《菊花的组织培养》课件新人教选修

课题1菊花的组织培养通过必修课的学习，我们已经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么，有没有不用种子来培育植物的方法呢？组织培养营养繁殖扦插嫁接压条

扦插嫁接压条

课题目标说明植物组织培养的基本原理，学习植物组织培养的基本技术，进行菊花或其他植物的组织培养。课题重点与难点课题重点：植物组织培养过程中使用的无菌技术。课题难点：植物组织培养过程中使用的无菌技术。植物组织培养是二十世纪发展起来的新技术，近三十年来由于组织培养基础理论研究的深入，发展极为迅速，发表的文献浩如烟海，几乎以植物为研究对象的各个分支学科都在广泛进行组织培养。植物组织培养简介发展简史1838-1839年，德国科学家Schleide和Schwann发表了细胞学说，奠定了组织培养的理论基础。

1902年，德国植物学家Haberlandt根据细胞学说，提出单个细胞的植物细胞全能性（totipotency）理论。

1904年，Hanning最先成功地培养了萝卜和辣根菜的胚。

1922年，Knudson采用胚培养法获得大量兰花幼苗。

1934年，White用番茄根尖建立起第一个活跃生长的无性繁殖系，从而使非胚器官的培养首先获得成功。

1958年，英国科学家Steward等用胡萝卜根的愈伤组织细胞进行悬浮培养，成功诱导出胚状体并分化为完整的小植株，不但使细胞全能性理论得到证实，而且为组织培养的技术程序奠定了基础。

1962年，Murashinge和Skoog在烟草培养中筛选出至今仍被广泛使用的MS培养基。

1964-1966年，印度科学家Guha和Maheswari在曼陀罗花药培养中首次由花粉诱导得到了单倍体植株。

1972年，Carlson通过两个种的烟草原生质体融合培养，获得了第一个体细胞杂交的杂种植株。……

外植体灭菌与接种操作是指在人工培养基上，离体培养植物的器官、组织、细胞和原生质体，并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术。组织培养1、植物组织培养的原理是什么？植物细胞具有全能性，即生物体的细胞，具有使后代细胞形成完整个体的能力。思考：（一）植物组织培养的基本过程

