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文档简介

程5

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7

基因工程的基本概念基因工程的基本原理基因工程的基本条件基因工程的操作过程目的基因的分离克隆大肠杆菌的基因工程真核酵母的基因工程A重组DNA技术的理论基础2基因工程的基本原理19世纪中孟德尔

豌豆杂交试验

遗传因子

经典遗传学20世纪初摩尔根

果蝇杂交实验

基因

基因学1944年艾弗瑞

肺炎双球菌转化实验

遗传物质DNA1973年伯格-杰克森-考恩-鲍耶

DNA分子体外拼接分子遗传学1953年沃森-克瑞克

DNA双螺旋结构

分子生物学基因工程B基因的分子生物学2基因工程的基本原理C基因工程的基本原理2基因工程的基本原理提高外源基因的剂量——分子遗传学原理筛选修饰重组基因表达的转录调控元件,如:启动子、

增强子、操作子、终止子、上游调控序列等列、mRNA非编码区、密码子等——分子生物学原理

修饰构建蛋白质生物合成的翻译调控元件,如:SD序

基因工程菌(微型生物反应器)的增殖及稳定生产——生化工程学原理

——分子生物学原理

D基因工程的支撑技术2基因工程的基本原理核酸凝胶电泳技术核酸分子杂交技术细菌转化转染技术DNA序列分析技术寡核苷酸合成技术基因定点突变技术聚合酶链反应(PCR)技术核酸凝胶电泳技术凝胶板核酸分子杂交技术ACCGTAGCTAGGGTTCACACAAATGGCCCGTACAAGTGTGTTT细菌转化转染技术DNA片段细菌细胞DNA序列分析技术双脱氧末端终止测序法的基本反应:

KlenowOH3'5'PTdNTP+

ddATP

TTTTTOH3'5'PA

G

T

C

GGCATTGCGTTACTAGTCCAGTACA寡核苷酸合成技术OHGHHHHOCH2ODMTPOMeNCHMeMeCHMeMeHDMT:二甲氧基三苯甲基激活缩合氧化脱取代基玻璃珠连接臂聚合酶链反应(PCR)技术5‘5‘5‘变性加热5‘5‘引物退火5‘5‘底物聚合5‘5‘5‘5‘加热变性5‘5‘5‘5‘5‘5‘5‘5‘5‘5‘5‘5‘5‘5‘5‘5‘5‘5‘5‘5‘5‘5‘5‘5‘退火引物底物聚合加热变性引物退火底物聚合123D基因工程的支撑技术2

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