定量检验方法学的分析性能验证浅析

王青女，1972年出生，遗传学硕士，医学实验中心常规检测实验室负责人、技术主管，ISO15189质量管理体系，具有较为扎实的医学检验及遗传学专业知识。《医学（IOS15189:2007）第5.5“5W+1H六个方面，对定量检验方法学的性能验证进行汇总，供大家探讨和交流。一、为什么要做性能验证？性能验证是为了确保实验室开展的检验项目，所应用的检测系统的分析性能或检验项目的方法学能够满足检测及临床要求，从而保证患者标本检测结果准确可靠。二、进行性能验证的场所？按照实验室管理办法和认可准则的要求，医疗机构临床实验室应承担所开展检验项目的性能验证工作。三、何时需要做性能验证？1、以下情况应完成初次性能验证：新安装的仪器拟开展的项目；新开展项目；同一项目的试剂变更厂家或检验方法发生变更时可能对结果产生较大的影响时，可选择其所开展的部分检验项目进行分析性能证。2、何时需要做性能评估/评价?12个月进行一次评估，可通过评估如CV、均值等室内质控数据的变化趋势（批间精密度）、室间质评项目的结果的可接受性（正确度）、临床医护人员对结果的反馈（可报告范围）方式进行。若评估的结果不可接受，则需重新进行性能验证。四、哪些人员可以进行性能验证试验?性能验证试验应由实验室有资质的检验人员完成，必要时可由技术支持人员协助完成试验；而性能验证报告必须由资深的检验人员完成，并经科室主任审核后归档保存。五、性能验证包括哪些方面？定量项目性能验证的内容包括但不限于：精密度（批内、批间）；正确度；检测低限（灵敏度）；携带污染率；线性范围；可报告范围；生物参考区间；检验结果量值溯源；测量不确定度；等。六、如何实施性能验证？1、性能验证试验的准备工作（尤其是各项性能参数的判断标准的制定及其依据。验均需在室内质控结果在控的情况下方可进行。2、性能验证试验主要讨论精密度、正确度、携带污染率、线性范围、可报告范围的试验方法。精密度主要包括批内精密度和批间精密度两项批内精密度标本选择：选择低、中、高三个浓度或中、高两个浓度的新鲜标本/质控品；试验方法：连续重复测定20/21次；20次检测结果的SD和CV；TE或者符合试剂说明书的要求。供的标本浓度。批间精密度标本选择：选择低、中、高三个浓度或中、高两个浓度的新鲜标本/质控品；12021045天;20次检测结果的SD和判断标准：<1/3TEa；或者符合试剂说明书的要求。注意事项：若选择标本，首先应考虑检测物的稳定性，浓度要求同批内精密度；若检测物不稳定，则必须使用质控品进行该试验。正确度可采用以下七种方法进行正确度评价：①分析已知值的参考物质：因实验室不易得到参考物质，较少使用。争议，较少使用。不宜采用。④方法学比对试验；适用于引进新方法时，可以与原有的方法进行比较，最少分析20个新鲜标本，要求浓度覆盖线性范围，用两种方法同时测定同样的样品（偏倚<1/2Tea），进行相关回归分析。或的实验室，或与使用配套分析系统的实验室进行比对，结果满意。⑥分析室间质评物：最为常用。检测卫生部临检中心质评物，检测结果均在允许范围内。BAB615次检测结果的平均值，要求每次检测厂家提供的校准品B类不确定度）作为评价标准。携带污染率（加样针）标本选择：取高浓度室内质控品或高浓度新鲜标本，混合均匀后放置于1、2、3杯位置，再取去离子水或生理盐水放置于4、5、6杯位置；6H1H2L1L2L3；结果计算：携带污染率（L1L3）100%（HL）；判断标准：生化检验项目<2%。线性评价标本可使用添加物或校准品；上述条件均无法满足时，可选用满足临床需求的高值标本。试验方法：标本分别按、1：4（20%）、0：5（0%）的比例进行稀释，每个稀释度重复测定3次计算均值。结果计算：将实测值与理论值作比较（偏离应小于10%），计算Y=bX范围。判断标准：b在0.97～1.03范围内，a接近于0。可报告范围适用于实验室开展的线性范围不能满足临床标本检测结果需求的定量检验项目。标本选择：取一份接近线性范围高限值浓度的病人标本，用去离子水、生理盐水、低值血清或厂商推荐的稀释液进行系列稀释，稀释比例参照厂商提供的机内稀释倍数。试验方法：每个浓度重复测定