GB15980-2009一次性使用医疗用品卫生标准-医疗器械注册

GB15980-2009GB15980-2009附录E（规范性附录）

电离辐射消毒或灭菌效果检测E1常规检测可使用剂量计进行测定。E2生物检测E2.1生物指示物要求以短小杆菌芽胞E601（ATCC27142）为指示菌，以布片或厚滤纸片（0.5X1.0cm2）为载体，回收菌量为5X105cfu/片〜106cfu/片（灭菌时）或104cfu/片（消毒时）。杀灭90%微生物所需吸收剂量D10值为1.7kGy。E2.2布点要求用生物指示物应放于产品箱（或辐照箱）中吸收剂量最小区域并均匀分布于被灭菌医疗用品中，每次至少放置10个生物指示物。E2.3培养基采用营养肉汤培养基，配制方法如下：TOC\o"1-5"\h\z蛋白胨 10g牛肉膏 5g氯化钠 5g蒸馏水 1000mL将各成分溶于蒸馏水中，调pH至7.2〜7.4,分装，于121c压力蒸汽灭菌20min备用。E2.4培养方法和评价标准消毒或灭菌后回收菌片,连续培养（37℃）7天,每个指示菌片培养均为阴性,判为消毒或灭菌合格。同时设阳性对照。附录F（资料性附录）

接触性创面敷料阻菌性试验方法F1低水分条件下的阻菌性F1.1意义和应用本试验用于评价创面敷料在低水分条件下阻止细菌透过的性能。F1.2仪器F1.2.1叠式生物测定计数板（RODAC）。F1.2.2100g砝码。F1.2.3营养肉汤。F1.2.4营养琼脂培养基。F1.2.5粘质沙雷菌8100培养物。F1.3步骤F1.3.1用20℃~25℃的营养肉汤培养粘质沙雷菌24h,获得菌含量109个/mL。F1.3.2用营养琼脂培养基注满RODAC板。F1.3.3用无菌金属丝环浸沾试验菌液，在RODAC板的表面上接种一个“X”形，每一交叉线的长度不应超过2cm。F1.3.4将培养板置20℃〜25℃下培养24h,使菌落生长。F1.3.5以无菌操作将一个无菌敷料样品（表面积至少5cmX5cm）放到RODAC板上，使其覆盖“X”状的细菌培养物。F1.3.6在敷料上面放置注满新鲜血琼脂培养基、未接种菌的RODAC板，再在该RODAC板上加放一个100g砝码，以对材料形成持续压力。F1.3.7将整个培养板置20℃〜25℃培养24h。F1.3.8取下上层的血琼脂RODAC板，加盖并置20℃〜25℃下继续培养24h。F1.3.9检查该培养板被样品覆盖表面上是否有粘质沙雷菌生长。注：粘质沙雷菌在琼脂上呈现出红色菌落。F1.3.10再对两个样品重复该步骤。F1.4结果计算如果三个上层RODAC板中有一个有粘质沙雷菌生长，则样品未通过试验。F1.5试验报告报告至少应包括以下信息：a）敷料种类，包括批号；b）试验方法的任何偏离；c）试验结果；d）试验日期；e）试验人员的识别。F2半潮湿条件下的阻菌性F2.1意义和应用本试验用于评价创面敷料在半潮湿条件下阻止细菌透过的性能。F2.2仪器F2.2.1无菌培养皿。F2.2.2吸移管：每次能给出剂量精度为（0.2±0.01）mL。F2.2.3营养肉汤。F2.2.4营养琼脂培养基。F2.2.5粘质沙雷菌8100培养物。F2.3步骤F2.3.1用20℃〜25℃的营养肉汤培养粘质沙雷菌24h,获得菌含量约109个/mL。F2.3.2以无菌操作将一个无菌敷料样品（表面积至少5cmX5cm）移至装有无菌营养琼脂培养基的培养皿上。F2.3.3用无菌吸移管向敷料上滴5滴（各角部和中央各一滴）培养菌液。F2.3.4置20℃~25℃下培养24h。F2.3.5培养结束后，用无菌吸移管从敷料上将培养菌液吸除，用无菌镊子将敷料从琼脂表面取下。F2.3.6将培养皿置20℃〜25℃下培养24h。F2.3.7检查培养皿，观察样品覆盖的表面积内是否有粘质沙雷菌生长。注：粘质沙雷菌在琼脂上呈现出红色菌落。F2.3.8再对两个样品重复该步骤。F2.4结果计算如果三个RODAC顶板中有一个有粘质沙雷菌生长，则样品未通过试验。F2.5试验报告报告至少应包括以下信息：a）敷料种类，包括批号；b）试验方法的任何偏离；c）试验结果；d）试验日期；e）试验人员的识别。F3潮湿条件下的阻菌性F3.1意义和应用本试验用于评价创面敷料在潮湿条件下阻止细菌透过的性能。该试验专为膜敷料而设计。F3.2仪器F3.2.1500mL试剂瓶：颈口适合于法兰圈下的橡胶圈。F3.2.2300mL法兰圈：底部装有磨砂玻璃滤斗，法兰圈底部下配有橡胶圈。F3.2.3无菌胃型袋。F3.2.4营养肉汤。F3.2.5营养琼脂培养基。F3.2.6粘质沙雷菌8100培养物。F3.3步骤F3.3.1用20℃〜25℃的营养肉汤培养粘质沙雷菌24h,获得菌含量约109个/mL。F3.3.2以无菌操作将试剂瓶注满500mL营养肉汤，使弯月面在瓶口边缘以上。F3.3.3以无菌操作法在瓶口放置一无菌样品，使其完全接触培养基。F3.3.4将橡胶圈装于滤斗。F3.3.5将滤斗的磨砂玻璃底直接放置在试剂瓶口上的敷料上，用夹具夹紧。F3.3.6向滤斗中放100mL粘质沙雷菌液。F3.3.7用两个大的无菌胃型袋盖住整个装置，室温下放置24h。F3.3.824h后倒出粘质沙雷菌液。F3.3.9去除敷料，以无菌操作将100mL营养肉汤倒入一只无菌瓶中，置20℃〜25℃下培养24h。F3.3.10检查营养肉汤中是否有粘质沙雷菌生长。注1：营养肉汤中如有粘质沙雷菌生长，肉汤将变浊。注2：由于试验容易受交叉污染的影响，可采用传统微生物学技术对污染菌进行鉴别。F3.3.11再对两个样品重复该步骤。F3.4结果计算如果三个肉汤瓶中有一个有粘质沙雷菌生长，则样品未通过试验。F3.5试验报告报告至少应包括以下信息：a）敷料种类，包括批号；b）试验方法的任何偏离；c）试验结果；d）试验日期；e）试验人员的识别。附录G（资料性附录）

