2页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

研钵，eppendorf26支，移液枪，刻度移液管（5mL），恒温水浴槽，可见光分光光度绿豆芽去头尾留中间茎部分→取约5g豆芽→pH5.6醋酸缓冲液1ml→研磨成浆→静置30分钟1.5ml→6000rpm20min→留上清(原酶液)→HAc20倍→试管10支0至9编号→各管磷酸苯二钠溶液0.5mL，35℃水浴预热2min，酶液预热1～90.5mL→3、5、7、10、12、15、20、25、30分钟各管到时间先后加入碳酸钠溶液2mL0号管碳酸钠溶液2mL05mL0～11号Folin酚应用液0.5mL，保温10分钟冷却0号管作空白，测各管A680nm以反应时间为横坐标以反应时间为横坐标A680nm90～8→→1～80.1～0.8mL酚标准应用液→90～8→1mol/LNa2CO32mL,Folin-0.5mL→35℃10分钟→0号管空白测各管A680nm（四）KmVmax试管7支0～6编号0～6号加入磷酸苯二钠溶液0.5、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.5mL→35℃2min→15s(方便计时)0.5摇匀，每管精确计时→保温15min→到达反应时间，立即加入1mol/LNa2CO3溶液2mL,摇匀Folin-0.5ml,00.5ml→35℃10分钟→0Km值和Vmax吸光012吸光012345678903570酶反应时间与产物生成量的关系曲1005反应时间酶反应时间与产物生成量的关系曲1005反应时间

012345678酚含量00酚标酚标准曲y=100酚含量吸光测定酶的KmVmax

V012345611/[S](L21酚含量V0酶的1/V0-1/[S]酶的1/V0-1/[S]y=92.987x+--0-50-123KmVmax由回归方程得：横轴截距-1/Km0.4724Km2.1168；1/Vmax=43.928，所以Vmax10

时间005反应时间酶反应时间与产物005反应时间酶反应时间与产物生成量的关系曲1005反应时间理论趋势吸光吸光吸光碳酸钠的时间没把握好。1、24、5号则反Vmax15min。0.2~0.8于0.05时，结合比耳定律，造成对应浓度相对误差远远超过5%。所以25min与30min的实验0.2~0.8的范围，可123“酚标准曲线”R2=0.9916。因为不涉及精确的时间控制，也不涉123在测定“KmVmax值”R2=0.8679.60.7~0.8之间。但是由于KmVmax的实验在最后进行，所以不能预料到最0.（0.8490.2~0.85%以上（机器本身因素6号数据存在误差，但是不会太大（5%12341234假若6

[S]V0210---012-y=70.763x+76.342R2=0.9586R21，由方程计算得到的：Km=0.9269，Vmax=0.01310.6号数据的计算得到（Km=2.1168，Vmax=0.02276）相差很大。据小很多，与Vmax定义，即如此处理数据无意义。因此原假设中舍弃6号数据不可行。氧化；醋酸

人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论