基础知识离体的植物器官、组织、细胞脱分化愈伤组织再分化根或芽植物体2、植物组织培养的基本过程愈伤组织植物组织培养过程示意图上面的示意图中还有什么地方不够完善的？没有进行灭菌处理，试管也没有做密封等。1、外植体带菌2、培养基及接种器具灭菌不彻底3、接种操作时带入4、环境不清洁组织培养污染的主要途径及怎样预防污染？3、污染的的预防措施施（一）防止止外植体带带菌（二）保证证培养基及及接种器具具彻底灭菌菌（三）操作作人员严格格遵守无菌菌操作规程程（四）保证证接种与培培养环境清清洁1、植物学学家将胡萝萝卜的韧皮皮部细胞分分离出来，，将单个细细胞放在特特定的培养养基中培养养，获得了了许多完整整的植株，，这些植株株的特点是是()Ａ.彼此性性状极为相相似 Ｂ.都是单倍倍体植株Ｃ.植株的的变异频率率较高ＤＤ.都是纯纯合体植株株2、根据分分裂潜能，，干细胞可可分为全能能干细胞（（可发育成成完整的个个体）、多多能干细胞胞（可发育育成多种组组织和器官官）和专能能干细胞（（发育成专专门的组织织和器官）），则这些些细胞在个个体发育中中的分化顺顺序是()Ａ.全能———专能———多能ＢＢ.全能———多能———专能Ｃ.多能———全能———专能ＤＤ.专能———全能———多能练习习AB（二）影响响植物组织织培养的因因素植物组织织培养条条件含有全部部营养成成分的培培养基、、一定的的温度、、空气、、无菌环环境、适适合的PH、适适时光照照等。（二）影影响植物物组织培培养的因因素1、外植植体的选选取不同植物物的组织织培养难难度不同同同一种植植物的不不同组织织培养难难度不同同2、培养养基的配配制(MS培养养基)大量元素素：C、、H、O、N、、P、K、Ca、Mg、S微量元素素：B、、Mn、、Cu、、Zn、、Fe、、Mo、、I、Co有机物：：甘氨酸酸、烟酸酸、肌醇醇、维生生素、蔗蔗糖等植物激素素：生长长素、细细胞分裂裂素等3、不同同植物激激素使用用顺序和和使用量量4、消毒毒在培养的的整个过过程中，，都需要要是一个个无菌环环境原因因：5、pH、温度度、光照照菊花：pH=5.8温温度度控制在在18——22℃℃每日日光照12h植物组织织培养用用的培养养基，含含有植物物生长发发育所需需要的各各种营养养物质，，这些营营养物质质同样为为细菌等等微小的的生物提提供了适适合的营营养。在在这种培培养基上上，细菌菌等微小小的生物物比植物物细胞具具有更强强的新陈陈代谢能能力，它它们比植植物细胞胞生长、、繁殖得得更快，，而且它它们会产产生毒素素，使培培养的植植物细胞胞很快中中毒死亡亡。因此此，植物物组织培培养要想想取得成成功，必必须有效效地防止止细菌等等的污染染，保证证培养材材料、培培养基、、培养用用具完全全无菌。。为了达达到这一一要求，，就要在在植物组组织培养养过程中中进行一一系列的的消毒、、灭菌，，并且要要求无菌菌操作。。MS固体体培养基基成分及及比例P331.你能说说出各种种营养物物质的作作用吗？？同专题题2中微微生物培培养基的的配方相相比，MS培养养基的配配方有哪哪些明显显的不同同？答：微量量元素和和大量元元素提供供植物细细胞生活活所必需需的无机机盐；蔗蔗糖提供供碳源，，同时能能够维持持细胞的的渗透压压；甘氨氨酸、维维生素等等物质主主要是为为了满足足离体植植物细胞胞在正常常代谢途途径受到到一定影影响后所所产生的的特殊营营养需求求。微生物培培养基以以有机营营养为主主。与微微生物的的培养不不同，MS培养养基则需需提供大大量无机机营养，，无机盐盐混合物物包括植植物生长长必须的的大量元元素和微微量元素素两大类类。阅读课文文，思考考以下问问题2、你认认为组织织培养过过程中，，成功的的关键有有哪些？？这些步步骤的适适宜条件件是什么么？组织的脱脱分化及及愈伤组组织的再再分化。。植物组织织培养过过程中，，影响植植物细胞胞脱分化化、再分分化的最最重要因因素是植植物激素素，细胞胞分裂素素与生长长素之间间的浓度度比可以以调控植植株组培培过程中中芽和根根的形成成。激素配比比对组织织培养的的影响生长素与与细胞分分裂素的的比例决决定着发发育的方方向，是是愈伤组组织、长长根还是是长芽。。如为了了促进芽芽器官的的分化，，应除去去或降低低生长素素的浓度度，或者者调整培培养基中中生长素素与细胞胞分裂素素的比例例。高利利于根根的形成成生长素/细胞分分裂素适适中促促进愈愈伤组织织的形成成低利利于芽芽的形成成生长素/细胞分裂素高利于根和愈伤组织的形成适中利于根芽的分化制备MS固体培培养基外植体消消毒接种培养养栽培培二、实验验操作移栽栽冲洗—酒酒精—无无菌水冲冲洗—氯氯化汞——无菌水水冲洗至至少三次次之上此时的组组织或细细胞为离离体的，，即细胞胞所生活活的环境境为液体体有机物物营养环环境，而而不是能能体现其其整个植植物体的的光能自自养在培养过过程中，，是脱分分化、再再分化的的过程，，随着芽芽和根的的形成，，就具有有了自养养的能力力，是由由细胞到到一个个个体的演演变过程程1、高等等植物是是光能自自养型生生物，为为什么在在植物组组织培养养过程中中还需要要提供有有机物培培养基？？2、培养养过程中中为什么么需要进进行光照照?思考？1、培养养基的灭灭菌（高高压蒸汽汽灭菌））2、外植植体的消消毒（酒酒精、氯氯化汞））3、接种种的无菌菌操作（（酒精、、酒精灯灯——灼灼烧）4、无菌菌箱中的的培养；；5、移栽栽到消过过毒的环环境中生生存一段段时间。。3、在整整个操作作过程中中，是如如何来实实现无菌菌环境的的？4.你打打算做几几组重复复？你打打算设置置对照实实验吗？？答：教师师可以安安排学生生分组，，做不同同的材料料或配方方，最后后分别汇汇报成果果。但每每种材料料或配方方至少要要做一组组以上的的重复。。设置对对照实验验可以取取用一个个经过灭灭菌的装装有培养养基的锥锥形瓶，，与接种种操作后后的锥形形瓶一同同培养，，用以说说明培养养基制作作合格，，没有被被杂菌污污染。