包装材料性能检验方法G1与灭菌过程的相适应性试验G1.1灭菌条件G1.1.1压力蒸汽灭菌：121℃,20min〜30min；134℃,2min〜6min。G1.1.2环氧乙烷灭菌：温度54℃,环氧乙烷浓度600mg/L〜1000mg/L,作用至预定时间。G1.1.3辐照灭菌：辐照剂量10kGy〜30kGy。G1.2操作要求G1.2.1压力蒸汽灭菌：按GB18278进行。G1.2.2环氧乙烷灭菌：按GB18279进行。G1.2.3辐照灭菌：按GB18280进行。G1.3结果报告：包装袋上化学指示色块变色情况及包装内生物指示剂灭菌情况。G1.4评价：在灭菌条件下，所有化学指示色块均达规定颜色。包装内生物指示剂应无菌生长。G2透气性材料微生物屏障试验G2.1湿性条件下微生物屏障性能G2.1.1器材a）试验微生物:金黄色葡萄球（ATCC6538）；b）培养基：血琼脂、营养琼脂、葡萄糖营养肉汤；c）真空干燥箱：100mbar；d）样片：面积50mmX50mm。G2.1.2操作步骤a）将样片于134℃压力蒸汽灭菌6min,100mbar真空干燥10min。b）将金黄色葡萄球接种于6ml葡萄糖营养肉汤培养基内，取37℃培养16h后的菌悬液作活菌计数。c）将预处理的样片外表面朝上平铺于无菌平皿内。d）用含107cGu/ml的金黄色葡萄球菌悬液滴到样片上，互不接触滴5滴，每滴0.1ml。e）将染菌样片在温度20℃~25℃,相对湿度40%〜50%条件下放置使其干燥，时间不超过6h。f）将染菌样片平铺于血琼脂培养基表面，完全接触，染菌面朝上，5s〜6s后将样片移开。g）将血琼脂培养基于37℃培养16h〜24h进行菌落计数。G2.1.3结果报告每个血琼脂培养基平板上生长的菌落数以及5个平板上生长的菌落总数。G2.1.4评价a）5个培养基平板上均无菌生长，试验菌不能透过样片。b）如5个培养基平板上生长的菌落总数W5,则用20个样片复测，在20个平板上生长的菌落数W5为合格。G2.2干性条件下微生物屏障性能G2.2.1器材a）试验瓶：250ml有盖玻璃瓶，螺旋盖带有34mm的孔：密封垫圈内径34mm,由聚四氟乙烯（PTFE）或带PTFE覆盖层材料制成；b）试验微生物：枯草杆菌黑色变种（ATCC9372）芽孢；c）培养基：营养琼脂培养基；d）铝泊、滤纸。G2.2.2操作步骤a）取100ml含106cfu/ml芽孢的乙醇（96%）悬液与100g无菌石英粉（0.04mm〜0.15mm）混合，50℃干燥16h。b）在试验瓶内加入20ml营养琼脂培养基并使凝固。c）将10个直径为42mm的圆形样片分别置于试验瓶两个密封垫圈之间，并用螺旋盖适当压紧,使样片被密封垫圈紧压在瓶沿上。d）将试验瓶用铝泊包裹，于121℃灭菌20min。e）灭菌并冷却后，移去铝泊包裹，称取0.25g染菌石英粉均匀撒于样片上。f）将试验瓶放入培养箱加热到50℃,取出放入冷藏箱降至10℃。如此为1次，重复5次。g）将试验瓶置37℃培养24h,数菌。G2.2.3结果报告:每个样片透过的菌落数及10个样片透过的菌落总数。G2.2.4评价：每个样片透过的菌落数应W5cfu,10个样片透过的菌落总数应W15cfu。G3无菌有效期鉴定G3.1样品放置条件G3.1.1自然留样法将样片放置室温下,模拟室内货架贮存,