结果分析析与评价价（一）对对接种操操作中污污染情况况的分析析（二）是否完完成了对植物物组织的脱分分化和再分化化（三）是否进进行了统计、、对照与记录录（四）生根苗苗的移栽是否否合格②③练习1、下图图是植物组织织培养的简略略表示。据此此回答：（1）①表示示__________________，它它能被培养成成为④的根本本原因是_________________。（2）②表示示____________，它与与①相比分化化程度____________，，全能性____________。（3）若想制制成人工种子子，应选用____________。（4）若①是是花药，则④④是____________，继继续对其使用用____________处理可可获得____________正正常植株，该该过程称为____________。（5）若①是是胡萝卜根尖尖细胞，则培培养成④的叶叶片的颜色为为____________，这说说明____________。（6）若利用用此项技术制制造治疗烫伤伤、割伤的药药物——紫草草素，培养将将进行到____________。④①脱分化②再分化③离体的植物组组织或器官植物细胞具有有全能性愈伤组织低高③单倍体植株秋水仙素纯合体单倍体育种绿色含有表达叶绿绿体的基因②同常规的无性性繁殖方法相相比，组织培培养快速繁殖殖法主要具有有以下优点：：（1）快速。。采用常规的方方法如分株法法，一棵花卉卉一年一般只只能生产几株株或几十株，，但用组织培培养的方法则则每年可以繁繁殖出几万甚甚至数百万的的小植株。（2）周年生生产。花卉组织培养养快速繁殖是是在实验室中中进行，因条条件可控，所所以不受季节节限制，可以以全年进行连连续生产。而而常规的无性性繁殖则受季季节限制，只只能在花卉生生长季节进行行繁殖。（3）经济效效益高。花卉组织培养养快速繁殖所所需要的空间间小，在一个个200平方方米的培养室室内一年可生生产试管苗上上百万株。如如按每株1元元计算，每年年产值上百万万元。（4）以组织织培养繁殖的的种苗与母株株有著相同的的遗传基因。。所以使用这项项技术可让优优良的品种不不断地延续。。组织培养与常常规繁殖相比比优点众多课题延伸（略略）P36课后练练习1.答：植物物组织培养所所利用的植物物材料体积小小、抗性差，，对培养条件件的要求较高高。用于植物物组织培养的的培养基同样样适合于某些些微生物的生生长，如一些些细菌、真菌菌等的生长。。而培养物一一旦受到微生生物的污染，，就会导致实实验前功尽弃弃，因此要进进行严格的无无菌操作。2.答：外植植体的生理状状态是成功进进行组织培养养的重要条件件之一。生长长旺盛的嫩枝枝生理状况好好，容易诱导导脱分化和再再分化。试评价下列操操作正确与否否本课题内容小小结菊花组织培养养基础知识实验操作植物体的组织织培养影响组织培养养的因素细胞分化细胞全能性组织培养过程程营养激素环境条件MS固体培养养基制备外植体消毒接种培养移栽栽培9、静夜夜四无无邻，，荒居居旧业业贫。。。1月-231月-23Sunday,January1,202310、雨中黄黄叶树，，灯下白白头人。。。14:51:0314:51:0314:511/1/20232:51:03PM11、以以我我独独沈沈久久，，愧愧君君相相见见频频。。。。1月月-2314:51:0314:51Jan-2301-Jan-2312、故故人人江江海海别别，，几几度度隔隔山山川川。。。。14:51:0314:51:0314:51Sunday,January1,202313、乍见翻疑疑梦，相悲悲各问年。。。1月-231月-2314:51:0314:51:03January1,202314、他乡生生白发，，旧国见见青山。。。01一一月20232:51:03下午午14:51:031月-2315、比比不不了了得得就就不不比比，，得得不不到到的的就就不不要要。。。。。。一月月232:51下下午午1月月-2314:51January1,202316、行动出出成果，，工作出出财富。。。2023/1/114:51:0414:51:0401January202317、做前，能够够环视四周；；做时，你只只能或者最好好沿着以脚为为起点的射线线向前。。2:51:04下午2:51下下午14:51:041月-239、没有失失败，只只有暂时时停止成成功！。。1月-231月-23Sunday,January1,202310、很多多事情情努力力了未未必有有结果果，但但是不不努力力却什什么改改变也也没有有。。。14:51:0414:51:0414:511/1/20232:51:04PM11、成功就就是日复复一日那那一点点点小小努努力的积积累。。。1月-2314:51:0414:51Jan-2301-Jan-2312、世世间间成成事事，，不不求求其其绝绝对对圆圆满满，，留留一一份份不不足足，，可可得得无无限限完完美美。。。。14:51:0414:51:0414:51Sunday,January1,202313、不知香积积寺，数里里入云峰。。。1月-231月-2314:51:0414:51:04January1,202314、意意志志坚坚强强的的人人能能把把世世界界放放在在手手中中像像泥泥块块一一样样任任意意揉揉捏捏。。01一一月月20232:51:04下下午午14:51:041月月-2315、楚楚塞塞三三湘湘接接，，荆荆门门九九派派通通。。。。。。一月月232:51下下午午1月月-2314:51January1,202316、少少年年十十五五二二十十时时，，步步行行夺夺得得胡胡马马骑骑。。。。2023/1/114:51:0414:51:0401January202317、空山新雨后后，天气晚来来秋。。2:51:04下午2:51下下午14:51:041月-239、杨柳散和风风，青山澹吾吾虑。。1月-231月-23Sunday,January1,202310、阅读一一切好书书如同和和过去最最杰出的的人谈话话。14:51:0414:51:0414:511/1/